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唐华1 单桂秋2（1.重庆市綦江齿轮厂职工医院检验科，重庆 401420；2.广州军区广州总医院输血科）
目前用于梅毒血清学检验方法有性病研究实验室试验（VDRL）、不加热血清反应素试验（USR）、快速血浆反应素试验（RPR）、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、梅毒酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）、梅毒胶体金法（SYP）、荧光密螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）、梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）、梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验（TPPA）、梅毒螺旋体制动试验（TPI）等10种，但临床检验室较常用的是TRUST、TPPA 。TP-ELISA多用于血站，临床检验室较少使用。由于检验方法较多，各种方法又有其特殊的临床应用价值，如何更合理地选用这些方法应用于临床梅毒检测是临床检验室需要解决的问题。为此，本文就如何更合理地利用TRUST、TP-ELISA和TPPA三种方法为临床梅毒的辅助诊断进行了探讨，现报告如下：
材料和方法
1.标本来源：根据梅毒诊断标准 [1]确定的早期潜伏梅毒8例，一期梅毒13例，二期梅毒20例，三期梅毒2例，临床治愈后梅毒复查病例13例。其它经临床确定为类风湿性关节炎8例、系统性红斑狼疮患者8例、乙型肝炎患者14例和健康体检者30例。
2．试剂：TRUST试剂由上海荣盛提供，TP-ELISA试剂由厦门新创提供，TPPA试剂由日本富士瑞必欧株式会社提供。
3．仪器：瑞士哈米顿公司生产的AT plus 2 全自动加样仪和FAME24/20全自动酶免分析仪。
4．方法：采用TRUST、TP-ELISA和TPPA三种方法分别对116份标本按照试剂盒的说明书操作方法进行平行检测。
5．三种方法阳性率、灵敏度和特异性的计算分别按文献[2]中的评价公式进行计算。本试验因临床治愈后梅毒复查病例的特殊性，不参与计算。
结 果
1．116份血清标本分别采用TRUST、TP-ELISA和TPPA法检测结果见表1。
表1 116份血清标本三种方法检测结果
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受检病人 例数 TRUST TP-ELISA TPPA
────── ────── ──────
＋ － ＋ － ＋ －
──────────────────────────────────
早期潜伏梅毒 8 5 3 7 1 8 0
一期梅毒患者 13 12 1 13 0 13 0
二期梅毒患者 20 20 0 20 0 20 0
三期梅毒患者 2 1 1 2 0 2 0
临床治愈后复查 13 2 11 13 0 13 0
类风湿性关节炎 8 7 1 0 8 0 8
系统性红斑狼疮 8 2 6 0 8 0 8
乙型肝炎患者 14 1 13 0 14 0 14
健康体检者 30 0 30 0 30 0 30
合计 116 50 66 55 61 56 60
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2．三种方法检测用于梅毒检测阳性率、灵敏度和特异性结果见表2。
表2 三种方法检测用于梅毒检测阳性率、灵敏度和特异性结果比较
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早期梅毒 一期梅毒 二期梅毒 三期梅毒 合计 灵敏度 特异性
阳性率(%) 阳性率(%) 阳性率(%) 阳性率(%) 阳性率(%) (%) (%)
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TRUST 63 92 100 1/2 76 88 83
TP-ELISA 88 100 100 2 97 98 100
TPPA 100 100 100 2 100 100 100
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讨 论
本次实验结果可以看出， 使用TRUST、TP-ELISA和TPPA三种方法对梅毒检测的灵敏度是TRUST最低，TPPA最高，特异性是TRUST最低，TP-ELISA和TPPA均为100%。TRUST与本实验所涉及的疾病有明显的交叉反应，产生了10例假阳性，提示特异性差，而对早期、一期梅毒和三期梅毒却出现了5例假阴性，提示灵敏度较差。
目前，我国大部分临床检验室对梅毒的血清学检查多采用RPR或TRUST。TP-ELISA已多用于血站对献血者血液的检验，在医院临床检验室的应用较少。TPPA多用于梅毒抗体的确诊试验。比较本次实验结果，结合临床治疗过程中的实验室监测情况分析认为：①TRUST灵敏度和特异性均低于TP-ELISA、TPPA，存在一定的假阳性率和假阴性率。主要原因为TRUST的检测原理是采用牛心磷脂作为抗原的非特异性检测，非特异性抗体在一期梅毒阶段增加（约感染后6周）[3]，特别是对早期梅毒的辅助诊断能力差，因此不适合用于早期梅毒的辅助诊断。但该方法操作简便，试剂价格便宜，反应快，不需要特殊仪器设备，方便测定抗体滴度，其滴度变化与梅毒的治疗情况呈正相关，适合用于疗效观察、随访和复发的辅助诊断以及基层医院应用 [2] 。②TP-ELISA是一种基于基因工程的特异性检测技术，灵敏度和特异性均较高，特异性抗体在梅毒的潜伏期即产生（约感染后2周）[3]，对梅毒的早期辅助诊断较好。TP-ELISA是检验科的常规操作技术，操作简便，试剂价格比较便宜，适合血站献血者筛查、医院大批量体检和大、中型医院检验室对梅毒感染的早期检查，但耗时比TRUST长，需要酶标仪、洗板机。其主要缺点该法检测的是梅毒IgM和IgG的混合抗体，梅毒IgG抗体治愈后相当长的时间内仍然存在较高的阳性率，甚至终身阳性 [3]，因此，TP-ELISA阳性只说明正在感染或曾经感染过，不能判断梅毒疾病活动与否，所以不能作为疗效监测手段 [4] 。故对梅毒的诊断必须结合临床表现，否则，可能导致临床误诊，同时增加患者的心理负担。若试剂生产商能生产TP-ELISA法梅毒IgG和IgM抗体独立检测试剂盒应用于临床，则更有价值。③TPPA的灵敏度和特异性比前两种方法都高，是临床常用的梅毒确诊试验，也可以进行效价测定，但试剂成本高，检验收费高，操作较烦琐，耗时较长，不适合大量标本的筛查，适合用于前两方法测定阳性后的确诊试验。由于该法检测同样是梅毒IgM和IgG的混合抗体，存在与TP-ELISA类似问题。
参 考 文 献
1 龙振华,张石革著.性传播疾病诊断与药物治疗学.北京:北京科学技术出版社,1999,8:334~336
2 邢培清,刘振玉,主编.实用输血检验.郑州:郑州大学出版社,2001,10:211
3 郑怀竟,刑文革,主编.免疫学检验与临床疾病安全输血.北京:北京医学大学中国协和医科大学联合出版社,1997,138~140
4 宋继权,盛晚香,冯谊,等.ELISA在梅毒血清学诊断中的应用.中国皮肤性病学杂志,2000,14（4）:258~259