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【摘要】 目的观察胡氏定喘方对支气管哮喘患儿细胞因子IL|8、TNF|α、NO的影响，进一步探讨胡氏定喘方治疗小儿支气管哮喘的机理。方法采用随机对照分组的方法，将68例患儿分为2组，治疗组用胡氏定喘方，对照组用美喘清治疗，观察2组治疗前后外周血浆中IL|8、TNF|α、NO含量的变化。结果治疗后2组患儿外周血中IL|8、TNF|α、NO含量均较治疗前明显降低（P<0.05或P<0.01）。结论胡氏定喘方具有降低血浆中细胞因子IL|8、TNF|α、NO含量的作用。
【关键词】 胡氏定喘方；小儿支气管哮喘；IL|8；TNF|α；NO
小儿支气管哮喘由于其病情迁延、反复发作，严重影响了患儿的身心健康。支气管哮喘是由多种细胞（如嗜酸性细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞、气管上皮细胞等）和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾患。白介素（IL）、肿瘤坏死因子（TNF|α）、一氧化氮（NO）在这种炎症反应过程中，起到了增强、维持及减轻炎症的调节作用。我院儿科于2006年5月至2007年11月选择了68例支气管哮喘患儿作为研究对象，分为2组进行治疗前后白细胞介素－8（IL|8）、TNF|α、NO的检测，现将结果报告如下。
1资料与方法
1.1临床资料
68例患儿均为我院门诊或住院病人，随机分为治疗组34例和对照组34例。治疗组中男19例，女15例；年龄2～14岁，平均（4.96±1.01）岁；病程2 d～26周。对照组中男20例，女14例；年龄2～14岁,平均（5.05±1.28）岁；病程2 d～28周。2组临床资料从年龄、病情、性别等方面比较，差异无统计意义（P>0.05），具有可比性。
1.2 诊断标准
诊断标准根据儿科哮喘协作组2003年修订的小儿哮喘的诊断标准[1]，将符合诊断标准且年龄在1～14岁的轻、中度支气管哮喘急性发作的患者作为研究对象：（1）反复发作的喘息、气促、胸闷或咳嗽；（2）发作时双肺可闻及散在或弥漫性的以呼气相为主的哮鸣音，呼气相延长；（3）使用支气管扩张剂疗效显著；（4）排除由其他疾病引起的喘息、气促、胸闷或咳嗽，合并心血管、肝肾和造血系统等严重原发性疾病及精神病患者、哮喘合并感染者，凡未按规定服药、无法判定疗效或资料不全等影响疗效判定者。
1.3治疗方法
1.3.1治疗组
采用胡氏定喘方。方药组成：炙麻黄6 g、细辛10 g、紫苏子10 g、杏仁6 g、五味子5 g、鹅管石15 g、毛冬青15 g、灵芝6 g、白芍10 g、补骨脂10 g、法半夏10 g、炙甘草5 g。每日1剂，水煎服。1～3岁服1／3量，4～7岁服2／3量，8～1 4岁服全量。
1.3.2对照组
美喘清片[1 mg/（kg·d）]，早晚分2次口服。
观察期间，2组均不用激素及其他平喘药。
1.4检测方法
1.4.1 TNF|α测定
采用放免法测定TNF|α，标准TNF|α及TNF|α单克隆抗体和检测试剂盒将购自北京邦定公司，具体操作按说明书进行。
1.4.2NO代谢产物检测方法
试剂购自上海复旦张江生物医药有限公司。先制作标准曲线，而后试管中加入0.1 mL样品(空白管加双蒸水)，用0.4 mL 75 nmol／L ZnSO4及0.5 mL 55 mmol／L NaOH充分反应后离心，取上清液0.5 mL加入0.5 mL Gly|NaOH缓冲液及双蒸水2 mL，还原镉1～1.5 g，反应90 min，取上清液1 mL，在545 nm波长比色测定OD值。
1.4.3IL|8测定
采用ELISA法，具体操作按药盒说明书进行。
1.4.4统计学处理
运用SPSS11.0统计软件，对测定的数据采用t检验。
2结果
