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【摘要】 目的：利用淋巴结穿刺和手术切除的淋巴结脓液进行结核菌的培养和药敏实验，寻求提高结核菌培养阳性率的方法以及淋巴结核菌的耐药性分析。方法：将穿刺和采取的脓液分别用直接接种法和2%H2SO4处理法接种于改良罗氏培养基上，观察生长情况，对生长的结核菌进行药敏实验。结果：用2%H2SO4处理法接种的脓液标本阳性率明显高于直接接种法。药敏实验敏感23例，敏感率54.8%，耐药19例，耐药率45.2%，耐药率较高。结论：利用2%H2SO4处理可以提高结核分枝杆菌培养的阳性率。淋巴结核结核分枝杆菌培养的药敏情况说明，产生耐药的原因主要与用药不规范、化疗措施不得力有关。应加强规范管理；在一线药物耐药的情况下，应注意二、三线药物的应用。
【关键词】 淋巴结核 结核 分枝杆菌
淋巴结核是除肺结核以外最常见的结核病之一，在治疗过程中往往需要进行穿刺和手术进行病理诊断和治疗。我们对103例诊断为淋巴结核的患者穿刺或切除的淋巴结脓液进行培养，结果如下：
1 资料和方法
1.1 一般资料 2003年5月～2005年8月在我院住院的患者103例，其中男61例，女42例，年龄5～54岁，平均年龄21.3岁，对淋巴结穿刺或抽吸获取的脓液和干酪样物质进行培养。
1.2 实验材料 ①采用改良罗氏培养基进行培养，其成分为磷酸二氢钾2.4g，硫酸镁0.24g，枸橼酸镁0.6g，谷氨酸钠7.2g，丙三醇12ml，蒸馏水600ml，新鲜鸡卵液1 000ml，孔雀绿20ml，制备方法按结核病诊断细菌学检验规程进行。②异烟肼(INH)、链霉素(SM)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)由卫生部疾控中心提供药品粉剂，氧氟沙星(OFLX)由上海双鹤药业提供。
1.3 药物浓度 培养基含药浓度按“1995年结核病诊断细菌学检验章程”绝对浓度间接法［1］：RFP(50，250μg/ml)、INH(1，10μg/ml)、SM(10，100μg/ml)、EMB(5，50μg/ml)、OFLX(1，10μg/ml)。
1.4 实验方法 直接用接种环挑取脓液约0.1ml，接种于改良罗氏培养基斜面上，另外一管在脓液中加入2～3倍量2%H2SO4充分混匀，以3 000转/min离心20～25分钟，取沉淀0.1ml接种于改良罗氏培养基内，沉淀部分均匀铺满整个斜面，于37℃温箱内培养，第一周的第3天和第7天分别观察一次，以后每周观察一次结果，生长者随即报告并在药敏培养基上做耐药性测定，污染者随即报告，至8周不生长报告阴性［1］。
2 结果
2.1 103例患者中，用直接接种法培养的结果是阳性17例，阳性率18.7%；污染9例，污染率8.9%；产生液化堆积现象7例，占7.3%。用2%H2SO4硫酸处理脓液的方法阳性42例，阳性率43.8%；污染3例，污染率2.2%；无1例产生液化堆积现象。
2.2 结核分枝杆菌的药敏实验结果 42例阳性患者中对5种抗结核药物耐药情况见表1。对5种药物全部敏感23例，占54.8%，总耐药19例，占45.2%；耐1种药的2例，占2.4%，分别是耐INH 1例，耐RFP 1例；耐2种药3例，占7.1%，分别是耐RFP+INH 2例和耐SM+RFP 1例；耐3种药5例，占11.9%，分别是耐RFP+SM+INH 3例，耐RFP+INH+OFLX 2例；耐4种药7例，占16.7%，分别是耐INF+RFP+SM+EMB 4例，耐INF+RFP+SM+OFLX 3例；耐5种药3例，占7.1%。表1 42例结核分枝杆菌对5种药物敏感性
3 讨论
淋巴结核由于在治疗过程中穿刺和做病检，往往导致久治不愈，引起感染和复发，形成窦道，在培养过程中容易污染。本文对103例标本培养分析可以看出，直接接种培养污染率较高，同时，脓液中含较高浓度的蛋白质及组织和细胞内的多种成分，可以使改良罗氏培养基理化特性和pH值发生改变，而出现液化堆积现象，从而明显降低了培养的阳性率；脓液经2%H2SO4前处理后，可将普通的细菌杀死，减少了污染率，并将脓度稀释、洗涤，杜绝了液化现象，有利于结核菌的生长。同时，前处理时同步离心，可将细菌浓集，菌量提高5倍左右，从而明显提高培养的阳性率。2%H2SO4处理标本，可以提高标本的阳性率，此方法值得推广使用。
在药敏实验中，阳性标本42例，总耐药率45.2%，属高耐药，同时耐2种以上药物占42.8%，属耐多药，其中耐RFP最高，19例，耐药从高到低依次为INH 18例、SM 14例、OFLX 8例、EMB 7例。这主要是我院的患者大多为全省各地转诊的患者，耐3种以上药物的大多为复治和难治病人，可以看出复、难治的结核病病人耐药率明显增加，说明各地落实(下转第258页)
作者单位：新乡医学院第一附属医院，河南 卫辉 453100