骨痹消胶囊对膝骨性关节炎患者血浆SOD、MDA、NO的影响

　　【摘要】  目的  探讨口服骨痹消胶囊对膝骨性关节炎（OA）患者血浆SOD、MDA、NO的影响。方法  25例膝OA患者给予骨痹消胶囊口服。分别测量患者在用药前、1周后、3周后、7周后血浆SOD、MDA、NO的水平，数据用SPSS10.0软件进行统计。结果  用药1周后与用药前的血浆SOD有显著提高（P＞0.05）、MDA、NO差异无显著性(均P＞0.05)；用药3周后SOD极显著明显上升（P＜0.01），MDA、NO明显下降(均P＜0.05)；用药7周后差异有极显著性（均P＜0.01）。结论  骨痹消胶囊能有效改善膝OA患者异常的自由基代谢，降低NO的水平。

    【关键词】  骨性关节炎；骨痹消胶囊；自由基；一氧化氮

      Effects of “Gubixiao capsule” on the levels of SOD、MDA、NO in the plasma from patients with knee osteoarthritis

    TAN Hua-ru，PENG Jing-tao，KUANG Ying-wen.Fangxian Hospital of TCM，Hubei 442100，China

    【Abstract】  Objective  To explore the effect of “Gubixiao capsule” on the levels of SOD、MDA、NO in patients with knee osteoarthritis.Methods  25 cases of osteoarthritis orally take the medicine such as “Gubixiao capsule”. The levels of SOD and MDA and NO in plasma are detected before the treatment and when the patients are treated for a week，three weeks and seven weeks.The obtained data is statisticated by SPSS 10.0 software. Results  The levels of MDA and NO had no different between for a week and before treatment( P＞0.05，P＞0.05)，but there is for SOD(P＜0.05).There is significance after the treatment for 3 weeks(P＜0.05，P＜0.05，P＜0.01).7 weeks later，which is very different significance(P＜0.01，P＜0.01，P＜0.01）.Conclusion  “Gubixiao capsule” could effectively improve abnormal OFR and NO metabolism of patients with knee osteoarthritis.

    【Key words】  osteoarthritis; gubixiao capsule；free redicals；NO

    骨性关节炎(Osteoarthritis，OA)是中老年人多发病，以关节软骨进行性变性、破坏及骨反应性增生为其病理基础，有研究认为，关节软骨退变与自由基与一氧化氮的水平有重要关系。骨痹消胶囊是我院在多年临床经验方基础上开发研制的中成药，在既往的膝骨性关节炎患者的治疗中取得良好的效果，为探讨其作用机制，特对其中的25例患者的血浆进行测量，以观其对血浆SOD、MDA、NO的影响。报道如下。

    1  临床资料

    1.1  诊断标准  参照1986年美国风湿病学会推荐的膝关节膝骨性关节炎的诊断标准［1］：(1)膝关节痛在就诊的前1月内≥14天；(2)膝关节活动时有摩擦响声；(3)X线示膝关节骨端有骨赘形成；(4)膝关节周围有肿胀；(5)膝关节晨僵≤30min；(6)年龄≥40岁。具备(1)、(3)或(1)(2)(3)(4)(5)(6)即可诊断。

    1.2  纳入或排除标准  符合以上标准，并且近期未用过其他方法或药物，并且配合本研究的患者纳入本实验。排除标准：(1)关节间隙显著狭窄或关节间形成骨桥连接而早已骨性强直者；(2)有明显的膝关节内外翻畸形及患者有血管神经损伤史者；(3)有明显的脏器器质性病变或衰竭者；(4)妇女妊娠或哺乳者;(5)未按规定用药或不愿采血检验者；(6)年龄>80岁。

    1.3  一般资料  观测病例共25例，均为本院2005年3～11月的门诊患者，其中男11例，女14例，年龄41～77岁，平均（57.6±11.6）岁；病程1～6个月4例，7～12个月7例，13～24个月9例，大于24个月5例；按病情程度分级：轻5例，中12例，重8例。

    2  实验方法

    2.1  骨痹消胶囊的组方与用法  组方：当归15000g，赤白芍各100g，牛膝1000g，丹参1000g，全蝎 1000g，黄芪1500g，木瓜1500g，秦艽1500g，独活1000g，枳实1000g，全虫1000g，熟地2000g，骨碎补1500g，补骨脂1500g，杜仲1500g，甘草600g。由房县中医院制剂室加工浓缩制成胶囊，每粒胶囊含生药0.25g。成人每次口服6粒，每日3次。

    2.2  治疗过程与给药方法  在门诊筛选出合适的愿意配合的病例后，给其讲明治疗的方法与配合的过程，口服药物之前空腹抽血3ml，3000转离心取血浆。然后开始口服骨痹消胶囊，每次6粒，每日3次，饭后服用。在服药1、3、7周后分别空腹采取静脉血4ml，3000转离心取血浆。血浆于-80℃冰箱保存，待测。

