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【摘要】 目的 探讨肝癌患者血浆中VEGF含量的临床应用价值。方法 采用ELISA法定量检测20例诊断为肝癌的患者血浆中VEGF浓度，同时检测同期20例正常人血浆VEGF浓度作为对照。结果 肝癌组血浆中VEGF浓度明显高于正常对照组（P<0.05）。结论 采用血浆标本间接检测肝癌患者中的VEGF含量对肝癌的诊断和鉴别诊断有较重要临床价值。
【关键词】 血管内皮生长因子；血浆；肝癌
血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）是目前已知最强促血管生长因子之一，它具有增加内皮细胞通透性，促内皮细胞有丝分裂作用。研究发现，在肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma，HCC）患者中，其诱导肿瘤血管形成，促进肿瘤生长、转移，并与肿瘤的复发和预后密切相关［1］。近年来，有不少学者利用血清标本检测VEGF浓度，但是血清标本是否能真实反映体内VEGF浓度尚存在争议，部分学者提出用血浆标本更能真实反应HCC中VEGF的浓度。本文通过前瞻性测定肝癌患者血浆中VEGF含量，探讨肝癌患者血浆中VEGF含量对诊断肝癌的临床应用价值。
1 材料和方法
1.1 研究对象
前瞻性收集2006年8月～2007年4月住院或门诊HCC患者20例，并经手术病理（包括经肝穿刺活检术）证实的血浆样本。其中男性16例，女性4例，男女比例4:1，年龄27～74岁，平均年龄56岁。正常对照组为随机选择同期的20例正常体检者的血浆标本，男性16例，女性4例，男女比例4:1，年龄26～68岁，平均年龄55岁。
1.2 方法
1.2.1 标本采集
所有肝癌患者和正常体检对照者晨起空腹（禁食>8h），平卧，采集肘静脉血2ml置于EDTA抗凝管，室温静置4h后3 000r/min 离心10min，吸取血浆后置于-20℃保存待测。
1.2.2 血浆VEGF浓度检测
采用ELISA方法，由深圳晶美生物工程有限公司提供的人血中VEGF-ELISA试剂盒，检测方法按试剂说明书进行，测定结果在酶标仪（主波长450nm，辅助波长630nm）读取光密度值，绘制标准曲线，求得VEGF的相对含量。
1.3 统计学处理
采用SPSS11.0统计学软件，Fisher确切概率计算法，以P<0.05认为具有统计学意义。各组数据采用均数±标准差表示。
2 结果
HCC组外周循环VEGF水平均明显高于正常对照组（P＜0.05)。HCC组血浆浓度范围为(29.52～1 053.9)pg/ml，平均浓度为(332.63±303.78)pg/ml；正常对照组，血浆浓度范围为(27.3±138.86)pg/ml，平均浓度为(58.06±33.96)pg/ml。以血浆VEGF大于125.98pg/ml,为阳性标准，HCC组和正常对照组的血浆VEGF阳性率分别为75%(15/20)、10%(2/20)； HCC组与正常对照组血浆VEGF浓度阳性率有显著差异(P＜0.05)。
3 讨论
实体肿瘤的生长和转移有赖于新生血管的生成，VEGF是近年来发现的一种直接作用于血管内皮细胞，具有强烈促血管生成活性和增加微血管通透性的多功能细胞因子，在正常生理状态下组织和外周血液中含量较低，一些代谢旺盛的组织或发生恶性肿瘤的患者，其肿瘤组织及外周血中有VEGF过度表达［2］。本实验在HCC患者血浆中测得VEGF含量明显高于对照组，说明检测血浆中VEGF含量可以作为肿瘤监测的指标之一。 目前，外周血VEGF含量的检测大量用于恶性肿瘤的研究，较早的工作主要是对血清中VEGF的检测。但进一步研究表明，血清VEGF中的部分、甚至是大部分不是由肿瘤细胞，而是在凝血过程中由血小板及单核细胞释放［3］。检测血浆中的VEGF则能较客观地反映肿瘤组织分泌VEGF的情况，因而日渐为人们所接受［4］。
但血清和血浆中VEGF哪个更能反映肿瘤血管发生的情况一直有不同的观点：Mark等［5］通过研究116个直肠结肠癌患者血清与血浆中VEGF的水平及血小板VEGF水平，发现血清及血浆中VEGF水平相关，且都与血小板数量相关，建议在测量血清VEGF浓度时应考虑每个患者血小板水平。但Dolor等［6］人发现外周循环血的水平与血小板数量不相关。Seok等［7］人通过研究肝癌患者血清血小板VEGF水平，发现血清VEGF与血小板相关，认为血小板负荷的VEGF反映了肿瘤中释放出来的VEGF及血小板分离出来的VEGF，认为血清中的每个血小板VEGF水平能独立反映肿瘤血管发生的情况。但Nakayama 等［8］认为用血浆标本能减少在实际工作中收集标本时由于不同检测时间血液凝固对结果的影响，也不必考虑血小板数量的影响，血浆VEGF水平更能作为一种检测肝癌的重要指标之一。
用血浆VEGF水平来检测肝癌不失为一项较新的方法，但由于本组标本量较少，同时也只是进行了一些初步的研究，能否推广于临床，尚需要大量的深入研究来证实。
【参考文献】
［1］Kim HK, Song KS, Park YS, et al. Elevated levels of circulating platelet microparticles, VEGF,IL-8 and RANTES in patients with gastric cancer :possible role of a metastasis predictor［Ｊ］. Eur J Cancer,2003,94:735～740.
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［8］Nakayama Y, Sako T, Shibao K，et al.Prognostic value of plasma vascular endothelial growth factor in patients with colorectal cancer［Ｊ］.J. Anticancer Res, 2002,22(4):2437～2442.
作者单位：海南医学院临床学院，海南 海口 570102.