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【摘要】 目的 建立气相色谱法检测拉氧头孢钠中残留有机溶剂，并利用GC-MS对残留有机溶剂色谱峰进行确认。 方法 采用顶空进样毛细管气相色谱法，以FID和MS检测器，载气为氮气，柱温：40℃，顶空温度：80℃。 结果 建立的检测方法能够有效分离甲醇、二氯甲烷、异丙醇和乙酸乙酯4种有机溶剂，拉氧头孢钠中2个残留有机溶剂的色谱峰，经GC-MS分别确认为甲醇和二氯甲烷色谱峰。 结论 建立的方法更能有效、准确地检测拉氧头孢钠中残留有机溶剂。
【关键词】 拉氧头孢钠；残留有机溶剂；气相色谱法；气质联用
Determination of residual solvents in latamoxef sodium by capillary gas chromatography.
CAI Shan-ying.
（Hainan Provincial Institute for Drug Control, Haikou 570216, Hainan, P. R. China）
Abstract：Objective Objective To establish a method for determination of residual solvents in latamoxef sodium and analyze each peak of residual solvents by GC-MS. Methods The residual solvents in latamoxef sodium were determined by headspace GC on HP-INNWAX column, with FID detector and mass detector, nitrogen as the carrying gas, the column temperature was kept at 40℃, the headspace temperature was kept at 80℃. Results The residual solvents including methanol, dichloromethane, isopropyl alcohol, ethyl acetate, were completely separated. Two residual solvents peaks in latamoxef sodium, the methanol peak and dichloromethane peak, were analyzed by GC-MS. Conclusion The method is feasible, accurate for quality control of the residual solvents in latamoxef sodium.
Key words：Latamoxef sodium; Residual solvents; Capillary GC；GC-MS
拉氧头孢钠（Latamoxef Sodium，Moxalactam Sodium）为新型第三代氧头孢类抗生素，抗菌谱广，抗菌力强，其化学名为（6R,7R）-7-［2-（二氟甲硫基）乙酰胺基］-7-甲氧基-3-{［1-（2-羟乙基）-1H-四唑-5-基］硫代甲基}8-氧-代-5-氧杂-1-氮杂双环［4,2,0］辛-2-烯-2-甲酸钠盐。目前我国未生产，主要由日本盐野义制药株式会社生产进口。JP收载拉氧头孢钠的质量标准，但未收载拉氧头孢钠中有机溶剂残留量测定方法［1］，USP23版曾收载拉氧头孢钠注射剂的质量标准［2］， 第24版后的USP均未收载。我国进口药品注册标准中收载二氯甲烷的测定方法［3］，但在其测定过程中发现色谱图中除二氯甲烷外，还存在其他的色谱峰，并且进口药品注册标准收载的测定法未能对这些色谱峰进行有效的分离，本文初步建立气相色谱法测定拉氧头孢钠中残留有机溶剂，并利用GC-MS对各色谱峰进行确认，确定拉氧头孢钠中检测到2个残留溶剂，分别为甲醇和二氯甲烷，其中甲醇主要为拉氧头孢钠自身裂解产生的。
1 材料与方法
1.1 仪器 Agilent 6890型气相色谱仪，Agilent 7894型顶空进样器，Agilent FID检测器，Finnigan Trace GC ultra气相色谱仪，Finnigan polaris Q 质谱仪, HS2000顶空进样。
1.2 供试品及试剂 拉氧头孢钠由日本盐野义制药株式会社提供，甲醇、二氯甲烷等有机溶剂均为色谱纯，由美国TEDIA公司提供。
1.3 实验方法