    2.3  SOD、MDA、NO的测量  分别采用硝酸还原酶法测定NO，黄嘌呤氧化酶法（羟胺法）测定SOD活力，硫代巴比妥（TBA）法在532nm波长处测定吸光度以测定MDA。试剂采用由南京建成生物工程研究所生产的SOD试剂盒、MDA试剂盒、一氧化氮测定试剂盒。均按试剂盒说明书进行操作。

    2.4  统计学处理  采用SPSS 13.0统计软件包进行数据分析，采用配对的t检验。

    3  实验结果

    各周抽取的血浆测量SOD、 MDA、NO的结果见表1，由表中统计结果可以看出，骨痹消胶囊口服对膝骨性关节炎患者具有较好的清除自由基、降低NO的作用：用药1周后与用药前的血浆SOD有显著提高（P＞0.05）、MDA、NO无显著差别(均P＞0.05)；用药3周后SOD极显著上升（P＜0.01），MDA、NO明显下降(均P＜0.05)；用药7周后差异有极显著性（均P＜0.01）。表1  各病例药物治疗前及治疗1、3、7周后的血浆注：与治疗前相比：＃P＜0.05，＃＃P＜0.01

    4  讨论

    自由基是具有未配对电子的原子、分子或基因，是一种稳定的结构状态，具有活性的化学物质，人体内总自由基95%以上的是氧自由基，氧自由基往往是其他自由基生成的原因，在生物体内主要是活性氧、超氧阴离子自由基等，它们是引发脂质过氧化反应的氧化剂。在正常情况下，由于体内存在自由基清除剂，如超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化酶及过氧化酶等，体内自由基的产生与清除保持相对平衡。据文献报道［1，2］，氧自由基是关节衰老与退变的重要因素，过量的氧自由基抑制软骨细胞增殖引起软骨细胞死亡，抑制软骨基质蛋白多糖和胶原的合成，加速软骨基质的降解，导致软骨细胞的损伤；抑制关节内自由基的产生，或降低自由基的含量，可显著减轻OA关节软骨的退化。MDA是脂质过氧化反应的主要产物，SOD是机体内清除氧自由基的重要酶，两者的含量变化能够反应体内的脂质过氧化反应的状况［3］。一氧化氮（NO）是一种不稳定的自由基，可通过以下几种途径诱导OA的发生与发展：(1)抑制蛋白多糖的合成，促进蛋白多糖的降解;(2)抑制胶原的合成，促进胶原的降解;(3)调节软骨基质金属蛋白酶的活性;(4)抑制软骨细胞的增殖;(5)激活环氧化酶，增加PGE2的合成，引起关节疼痛，抑制软骨细胞增殖。大量的实验研究表明：降低NO的水平可抑制软骨细胞的破坏、促进破坏的软骨的修复［4，5］。本实验中，骨痹消胶囊较好地升高了血浆SOD的活性，降低了MDA与NO的水平，从而在临床的使用中取得了极好的疗效。

    骨性关节炎属于中医“骨痹”范畴，与年老体衰、长期劳损、外感风寒湿邪有关。肾主骨，肝主筋，肝肾不足，筋骨失养，而膝为筋之腑，故易出现膝关节疼痛和无力，患者常有膝关节反复肿胀积液、肢体困重无力。肝肾不足，气血虚弱，气血运行不畅，容易出现痰瘀互结，患者常出现关节畸形。骨痹消胶囊是我院多年临床经验的总结，采用熟地、骨碎补、补骨脂滋肝补肾为君，当归、赤白芍、黄芪、丹参补气养血活血、行气止痛为臣，木瓜、秦艽、独活祛风除湿、舒筋活络，全虫通络搜风为佐。牛膝性善下行，可率诸药直达病所，甘草调和诸药为使。诸药合用共凑补肝益肾、养血活血、祛风胜湿止痛的作用，故达到较好的治疗效果。

    【参考文献】

    1  Grigolo B，Roseti L，Fiorini M，et al. Enhanced lipid peroxidation in synoviocytes from patients with osteoarthritis. J Rhematol，2003，30(2)： 345-347.

    2  Vuolteenaho K，Moilanen T，Hamalainen M，et al. Regulation of nitricoxide production in osteoarthritic and rheumatoid cartilage. Role of endogenous IL-1inhibitors. Scand J Rheumatol，2003，32(1)：19-24.

    3  Miyagi I，Kikuchi H，Hamanishi C. Auto-destroy of the articular cartilage and free radical mediators.Lab Clin Med，1998，131：146.

    4  Guarda N，Oliviero F，Ramonda R，et al.Influence of intra- articular injections of sodium hyaluronate on clinical features and synovial fluid  nitric oxide levels of temporomandibular osteoarthritis. Reumatism，2004，56(4)：272-277.

    5  Haklar U，Yuksel M，Velioglu A，et al.Oxygen radicals and nitric oxide levels in chondral or meniscal lesions or both. Clin Orthop Relat Res，2002，403(10)：135-142.

    作者单位： 442100 湖北房县，房县中医院(Δ通讯作者)

　　 (编辑：悦  铭)