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【摘要】 目的 研究牵拉性视神经损伤后脂质过氧化产物丙二醛（malondialdehyde，MDA）及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）的改变。方法 制备实验性牵拉性视神经损伤动物模型，取材检测不同时间点损伤眼视神经组织中脂质过氧化产物丙二醛含量和抗氧化物超氧化物歧化酶的活性。结果 正常组视神经组织中MDA含量为（2.44±0.31)nmol/ml，损伤组7天、15天时MDA分别为（5.38±0.49）nmol/ml、（5.43±0.37）nmol/ml；正常组SOD活性为（42.12±0.78）nu/ml,损伤组7天、15天时SOD分别为（28.78±1.41）nu/ml、（30.63±2.13）nu/ml。与正常组的统计学比较显示,损伤组MDA及SOD水平的改变差异有显著性（P＜0.05）。结论 牵拉性损伤可以导致视神经组织中MDA含量增加及SOD活性下降。
【关键词】 视神经损伤/牵拉性；丙二醛；超氧化物歧化酶
视神经损伤是人类在生产和生活过程中经常遇到的意外伤害，公元4世纪Hippocrates就首次提出了外伤性视神经病变的概念。目前，我国盲病患者约670万，眼外伤占2.6%，视神经损伤常见［1］。临床上常见的外伤性视神经损伤主要是由于视神经在遭受机械性外伤后，发生了所谓的二次继发性损伤［2］。外力作用除了造成视神经的机械性损伤,还导致视神经局部缺血或鞘下出血等血液循环的病变。局部组织缺血后再灌流引起活性氧自由基产生并诱发脂质过氧化链式反应。丙二醛（malondialdehyde，MDA）是脂类过氧化反应的最终产物之一,是脂类过氧化物的标志［3］；超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)是机体清除超氧阴离子自由基的一种重要酶,测定SOD活性可以反映组织的抗氧化能力［4］。本研究考察机械性牵拉损伤后不同时间视神经组织中脂质过氧化产物MDA含量和抗氧化能力（SOD）的变化。
1 材料与方法
1.1 实验动物及分组 新西兰大耳白兔10只（20眼）,由广州中医药大学实验动物中心提供。雌雄不拘,排除眼部疾病,随机分成两组:未手术的正常组10眼；手术后的损伤对照组10眼。动物术后于2天、术后7天及术后15天时分别处死2只、4只和4只,处死后取出眼球,取自球后至视交叉部的视神经组织标本匀浆待测。
1.2 损伤眼模型制作［5］ 将实验兔用氯胺酮基础麻醉(40mg/kg),在乙醚开放滴入麻醉下，行左侧开眶打开眶腔，暴露视神经,将视神经在距球后5mm处用4号丝线牵引,加120g砝码负荷45min,造成视神经牵引性损伤。术毕，整复视神经并缝合手术切口。
1.3 MDA及SOD测定 以硫代巴比妥酸反应比色法测定视神经中MDA含量,亚硝酸盐测定视神经组织中SOD活力。
1.4 统计学方法 各组数值求均数（±）和标准差（±s），数据在各时间点行配对t检验。
2 结果
2.1 MDA和SOD的正常值 正常兔眼视神经组织中MDA含量为（2.44±0.31）nmol/ml，SOD为（42.12±0.78）nu/ml。
2.2 手术损伤眼MDA和SOD含量的变化 损伤组受试眼视神经组织中MDA含量、SOD活力在术后2天时明显高于正常(P<0.01),术后7天、15天时,MDA含量显著增高(P<0.05),SOD活性下降(P<0.05)。说明牵拉性损伤后视神经组织中脂质过氧化反应加重，见表1。
表1 术后损伤对照组视神经组织中MDA含量及SOD活性改变 （略）
3 讨论
牵拉可引起视神经机械性损伤及局部组织缺血两种损伤,Walsh将其分为一次和二次损伤机制［2］,二次损伤包括随后的血管痉挛、收缩以及神经水肿,引起局部缺血和轴索损伤。这一损伤机制有多种因素作用,其中缺血再灌流与脂质过氧化有密切关系［6］。脂质过氧化反应过程中产生的烷自由基、烷氧基、过氧基等各种活性自由基可与组织中的蛋白质分子相互作用,游离蛋白分子中的氢,从而使细胞的酶系统失活,影响细胞功能。由于轴索细胞膜中含有丰富的不饱和脂肪酸,很容易遭受活性氧自由基损伤。本文结果表明:接受损伤手术的兔眼视神经组织中MDA含量在术后2天时明显增高,说明此时机械性牵拉对视神经的损伤作用在继续,而至术后7天及15天时，损伤组MDA水平仍然高于正常组。脂质过氧化链式反应的存在说明视神经轴索组织遭受到了氧化破坏，功能受到损伤。
SOD酶系统是机体内主要的抗氧化物酶。正常视神经内含有完善的抗氧化防御系统，可及时清除积累过量的自由基，它包括酶性或非酶性的防御体系，而SOD是有效清除超氧自由基的清除剂。本组实验在术后2天时，视神经组织内有大量MDA存在时，可见视神经SOD水平明显提高（P<0.01）,说明SOD能有效提高视神经抗氧化能力,但是随着组织损伤的进一步加重,特别是脂质过氧化链式反应消耗大量SOD,同时由于组织细胞损伤,减少了抗氧化物质的产生,视神经中SOD水平至损伤术后7天及15天时明显减少(P<0.05),削弱了其对视神经的保护作用。
由于外伤性视神经损伤是临床上较为常见疾病，而目前对其发病机制尚未完全明了，因此现有的治疗方法都很难使患者得到有用的视力。了解视神经损伤的病理生理机制，寻找经济有效的新疗法是临床上急需解决的问题。本实验观察了兔眼中牵拉性视神经损伤后组织中MDA和SOD活性水平的改变特点，有助于我们下一步进行的视神经细胞保护药物的研究。
【参考文献】
1 惠延年.眼科学,第5版.北京：人民卫生出版社,1999,226.
2 Walsh FB, Datholog I.Indirect trauma to the optic nerves and chiasm I.Certain Cerebral involvements associated with defective blood supply. Invest Ophthalmol, 1966,5:433.
3 Coroneo MT, Muller-Stozenburg NW, Ho A. Muller peripheral light focusing by the anterior eye and the ophthalmohelioses. Ophthalmic Surg,1991,22 (12):705-711.
4 方允中，李文杰.自由基与酶.北京：北京科学出版社,1989,63-65，150-168，244.
5 徐丽，夏德昭，李富君.复明中药对牵拉性视神经损伤后视神经及血中SOD、MDA水平的影响.中国实用眼科杂志，1998,16（12）：721-723.
6 Kenneth Ds, Dobert AG. Traumatic optic neuropathy survey of ophthalmology.Ophthalmology,1994, 38:487.
(编辑：朱兆耘)
作者单位： 518001 广东深圳,暨南大学医学院深圳眼科中心 深圳市眼科医院