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［摘要］ 目的 探讨基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）在高血压肾硬化发生及发展过程中作用。方法 利用酶联免疫吸附试验（ELISA）双抗体夹心法，分别对20例原发性高血压、20例高血压肾硬化、20例高血压肾硬化尿毒症病人外周血TIMP-1含量进行检测。结果 高血压肾硬化尿毒症组、高血压肾硬化组血清中TIMP-1的含量均高于原发性高血压组，差异有显著性（F=208.97，q=30.87、22.96，P<0.01）;高血压肾硬化尿毒症组血清 中TIMP-1的含量高于高血压肾硬化组，差异有显著性（q=7.95，P <0.01）。结论 TIMP-1含量增高在高血压性肾小球硬化和肾间质纤维化的发生及发展过程中起着重要作用。
［关键词］基质金属蛋白酶1组织抑制剂;高血压;肾硬化症;酶联免疫吸附测定
CHANGES OF SERUM TIMP-1 LEVEL IN PATIENTS WITH HYPERTENSIVE NEPHROSCLEROSIS AND ITS SIGNIFICANCE
HAN XING-TAO ， LIU LI-QIU
（Department of Health， The First People's Hospital of Qingdao Economic and Technological Development Zone， Qingdao 266555，China）
［ABSTRACT］Objective To study the correlation of tissue inhibitors of metalloproteinase-1 （TIMP-1） and hypertensive ne- phrosclerosis and to investigate the role of TIMP-1 in the development of the disease.Methods The TIMP-1 levels were deter- mined by enzyme-linked immunoadsorbent assay （ELISA） double-antibody -sandwich method in patients with essential hyperten-sion （EH，20 cases）， hypertensive nephrosclerosis （HN，20）， and hypertensive nephrosclerosis complicated by uremia （HNU，20）. Results The content of serum TIMP-1 in patients with HNU and HN was significantly higher than that of the EH （ F=208.97 ;q=30.87，22.96 ;P <0.01）. The content of serum TIMP-1 in patients with HNU was significanty higher than that of the HN （q=7.95，P<0.01 ）.Conclusion The increase of TIMP-1 plays an important role in the occurrence and development of hy-pertensive nephrosclerosis and renal interstitial fibrosis.
［KEY WORDS］ tissue inhibitor of metalloproteinase-1;hypertensive nephrosclerosis; enzyme-linked imunosorbent assay
持续高血压可导致肾小球硬化及肾间质纤维化，最终导致肾衰竭。早期研究提示，持续高血压导致肾小球硬化及肾间质纤维化状态下，细胞外基质（ECM）转运和降解通路受损。在典型肾小球硬化及肾间质纤维化状态下肾小球组织结构改变和微量清蛋白尿出现之前，即有ECM产生增多、基质金属 蛋白酶（MMPs）表达下调及金属蛋白酶组织抑制物（TIMPs）表达上调等异常。本文检测高血压性肾小球硬化及肾间质纤维化病人金属蛋白酶组织抑制 剂-1（TIMP-1）变化，并探讨其在高血压肾硬化发 生、发展中的作用，现将结果报告如下。
1 对象与方法
1.1 对象
1.1.1 正常对照组20例，男12例，女8例;年龄50～70岁，平均58岁。均为健康志愿者，无高血压 家族史。
1.1.2 原发性高血压组
20例，男11例，女9例; 年龄52～71岁，平均61岁。均符合文献制定的高 血压的诊断标准［1］。