1.3.1 GC-FID色谱条件 选择色谱柱HP-INNWAX 弹性石英毛细管柱（30m×0.25mm 膜厚0.25um），柱温为140℃和40℃，载气为氦气，流速1.0ml/min，分流比3：1，进样口温度150℃，检测器温度170℃，顶空瓶温度80℃，顶空时间60min，进样针温度100℃，进样量1ml。
1.3.2 GC-MS色谱条件 选择色谱柱ATTM－WAXms弹性石英毛细管柱 （30m×0.25mm 膜厚0.25um），柱温40℃，载气为氦气，流速0.8ml/min，分流比50：1，进样口温度200℃，顶空瓶温度80℃，顶空时间30min，进样针温度100℃，进样量0.5ml；离子源为EI，离子源温度200℃，电离电压70eV。
1.3.３ 供试品溶液的配制 取拉氧头孢钠约200mg，加入无有机溶剂的水5ml置于20ml顶空瓶中振摇使溶解，密封；分别取甲醇、二氯甲烷、异丙醇、乙酸乙酯约100mg，加入无有机溶剂的水稀释，分别配制成20μg/ml溶液和混合溶液，取5ml置于20ml顶空瓶中振摇使溶解，密封。
2 结果
2.1 色谱条件的选择考察 采用进口药品注册标准收载的测定方法，即柱温为140℃的GC-FID色谱条件，并调整流速对甲醇、二氯甲烷、异丙醇、乙酸乙酯混合溶液和供试品进行测定，结果显示甲醇、二氯甲烷、异丙醇、乙酸乙酯未能有效分离， 降低流速也未能达到有效分离（图1）。
图1 柱温:140℃的色谱图（略）
采用柱温为40℃的GC-FID色谱条件，对甲醇、二氯甲烷、异丙醇、乙酸乙酯混合溶液和供试品进行测定，结果显示甲醇、二氯甲烷、异丙醇、乙酸乙酯能够有效分离，供试品的色谱图中检测到2个残留溶剂色谱峰，通过改变不同色谱条件进行多次实验，其中一色谱峰保留时间均与甲醇色谱峰的一致，另一色谱峰保留时间均与二氯甲烷的一致，初步确定拉氧头孢钠经加热后的顶空气体中含有甲醇（图2～3）。
图2 4种有机溶剂混合液色谱图（柱温:40℃）（略）
图3 拉氧头孢钠色谱图（柱温:40℃）（略）
2.2 色谱峰的确定 采用了GC-MS色谱条件进一步对拉氧头孢钠残留溶剂进行测定，以确认2个残留溶剂色谱峰，结果显示拉氧头孢钠中检测到2个残留溶剂，保留时间2.89min色谱峰的质谱图中存在质荷比（m/z）为30.99（M-H）的峰，初步推断为甲醇峰；保留时间3.23min色谱峰的质谱图中存在质荷比（m/z）为49（M-HCl）的峰，初步推断为二氯甲烷峰，同时在已有的标准谱库中进行检索，确定两个色谱分别为甲醇和二氯甲烷（图4～5）。
图4 拉氧头孢钠样品总离子流色谱图（略）
图5 保留时间2.89min（A）和3.23min（B）色谱峰的质谱图（略）
2.3 样品中甲醇来源的确定 采用柱温为40℃的GC-FID色谱条件对80℃干燥3h的拉氧头孢钠样品和未经处理的样品进行测定，结果显示经80℃干燥3h拉氧头孢钠样品与未经处理的样品一样，色谱图中含有甲醇峰，这提示样品中含有的甲醇可能为样品所裂解产生的（图6）。
图6 拉氧头孢钠色谱图（略）
2.4 样品的测定 采用柱温为40℃的GC-FID色谱条件对5批样品进行测定, 均检测到2个残留溶剂，分别为甲醇和二氯甲烷,其中二氯甲烷的含量分别为：0.013、0.006、0.009、0.007、0.006、0.012。
3 讨论
3.1 柱温的选择 采用140℃柱温的测定方法，主要考虑二氯甲烷的测定，未考虑样品中可能存在的其他有机溶剂的干扰。本文选择与二氯甲烷沸点相近的有机溶剂进行实验，调整各种条件最终确定为40℃，在流速等条件改变的情况下，可以保证与二氯甲烷沸点相近的有机溶剂达到有效分离，并排除其他有机溶剂对二氯甲烷测定的干扰，更有效、准确地测定拉氧头孢钠中残留有机溶剂。
3.2 拉氧头孢钠结构中含有甲氧基，在加热过程中易裂解产生甲醇。本文采用高于甲醇沸点的温度干燥处理样品，样品中存在的有机溶剂已挥发，检测的样品应不含有甲醇，但色谱图中含有甲醇峰，这表明拉氧头孢钠在80℃顶空加热过程中部分发生裂解并产生甲醇［4］。
【参考文献】
［1］ 厚生省药务局. 日本抗生物质医药品基准解说［M］.1993：131～134
［2］United States Pharmacopeial Convention.Inc. USP 23,NF 18［M］.Washington DC:The Board of Trustees,1995，1040～1041.
［3］ 中国药品生物制品检定所. 进口药品复核标准汇编［S］. 2000，898～899.
［4］国家药典委员会. 中华人民共和国药典（二部）［M］.北京：化学工业出版社，2005，附录：54～57.
作者单位：海南省药品检验所，海南 海口 570216.