肺纤维化患者血清Ⅲ型前胶原和层粘连蛋白监测的临床意义

    摘要：目的  探讨不同程度特发性间质性肺炎（IIP）患者血清Ⅲ型前胶原（PCⅢ）和层粘连蛋白（LN）浓度的相关性。  方法  对29名IIP患者进行呼吸困难程度、胸部影像学改变、通气功能、肺容量、弥散量、静息时肺泡气-动脉血氧分压差、运动后动脉血氧饱和度等7个方面检查后给出临床-影像-生理（CRP）评分，根据CRP评分系统将患者分为低分组、高分组，与健康对照同时测定血清PCⅢ和LN水平。  结果  CRP评分与Ⅲ型前胶原作等级相关分析（rs=05238，P<001），二者呈正相关。血清Ⅲ型前胶原低分组与对照组无统计学差异（P=05823），高分组与对照组有统计学差异（P<0001），且高分组与低分组有统计学差异（P<001）。CRP评分与层粘连蛋白作等级相关，相关系数rs’=04227（001<P<005），显示正相关。低分组、高分组IIP患者血清层粘连蛋白与对照组有统计学差异（P<0001）。  结论    运用CRP评分系统作为衡量标准进行研究，血清PCⅢ及LN水平可作为评价肺间质病变活动性的重要的无创性指标。

    关键词：Ⅲ型前胶原；层粘连蛋白；肺疾病，间质性

    中图分类号：R56313    文献标识码：A    文章编号：1009-9727（2005）02-215-03

    Clinical significance of serum type Ⅲ procollagen peptide and laminin in idiopathic interstitial pneumonia and clinical response to treatment  YANG Rui-sheng, XIE Hai-ying,  ZENG Bi-juan (Songgan People’s Hospital of Shenzhen City,  Shenzhen 518105, Guangdong, P  R  China)

    Abstract：Objective  To explore clinical relevance of serum type Ⅲ procollagen peptide and Laminin in idiopathic interstitial pneumonia  Methods   A composite clinical-radiographic-physiologic(CRP)scoring system was devised,using these 7 variables:dyspnea,chest radiogragh,spirometry,luμg volume,diffusion capacity,resting alveolar-arterial PO2,and exercise O2 saturation29 patients with idiopathic interstitial pneumonia were divided into 2 groups according to CRP scoring system:low score group,high score groupThe serum concentrations of type Ⅲ procollagen peptide (PCⅢ)and Laminin were measured in patients and the control group  Result  The CRP score determination correlated with the serum concentration of PCⅢ(r=05823,P<001)The PCⅢ of high scores group was significantly higher than that of control group(P<0001),and was significantly higher than that of low scores group(P<001),but the low scores group wasn’t higher than that of control group(P=05823)The CRP score showed a significant correlation with the concentration of LN(r=04247,P<005)  Conclusion  Serum concentrations of PCⅢ and LN in patients with idiopathic interstitial pneumonia are important and not-hurted index to evaluate with CRP scores system regarded as measure balance

    Key words：Precollagen Ⅲ;Laminin;Lung diseases;Interstitial

    特发性间质性肺炎病理上主要表现为肺泡腔和间质内液体渗出，炎性细胞浸润，纤维母细胞增生、活跃，合成、分泌胶原蛋白增多。临床上，主要见于病程的早期或者疾病恶化时。此时如给予积极治疗，可促进炎症完全吸收，抑制纤维母细胞活性，减少胶原合成，从而使病情好转。因此正确判断疾病活动性已成为当前研究热点。国外报道的血清指标主要有循环免疫复合物（CIC）、Ⅲ型前胶原N端蛋白肽（PⅢP）、透明质酸（HA）和血浆纤维结合蛋白（Fn）等。有关血清LN、PCⅢ与肺间质病变的关系报道较少，为探讨它们之间的关系，我们进行了初步研究。

    1  对象与方法

    11  对象  病例组为根据2002年中华医学会呼吸病学分会制定的“特发性肺（间质）纤维化诊断及治疗指南（草案）”［1］确诊为IIP患者29例，其中男18例，女11例，年龄(60±15)岁。全部病例均无吸烟史，并排除已知原因的致纤维化疾病，如药物毒性作用、职业环境接触史和结缔组织疾病。运用WATTERS等的CRP评分系统将IIP患者分成低分组、高分组。CRP评分＜50为低分组，CRP评分≥50为高分组；对照组30例为健康体检者，其中男18例，女12例，年龄(58±10)岁。均无明确的呼吸系统疾病，X线检查心、肺正常。病例组及对照组均排除肝肾疾病及结缔组织疾病。

    12  CRP评分的界定  根据患者以下7个方面的情况给出CRP总分［2～4］：1）呼吸困难程度：2）胸部影像学改变；3）通气功能；4）肺容量；5）一氧化碳弥散量（DLCO）；6）静息时肺泡气-动脉血氧分压差［P（A-a）O2］；7）运动后动脉血氧饱和度（用所能达到的最大氧耗量预计值百分比来校正）。总分为100分。

    13  血清LN和PCⅢ的检测  清晨空腹取静脉血，分离血清，-20℃冰箱保存待测。血清LN和PCⅢ以放射免疫法测试，测试盒分别由上海海军医学研究所生物技术中心和重庆市肿瘤研究所中心研究室提供，均按说明进行检测。

    14  统计学处理  每例患者的CRP评分与Ⅲ型前胶原、层粘连蛋白的测量值进行等级相关分析，用Spearman法进行显著性检验。对对照组、低分组、高分组所测得Ⅲ型前胶原、层粘连蛋白数据用几何均数（四分位数）表示，应用秩和检验比较组间差异。P<005时，认为有统计学差异。