2.1 2组治疗前后外周血浆IL|8、TNF|α的变化比较
见表1。
表12组治疗前后血浆IL|8、TNF|α的变化 （μg/L,±s）组别nIL|8TNF|α治疗前治疗后治疗前治疗后治疗组34598.3±169.4432.4±104.8*2.56±0.491.69±0.30*对照组34603.4±175.3423.9±103.9*2.52±0.471.68±0.45* 注：与同组治疗前比较*P<0.01
2.2 2组治疗前后血清NO浓度变化比较
见表2。
表2 2组治疗前后血清NO浓度变化比较 （μmol/L,±s）组别nNO治疗前治疗后治疗组3428.54±3.218.66±3.1*对照组3428.68±3.3417.76±2.3* 注：与同组治疗前比较*P<0.01
3讨论
支气管哮喘属中医的“咳喘”“哮证”等范畴，是具有系统免疫机制的气道慢性炎症疾病，多细胞炎性介质和细胞因子介导了该炎症过程。其中研究比较多的是IL|8、TNF|α、NO等。IL|8又称中性粒细胞趋化因子，对中性粒细胞、T淋巴细胞、嗜碱性粒细胞具有趋化作用，并可激活中性粒细胞释放多种炎症介质[3]。TNF|α是一种可由多种细胞产生的具有广泛生物活性的炎症细胞因子，是哮喘发病过程中的重要因素，能诱导血管内皮细胞表达黏附因子，促进炎症细胞的浸润和活化，并可刺激血小板活化因子、前列腺素、白三烯等炎症介质合成，从而导致气道高反应性[4] 。 NO可扩张气道血管，增加微血管渗漏，致气管黏膜充血、水肿；刺激腺体过度分泌，加重气道阻塞；与线粒体呼吸链或DNA结合酶的含铁部分结合，产生细胞毒作用；与被激活的炎症细胞产生的超氧阴离子（O－2）反应形成超氧亚硝基阴离子，并进一步分解为毒性更强的OH－及NO2，导致含硫基蛋白和脂质氧化，损伤气道组织；可使细胞内环磷酸鸟苷（cGMP）升高，导致肥大细胞脱颗粒，释放炎性介质。由此可见：过量NO可加重气道炎症反应[5]。动物实验研究也表明，哮喘豚鼠血清IL|8、TNF|α含量增高与哮喘的形成密切相关[6]。
胡氏定喘方是以攻补兼施、寒热并用、气血同调为法则组成，方中炙麻黄、细辛宣肺散寒，为君药；紫苏子、杏仁、鹅管石、法半夏降气平喘化痰，为臣药。君臣相伍治其标。补骨脂、五味子补肾纳气；毛冬青味苦，性甘凉，化瘀通络；当归、白芍养血润肺；炙甘草调和诸药，兼活血化瘀，为使药。方中麻黄、法半夏所含麻黄碱、皂甙等，又能缓解支气管平滑肌痉挛，降低气道反应性；五味子、补骨脂等能调节机体免疫功能。本研究结果表明，2组治疗后IL|8、TNF|α、NO含量均较治疗前显著下降（P<0.05或P<0.01），说明胡氏定喘方与美喘清片同样具有良好的作用效果，为临床应用提供了有力的科学依据。
【参考文献】
[1]中华医学会呼吸病学会哮喘组.支气管哮喘防治指南[J].中华结核和呼吸杂志,1997,20（5）：258－265.
[2]陈强.细胞因子与支气管哮喘的研究进展[J].实用儿科临床杂志，1999，14（3）：174－175.
[3]时宏诊，孙君江，刘家琴，等.IL|2等六种细胞因子与儿童支气管哮喘关系的研究[J].上海免疫医学杂志，2005，18（3）：162－165.
[4]毛山.IL|8炎症细胞与哮喘[J].国外医学·生理病理科学与临床分册，1996，16（4）：217.
[5]Yates D H，Kharitonor S A，Robbins R A，et al. Effect of a nitric oxide synthase inhibitor and a glucocortric osteroid on exhaled nitric oxide[J]. Am J Respir Crit Care Med，1995,152（3）：892.
[6]何丽.扶正化瘀法对哮喘豚鼠血清IL|8、TNF|α的影响研究[J].中医药学刊，2003，21（2）：12－13.
作者单位：深圳市宝安中医医院,广东深圳518133