点击显示 收起
关键词 毒性弥漫性甲状腺肿；T细胞；细胞因子
近几年的研究发现以IL-2、IL-8、IFN-γ为主的Th1细胞介导的细胞免疫，IL-4、IL-6为主的Th2细胞介导体液免疫应答。本课题旨在对毒性弥漫性甲状腺肿（Graves disease，GD）患者T细胞Th1/Th2亚群介导的免疫进行研究，从免疫水平探讨GD的免疫病理及发病机制。
1 资料与方法
1.1 一般资料 正常对照组32例（HD）组：男14例，女18例，平均年龄（31.5±10.8）岁，均为本院健康体检者。Graves病(GD)组：为2000年1月—2004年1月在本科就诊的患者。所有患者第一次就诊时均有典型的高代谢症候群的症状（疲乏、怕热、多汗、脾气暴躁、心悸、手抖等）。甲状腺肿大、突眼，结合甲状腺功能测定及甲状腺B超来确诊。其中30例为初诊患者（为GDa组），未经任何抗甲状腺药物治疗，病程（0.6±0.8）年。另30例为（GDb组），病程（3.6±1.8）年。用抗甲状腺药物（他巴唑或丙基硫氧嘧啶）治疗至少半年以上，（其中他巴唑10mg，3次/d，或丙基硫氧嘧啶100mg，3次/d治疗至少3个月以上，当甲功恢复正常后，开始缓慢减量，30例患者用药均为减量期）GD组平均年龄（32.2±9.80）岁。排除并发有其他自身免疫性或感染性疾病，也排除有任何心、肝、肾等重要脏器功能异常者。
1．2 方法 所有受试者早晨空腹抽新鲜血5ml，标本1 500r/min离心，5min后取上清，无菌分装，置-20℃冷冻待用。各种细胞因子的检测采用ELISA法。检测60例GD者，其中初诊患者GDa组及经用抗甲状腺药物治疗10~18周后，临床症状缓解；GDb组经测定甲状腺激素各项指标均有所下降，测定32例正常对照组血清中IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、INF-γ的含量，试剂盒由上海森雄科技实业有限公司提供，按说明书操作。细胞因子试剂盒批内cr 2.62%,批间cv 3.06%。TT3,TT4,FT4,TSH,甲状腺球蛋白抗体（TGAb），甲状腺过氧化物酶抗体（TMAb）的测定采用放射免疫法，药盒由深圳拉尔文股份有限公司提供，严格按操作顺序，由专人负责。仪器由国营二六二厂提供，型号为XH-6010r放射免疫计数器测定仪。
1．3 统计学方法 所有数据采用SPSS10.0统计软件，计量资料用±s表示。
2 结果
2．1 各组血清中细胞因子比较 表1显示IL-4,IL-6及IL-10各细胞因子在GDa组明显高于正常组，二组比较差异有统计学意义（P<0.01）；GDb组与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。而IL-2、IL-8、TNF-γ、IL-12等细胞因子在GDa组轻度升高，GDb组变化不大。
2.2 GD组和正常对照组甲状腺水平比较 见表2。
表1 GD组和正常对照组血清中细胞因子指标的比较（略）
表2 GD组和正常对照组甲状腺激素水平比较（略）
3 讨论
近年来，细胞因子在自身免疫性甲状腺疾病中的作用受到人们越来越多的关注。尤其是T细胞Th1/Th2亚群的划分，加深了人们对这类疾病免疫紊乱发生的新认识。IL-2、IL-8、IL-12、IFL-r主要由Th1细胞产生，可增强自然杀伤细胞（NK）的细胞毒性，激发迟发性超敏反应，主要介导细胞免疫应答。IL-4、IL-6、IL-10主要产生于Th2细胞，促进IgG1、IgA、IgE等抗体的产生，介导体液免疫应答。正常情况下Th1和Th2彼此相互抑制，处于动态平衡状态，维持正常的细胞免疫和体液免疫功能。Th1和Th2平衡在自身免疫性甲状腺疾病中被打破，Th1和Th2分泌的细胞因子在表达量上的比值能够反映机体总的免疫倾向［1］。GD是器官特异性自身免疫性甲状腺疾病，其发病与促甲状腺素受体（TSH-R）抗体的产生密切相关。TSH-R抗体模拟TSH的作用而过度刺激甲状腺滤泡细胞，导致甲状腺功能亢进。TSH-R抗体属于IgG1亚类，Th2型细胞因子可促进IgG1亚类的产生，故推测GD发病可能以Th2型细胞因子为主，其免疫应答以体液免疫为主。Kocjan等［2］检测来自GD患者和健康对照者外周血单核细胞培养液中细胞因子的滴度，发现与健康对照者相比，GD患者单核细胞培养液中IL-12明显减少，IL-10和IL-4明显增加，Th1和Th2分泌的细胞因子的比值明显降低，提示GD患者中细胞因子趋向Th2型。另外Kallman等［3］检测了GD患者血液中细胞因子的滴度，对IFN-R/IL-4、IFN-2/IL-10的比值进行了分析，结果也显示Th2型细胞因子的产生高于Th1型细胞因子，总的免疫趋向Th2型。但Miyauchis等［4］的研究却的得到相反的结论，他们发现GD患者血清IL-12、IL-8明显升高。因此认为Th1型细胞因子可能在GD中起重要的调节作用。本实验中GDa组及GDb组与对照组比较IL-6、IL-4和IL-10明显增加，而IL-2、TNF-γ、IL-12、IL-8与对照组比较变化不大。GDb组与GDa组比较IL-6、IL-4、IL-10差异有统计学意义(P<0.05)，而IL-2、IL-8、TNF-γ、IL-12等细胞因子在GDa组及GDb组均轻度升高，但二组比较差异无统计学意义（P>0.05）。实验结果表明由Th2细胞产生的各主要细胞因子IL-6、IL-4、IL-10在二组治疗前、治疗后均明显升高，而由Th1细胞产生的各细胞因子IL-2、TNF-γ、IL-12、IL-8升高不明显。所以本实验的结果表明免疫趋向支持Th2型。产生以上不同实验结果的原因可能是由于GD病程、采样时机、抗甲状腺药物及试验条件等不同引起。本研究表明，GD患者由于甲状腺出现免疫功能紊乱，尤其是Th1/Th2细胞群的失衡，导致以Th2介导的体液免疫应答为主，激活病理性免疫反应，导致一系列的病理生理改变和免疫功能紊乱。依据上述结果，可以采用Th2型细胞因子或抗细胞因子单抗去抑制或逆转GD病的免疫反应过程，为临床上GD病的治疗开辟新的途径。
4 参考文献
［1］ Phelps E,Wup,Bretz J，et al.Throid cell apoptosis.A new understanding of throid autoimmunity［J］.Endocrinol Metab Clin North Am,2000，29:375-388
［2］ kocjan T,Wraber B,Repnik U,et al.Canges in Th1/Th2 cytokine balance in Grave’s disease［J］.Pflugers Arch,2000,440(5 suppl):R94-R95
［3］ Kallman BA,Hiither M,Tubes M,et al.Systemic bias of cytokine production toward cell-mediated immune regulation in IDDM and toward humoral immunity in Grave’s disease［J］.Diabetes,1997,46:237-243
［4］ Miyauchis,Matsuura B,Onji M.Increased levels of serum interleukin-18 in Graves disease［J］.Thyroid ,2000,10:815-819
云南省昆明市延安医院内分泌科