    2  结果

    21  CRP评分与Ⅲ型前胶原、层粘连蛋白的测量值进行等级相关分析。患者CRP评分与Ⅲ型前胶原进行等级相关分析(rs=05238，P<001)，二者呈正相关性；患者CRP评分与层粘连蛋白进行等相关分析（rs’=04227，001<P<005），也显示正相关。说明随着CRP评分的增高，Ⅲ型前胶原及层粘连蛋白均有升高趋势。Ⅲ型前胶原及层粘连蛋白的含量与病情轻重有关。

    22  各组血清Ⅲ型前胶原、 层粘连蛋白测定结果（见表1）。             (略)

    表1  CRP评分分组及血清Ⅲ型前胶原、层粘连蛋白测定结果

    Table 1  Results of CRP scoring serum type Ⅲ procollagen and laminin determined

    注：与对照组比较，P<001；与低分组比较，△P<001   

    经秩和检验比较对照组、低分组、高分组的组间差异，表1显示，血清Ⅲ型前胶原低分组与对照组无统计学差异（P=05823），高分组与对照组有统计学差异（P<0001），且高分组与低分组有统计学差异（P<001），提示对于病情较轻的IIP患者，Ⅲ型前胶原水平无明显增高，不能考虑作为诊断过筛的敏感指标，但结合相关性研究及高、低分组间差异，随着纤维化程度加重，Ⅲ型前胶原水平增高，提示可作为病情发展程度的指标。秩和检验低分组、高分组IIP患者血清层粘连蛋白与对照组有统计学差异（P<0001），但低分组和高分组无统计学差异（P=01723），本研究结果提示层粘连蛋白水平有助于判断病情严重程度。

    3  讨论

    特发性间质性肺炎以肺内纤维细胞的聚积和胶原等细胞外基质（ECM）的过多沉积为主要病理特征［5］。肺内的ECM中最丰富的成分是胶原，占肺干重1/3。迄今为止，已发现有14种不同类型的胶原，主要是I型和Ⅲ型胶原，其次是V、VI型。Bateman等［6］认为，肺纤维化发病机制的共同特征可能是体内胶原代谢的失衡，即胶原合成超过破坏，或胶原合成增加和（或）胶原破坏减少而导致胶原过多地沉积在肺实质内。近期有学者报道，肺部间质胶原（各种型别和Ⅲ型胶原）数量与IIP患者的临床病程相关［7］。ILD患者肺尸检和动物肺纤维化实验也显示，在活动性纤维化早期主要以Ⅲ型胶原增加为主，晚期则以I型胶原增加为主，并出现不可逆的肺纤维化。

    Ⅲ型前胶原（PCⅢ）为Ⅲ型胶原前体，其由细胞合成并被分泌到细胞外，在内切酶作用下，前胶原释放出羧基和氨基末端多肽（即PⅢP）后转化为原胶原分子，然后原胶原分子交联成胶原纤维。以往多以PⅢP值作为胶原代谢指标。开展PCⅢ放免检测技术后国内学者报道［8］将PCⅢ用作肝纤维化的检测指标，并发现PCⅢ与PⅢP值之间显著相关。闻心培等［9］报告的肺部疾病PCⅢ值均增高，反映肺内胶原合成代谢处于活跃阶段，大量胶原（包括I、Ⅲ、II型胶原）沉积脏器而致脏器纤维化。候杰等［10］对特发性肺纤维化肺组织免疫组织化学发现，肺纤维化早期肺泡隔内I、Ⅲ型胶原增多。Perez-Arellawo等［11］的研究发现，弥漫性肺间质病变关系密切，它可能参与了肺间质病变的过程，PCⅢ可用来区分疾病的活动性。但是血清PCⅢ的升高是否可作为肺纤维化活动性的临床标记物，目前临床研究尚有争议。

    层粘连蛋白（LN）是细胞外基质非胶原成分，由三条肽链组成的十字型结构分子。因其分子结构差异而分为七个不同类型。Kirtsching等［12］发现a1亚单位LN可能介导了基底朊细胞与表皮基底膜的粘附，如产生a1亚单位LN抗体，可能具有致病性。

    本组对患者CRP评分与血清PCⅢ、IN进行等级相关研究显示，IIP患者血清Ⅲ型前胶原和层粘连蛋白均与CRP评分呈正相关，即CRP评分越高，患者纤维化程度越重，PCⅢ和LN水平越高，相关性研究可说明二者与病情严重程度有关。另外，研究结果显示，病例组PCⅢ和LN水平高于对照组，病情较轻的患者PCⅢ水平变化不明显，但随着病情加重PCⅢ明显增高，提示血清PCⅢ水平的升高不能作为肺纤维化的临床诊断标记物，但动态监测却意义重大，因为它可以警示病情活动及进展恶化。同时，无论轻、重度患者血清LN都较对照组显示统计学差异，提示血清LN与肺间质纤维化的一致性。

    综上所述，IIP是一种进行性恶化进展的疾病，应用CRP评分可作为病情轻重的衡量标准进行研究，血清PCⅢ及LN水平可作为评价肺间质病活动性的重要的无创性指标。血清LN水平还可作为估价治疗作用的指标。血清LN和PCⅢ水平测定，技术简便，易于操作，有必要进一步的试验研究，以确定它的真正的临床应用价值。

    参考文献：

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    ［12］ Kirtsching G,Marinkovioh MP,Burgeson RE,et alAntibasement membrane autoutibodies in patients with antiepiligrin cicatrcial pemphigoid the alphe subunbit of laminin［J］J Invest Dermatol,1995,105:543～548

 作者单位：深圳市松岗人民医院，广东 深圳  518105

    作者简介:杨瑞生(1968～)，汉族，广东人，本科，主治医师，主要从事临床内科工作