胃癌患者治疗前后外周血Th1/Th2状态与疗效关系的临床评价

　胃癌患者治疗前后外周血Th1/Th2状态与疗效关系的临床评价 PDF

　［摘要］  目的  （1）观察胃癌患者化疗前和化疗后的患者外周血Th1/Th2状态。（2）研究胃癌患者外周血Th1/Th2状态与化疗效果的关系，在分子生物学上评价化疗在胃癌治疗中的作用机制。方法  选择胃癌患者58例分别在化疗前、化疗后临床疗效评价有效率（37例）和无效率（21例）阶段，抽取清晨静脉肝素抗凝血20 ml，分离得外周血单核细胞（PBMC），加1640液配成混悬液；培养72 h后，取上清液用ELISA法分别测定细胞因子IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ浓度水平。结果  （1）胃癌患者的PBMC上清液中均反映出IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ的浓度水平。（2）胃癌化疗后临床有效患者同化疗前和化疗后无效患者的Th1/Th2水平比较，Th1类细胞因子IL-2含量明显增高，Th2类细胞因子IL-4、IL-6含量明显降低，P值分别为<0.05和<0.01。（3）胃癌化疗前与化疗后无效患者Th1/Th2水平比较，二者无明显差异。结论  （1）胃癌患者化疗后有效时PBMC上清液Th1类细胞因子IL-2处于优势状态，而Th2类细胞因子IL-4和IL-6受到抑制，说明化疗可以使Th2向Th1逆转。（2）临床上化疗有效者与Th2向Th1逆转的免疫效应有着密切的关系。
   
　　［关键词］  胃肿瘤；单核细胞；Th1/Th2；治疗结果

    学者在对人体外周血中Th1/Th2的研究中，已经发现Th1与Th2在肿瘤的不同阶段，其表达水平有明显的变化，在临床上，我们观察了58例胃癌患者治疗前后的Th1/Th2水平，拟通过对胃癌患者体内Th1/Th2水平的监测，判断患者的临床预后。

　　1  资料与方法

　　1.1  一般资料 

　　58例均系我院1999年2月~2004年5月期间收治的胃癌患者；其中男33例，女25例;年龄均在37~70岁之间，平均55岁;按照肿瘤TNM分期标准：Ⅱb期30例，Ⅲa期19例，Ⅲb期5例，Ⅳ期4例。

　　1.2  治疗方案 

　　以上患者明确诊断后均进行根治性手术，在我科住院期间采取联合化疗，选择MMC+5-FU+VCR和CF+5-FU+DDP方案。

　　1.3  疗效评定标准 

　　临床上参照WHO疗效评价标准分为有效和无效，其中有效包括完全缓解和部分缓解，无效包括稳定或无变化。

　　1.4  Th1/Th2测定方法

　　1.4.1  试剂 

　　细胞培养液RPMI1640由美国GIBCO公司出品；IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ试剂盒由美国GIBCO公司出品；IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ试剂盒由美国Enzyme公司提供。

　　1.4.2  标本采集 

　　清晨空腹抽取肝素抗凝血剂15 ml，肝素浓度59 u/ml，按常规分离出外周血单核细胞（PBMC），标本留取分别在化疗前和化疗后临床评判有效或者无效。

　　1.4.3  测定方法 

　　均使用1640液配制成3×106/ml的细胞悬液，培养72 h后，分别吸取上清液入EP管内，用ELISA法分别检测IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ。

