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【关键词】 免疫性血小板减少性紫癜 血小板相关抗体
免疫性血小板减少性紫癜(ITP)是指因血小板总数减少致凝血功能下降而引起牙龈和鼻出血、皮肤出血点等为特征的一类免疫综合症。我们应用EIA法检测147例ITP患者血小板相关抗体(PAIg)，进行外周血血小板总数和用骨髓穿刺涂片染色法对巨核细胞进行计数分类。最后探讨其检测指标与ITP的诊断与疗效观察的关系。
1 资料与方法
1．1 资料 收集本院血液科1998年3月～2006年1月住院诊断为ITP患者147例，男62例，女85例。年龄7～58岁，平均28.5岁。所有患者抽取静脉血经EIA法检测血小板相关抗体(PAIgG、PAIgA、PAIgM)，检测外周静脉血血小板总数。骨髓穿刺涂片染色，计数全片巨核细胞总数和形态学分类，临床诊断符合参考文献［1］标准。临床应用肾上腺皮质类固醇治疗均有效。对照组30例，男18例，女12例，年龄10～50岁，平均30.5岁，均为本院内科住院发热待查的患者，经骨髓穿刺涂片检查(排除血液病)属正常骨髓象,均无出血性疾病和内分泌系统疾病史。
1．2 方法
1.2.1 血小板相关抗体(PAIgG、PAIgA、PAIgM)检测 抽取被观察者静脉血3～4ml，加入含有EDTA-Na2的抗凝瓶内，混匀，分离血小板，由具有资质的专业人员按EIA法试剂盒操作说明书进行PAIg检测。试剂盒由上海太阳生物技术公司提供。酶标仪为意大利GDV DV990 BV4公司产品。PAIg检测结果超过正常对照组为阳性，计算阳性检出率。检测数据经统计学处理，结果以x±s表示。
1.2.2 外周静脉血血小板和骨髓巨核细胞计数与分类 抽取患者外周血经抗凝作用的全血用美国ABBOTT CELL-DYN1600型血球自动分析仪计数血小板总数。取外周血和骨髓涂片,经瑞氏姬姆沙染色液染色，在双目光学显微镜下,观察血小板和巨核细胞形态,并计数巨核细胞(1.5cm×3.5cm标准涂片)的总数与分类结果，检测数据经统计学处理，结果以x±s表示。两组比较采用t检验。
2 结果
147例ITP患者血小板相关抗体(PAIgG、PAIgA、PAIgM)与血小板总数和巨核细胞分类结果显示，ITP疾病组PAIgG、PAIgA、PAIgM含量和骨髓涂片中幼稚型、颗粒型巨核细胞数均明显高于正常对照组,血小板总数和产血小板型巨核细胞数均明显低于正常对照组,两组比较差异非常显著（P＜0.01）。结果见表1。
表1 147例ITP患者PAIg、PA、巨核细胞检测结果比较（略）
注:与对照组比较,*P＜0.01。
3 讨论
ITP乃毒害因子累及机体造血组织巨核细胞系统,导致产血小板发生障碍而引起的一种慢性出血性疾病。在血浆中可检出抗血小板抗体［2］。急性型多见于儿童，慢性型常见于成人，女性发病率明显多于男性，于病前常有病原性感染，特别是病毒感染源，如患流感、麻疹、腮腺炎、巨细胞病毒，水痘病毒及流行性出血热病毒等症。在病毒感染痊愈之后而引发本病。在该病检测中大多数患者血浆中可检测到血小板表面相关抗体。本研究结果显示：ITP患者血小板表面PAIgG、PAIgA和PAIgM的含量明显高于正常对照组（P<0.01）,PAIgG阳性检出率为76.19%（112/147）、PAIgA阳性检出率为23.80%（35/147）、PAIgM阳性检出率为34.69%（51/147）。有一部分患者PAIg结果不升高，其检测值在正常范围内，与文献［2,3］报道一致。ITP的发病机制可能是致病因子激活了T、B淋巴细胞和血小板，体内产生PAIg并形成免疫复合物，直接作用、损伤血小板膜，受到损伤的血小板再被单核—巨噬细胞吞噬与破坏，导致外周血中血小板数量减少。在正常生理条件下，人体脾脏是储存血小板数量最多的脏器，又是破坏血小板（被白细胞吞噬）的器官，某些病理性改变时，脾脏还是产生血小板抗体的场所。ITP患者严重时，脾脏切除后，血小板可迅速升高，抗血小板抗体浓度则下降。纠正机体免疫功能的失衡在ITP发病机制中可能起到重要作用［4］。
ITP患者骨髓巨核细胞增殖和分裂发生紊乱。病毒感染时，巨核细胞系统受累，表现为其成熟发生障碍。故小巨核、幼稚型巨核细胞增多(有的患者也有减少),而产血小板巨核细胞数量少。表1结果显示，ITP组患者骨髓巨核细胞的增殖，以幼稚型和颗粒型巨核细胞增多，产PA型巨核细胞减少，正常对照组以产PA型巨核细胞为主，两组相比差异非常显著（P<0.01）。巨核细胞总数增多者81例、减少者52例、正常者14例。资料分析认为ITP患者骨髓巨核细胞表面有一种血浆球蛋白，可能与抗血小板抗体等因子对巨核细胞产生的抑制作用有关，导致增生紊乱，并伴成熟障碍。ITP患者血液中存在着多种抗血小板抗体，PAIg浓度愈高，血小板破坏愈多，PA总数下降愈快。急性ITP患者PA降低的水平与PAIg的含量呈明显的负相关［5］。动态检测PAIg在诊断与治疗ITP症有较好的临床应用价值［3］。
【参考文献】
［1］ 赵武述,陈仁,卞志强.现代临床免疫学［M］.北京：人民军医出版社,1994,454～457.
［2］ 王凤计.现代血液细胞诊断学［M］.天津：天津科技翻译出版社,2004,368～371.
［3］ 刘红,彭贤贵,陈幸华,等.血小板相关抗体检测对血小板减少症的临床应用价值［J］.重庆医学,2003,5（32）:557～558.
［4］ 李家增,王鸿利,韩忠朝.血液实验学［M］.上海：上海科学技术出版社,1997,331～334.
［5］ 邱丽君,陈宏新,王淑香,等.特发性血小板减少性紫癜患者血小板抗体及血小板膜蛋白的改变及临床意义［J］.临床检验杂志,2002,20（2）:112.
作者单位：吉林医药学院附属医院,吉林 吉林 132013; 吉林医药学院,吉林 吉林 132013.