1.1.3 高血压肾硬化组
20例，男12例，女8例; 年龄55～75岁，平均65岁。均符合高血压性肾硬 化的诊断标准［2］。
1.1.4 高血压肾硬化尿毒症组
20例，男13例，女7例;年龄58～75岁，平均69岁。均符合尿毒症 的诊断标准［2］。该组病人正行维持血液透析治疗。上述病人近期内均无明显感染征象。
1.2 方法
1.2.1 标本制备
分别取受检者空腹外周静脉血5 mL ，置于普通聚丙烯试管内，室温下静置10～20 min后 ，离心20 min （2 500 r/min），收集上清液，分装于干净的EP管中，-20 ℃冰箱冻存待检。
1.2.2 TIMP-1检测
将血清自然溶解，参照试剂说明书，用磷酸盐缓冲液浓缩物按下列标准进行稀释:正常对照组、原发性高血压组血清按1∶40稀释;高血压肾硬化组、高血压肾硬化尿毒症组血清按 1∶60稀释。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）双抗体夹心法检测TIMP-1。
1.2.3 统计学分析
结果均以 x±s 表示，数据间比较采用方差分析。
2 结 果
原发性高血压组、高血压肾硬化组、高血压肾硬 化尿毒症组及正常对照组TIMP-1含量分别是（1 058.12± 87.17）、（1 992.25±239.11）、（2 310.29±313.08）、（997.26±71.21）μg/L。高血压肾硬化尿毒症组、高血压肾硬化组血清中TIMP-1的含量高于原发性高血压组，差异有显著性（ F=208.97，q= 30.87、22.96，P <0.01）;高血压肾硬化尿毒症 组血清中TIMP-1的含量高于高血压肾硬化组，差 异有显著性（ q=7.95，P <0.01）。正常对照组与原 发性高血压组TIMP-1含量比较，差异无显著意义（q=1.49 ，P >0.05）。
3 讨 论
一般而言，MMPs/TIMPs的下调与疾病的进展及ECM的沉积有关，如高血压性肾硬化、糖尿病肾病、高脂血症等。高血压性肾损害伴有肾小球硬化的一个普遍表现是ECM积聚，导致系膜基质扩张、滤过面积减少，最终导致终末期肾衰竭。肾小球MMPs/TIMPs的水平能够决定肾小球硬化的程度 以及进展的速率。TIMPs的主要功能是抑制MMPs，在调节 ECM的代谢中起着重要作用。TIMP-1以可溶性 小分子多肽形式分泌［3］ ，由巨噬细胞和结缔组织产 生，广泛存在于组织和体液中，能被多种细胞因子诱导产生，在ECM积聚和降解的生理平衡中起关键作用。
TIMP-1主要抑制MMPs家族中的MMP-1、MMP-3、MMP-9的作用，介导多种肾小球疾病时肾 脏内ECM异常代谢、沉积，导致肾小球结构重塑，蛋白尿形成等病理生理改变。本文结果显示，高血压性肾硬化病人血清TIMP-1水平升高，对MMPs 家族中的MMP-1、MMP-3、MMP-9抑制作用增强，从而抑制组织间ECM的降解，使ECM聚积，导致肾小球硬化和肾间质纤维化。MANDAL等［4］的实验证实，与血压正常者相比，原发性高血压病人血清MMP-1水平降低， TIMP-1水平升高。与无左心室扩大的高血压病人相比，有左心室扩大的高血压病人MMP-1水平低，TIMP-1水平高。高血压病人行有效药物治疗1年后MMP-1水平增加，TIMP-1水平降低。妊娠高血 压病人随病情加重MMP-9的表达呈下降趋势［5］ 。
综上所述，TIMP-1在高血压肾硬化与高血压肾硬化尿毒症病人的含量增高，抑制MMPs对ECM的降解，使ECM在肾小球系膜区、基膜、肾小 管基膜及间质等部位沉积，造成肾小球硬化及间质纤维化。TIMP-1的增高与高血压性肾硬化的发生与发展有关，该结论为高血压肾硬化治疗提供了新思路。
［参考文献］
［1］叶任高. 内科学［M］. 第5版. 北京:人民卫生出版社， 2002: 6.
［2］王海燕. 肾脏病学［M］. 第2版. 北京:人民卫生出版社， 2001:2.
［3］BAKER A H， ZALTSMAN A B，GEOGE S J， et al. Diver- gent effects on rat vascular muscle cell invasion proliferation and death in vitro［J］. J Clin Invest，1998，101:1478.
［4］ MANDAL M， KUMAR R. Bc1-2 Modulates telomerase activ- ity［J］.J Biol Chem， 1997，272（22）:14183.
［5］陈淑明，娄艳辉. 基质金属蛋白酶-9在胎儿宫内发育迟缓病人 胎盘组织中的表达［J］. 齐鲁医学杂志，2004，19（5）:379-380.
1 青岛经济技术开发区第一人民医院保健科，山东 青岛 266555;
2 青岛大学医学院附属医院肾内科