　　1.5  统计学方法 

　　用方差分析进行数据统计处理。

　　2  结果

    通过对58例胃癌患者外周血中PBMC悬液IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ浓度水平的测定，我们将化疗前与化疗后相比较发现，其中化疗后无效组与化疗前没有明显差异;而有效组IL-2浓度较化疗前和无效组有明显提高（P<0.05），说明化疗对胃癌患者IL-2有明显促分泌作用；而有效组IL-4和IL-6浓度较化疗前和无效组有明显降低，P值分别<0.05和<0.01（见表1和表2）；说明化疗对胃癌患者IL-4和IL-6有一定的抑制作用。表1  胃癌患者化疗前与化疗后临床有效组PBMC悬液中Th1/Th2细胞因子浓度比较  （略） 注：与化疗前比较，*P<0.05，**P<0.01表2  胃癌患者化疗后临床有效组与无效组PBMC悬液中Th1/Th2细胞因子浓度比较  （略） 注：与无效组比较，*P<0.05，**P<0.0

　　3  讨论

    在研究小鼠CD4＋Th细胞克隆时发现了两种不同的细胞因子产生模式［1］：Th1细胞分泌IL-2、IFN-γ和TNF-β;Th2细胞分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10和IL-13。有文献报道［2］T细胞可以分为Th1和Th2两种亚群，并发现Th1和Th2是人体内Th细胞介导的连续效应反应的两种不同方向发展的形式。在Th1和Th2之间存在一种中间形式Th0过渡。研究表明［3］Th1/Th2来自一个共同的前体细胞，这种前体细胞可能属于尚未接受抗原刺激的静止细胞被称为Th0细胞。Th0细胞分泌IL-2、IL-5、IL-4和IFN-γ，产生和机制目前尚不清楚［4］，在对正常人PBMC使用单纯植物凝素刺激时可同时产生IL-2、IL-4、IL-5、IL-3、IL-10、IFN-γ、IL-6、IL-12、IFN-α［5］。

    本研究表明：在胃癌患者的PBMC悬液中，IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ均有一定浓度水平。Yamamura等［6］首先发现肿瘤患者体内以Th2型细胞占优势状态，并发现在胃癌、绒毛膜上皮癌、卵巢癌、脑胶质瘤、肾癌、非小细胞肺癌等多种类型肿瘤患者体内发现Th2漂移。在胃癌治疗的临床研究中表明胃癌化疗取得临床有效后的PBMC悬液中IL-2、IFN-γ浓度水平较临床无效患者有明显的提高，治疗有效患者BPMC悬液中IL-4、IL-6浓度水平较临床无效患者有显著下降，P值分别为<0.05和<0.01;在有效组Th1类细胞呈优势状态，而无效组Th2类细胞呈优势状态;研究表明，Th1/Th2漂移是胃癌患者细胞发生免疫逃逸的可能机制;通过对Th1/Th2的浓度的测定，了解胃癌患者经过化疗后的效果，说明人体Th1/Th2的浓度比例对胃癌患者治疗效果评判有一定价值。

　　［参考文献］

　　1  Mosmann TR，Chewinsre H，Bond MW，et al.Two types of murin T helper cell clone：definition according to profiles of lymphokine activites and secrected proteins.J Immunol，1986，136（4）：348.

　　2  Romagnni S.Human Th1 and Th2 subsets：doubt no more.Immunol Today，199，12（8）：256.

　　3  Swain SL，Weinverg AD，English M，et al.CD4＋ cells subsets lymphokine secretion of memory cells and of effector cells that develop from precursors vitro.J Immunol，1990，144（5）：1788.
4  刘 杰，魏海明，田志刚.Th1/Th2漂浮与抗肿瘤免疫.国外医学·肿瘤学分册，1999，25（6）：168.

　　5  Mchugh S，Deighton J，Rifkin I，et al.Kinetijcs and functional implications of Th1 and Th2 cytokine pattern.Eur J Immunol，1996，26（6）：1260.

　　6  Yamamura MJ，Modlin RL，Ohmen JD，et al.Local expression of anti-inflammatory cytokines in cancer.Clin Invest，1993，91（5）：1005.

　　  作者单位： 1 430074 湖北武汉，华中科技大学医院内科
　
　　　　　　　　　2 438000 湖北黄冈，黄冈市第一人民医院肿瘤科