侧脑室内注射复方丹参注射液对兔呼吸的影响

    【摘要】 目的  探讨复方丹参注射液对兔呼吸的影响。 方法  将膈神经置于双极银丝电极上引导其传出放电，同时用气管插管法记录呼吸运动;在兔侧脑室内注射微量复方丹参注射液，连续观察30min并与用药前及对照组比较。 结果  给药后30min膈神经放电频率达最高值，20min呼吸频率升至最高，10min呼吸幅度达最高值，与生理盐水组和给药前比较差异有显著性（P均<0.01或0.05）。 结论  复方丹参注射液侧脑室内注射使膈神经放电频率增加，呼吸加深加快。此作用可能是通过脑内β受体所介导的。
     
     
　　Effects of injectio Salviae Miltiorrhizae composita injected into lateral ventricle of cerebrum on the respiration of rabbits
     
　　Zhang Qirong，Wang Mingjiang，Li Li，et al.
   
　　Department of Physiology，Yunyang Medical College，Shiyan442000.
   
　　【Abstract】 Objective To investigate the effects of injectio Salviae Miltiorrhizae composita on the respiration of rabbits.Methods Diaphragmatic nerves set on bipolar silver electrodes were induced to discharge，and respiration was recorded by endotracheal intubation;a little Salviae Miltiorrhizae was injected into the lateral cerebral ventricle of rabbits，observed for30minutes and compared with controls.Results The discharge frequency of diaphragmatic nerves culminated in30minutes，respiratory frequency culminated in20minutes，and respiratory amplitude culminat-ed in10minutes，significantly different from theywere before medication and those of physiological saline group（P<0.01or0.05）.Conclusion Injectio Salviae Miltiorrhizae composita enhances the discharge frequency of diaphrag-matic nerves and boosts respiration.It is probably mediated by cerebral receptorβ.
    
      
　　复方丹参注射液（Salviae Miltiorrhizae，SM），具有扩张血管，尤其是冠脉扩张，使冠状动脉血流量显著增加，改善微循环;增加全血和红细胞2，3—二磷酸甘油酸含量，明显改善缺氧动物的氧分压和血氧饱和度 ［1］ ;护肝抗凝改变血液流变学等作用 ［2］ 。临床主要用于治疗心绞痛、心肌梗死、闭塞性脑血管等疾病 ［2，3］ 。近几年有报道复方丹参注射液治疗支气管哮喘发作期 ［4，5］ 、肺炎 ［6］ 、肺心病 ［7］ 等疾病，但其对中枢作用报道尚少，本研究主要是在兔侧脑室内注射微量SM，以观察其对膈神经放电、呼吸频率、呼吸幅度的作用。

　　1 材料与方法
    
　　1.1 材料 实验用药均用新鲜生理盐水（由太和医院生产）配制，复方丹参注射液为河南省援生制药股份有限公司（SM，pH6.8），心得安（propranolol，pH6.8），酚妥拉明（Phen-tolamine，pH6.8），阿托品（Atroping pH6.8），生理盐水（NS，pH7.0）。中国白兔由郧阳医学院实验动物中心提供。
   
　　1.2 实验方法 （1）动物及分组:实验用中国白兔40只雌雄不拘，体重1700～2300g，随机分为七组，即生理盐水组（n=8）、侧脑室内注射丹参组（n=8），静脉注射丹参组（n=4）、心得安+丹参组（n=8）、酚妥拉明+丹参组（n=4）、阿托品+丹参组（n=4）、吗啡+丹参组（n=4）。（2）手术及器材:在氨基甲酸乙酯（1g/kg）静脉麻醉下行气管插管，将气管插管的一端连接在压力换能器记录呼吸运动，另一端开放供动物呼吸。自颈背部分离一侧膈神经约1～2cm，滴加38℃液体石蜡保温、绝缘及防止神经干燥，然后用玻璃分针将膈神经轻轻搭在双极银丝电极上引导其传出放电，记录电极应悬空，双极银丝电极之间约8mm，其导线插头插入信号输入面板的插座1B;另一通道记录呼吸;通过MS-302生物信号记录分析系统，直接得出放电频率等指标。用江弯Ⅱ型定位仪固定兔头，按sawyer兔脑谱定位将外经为0.8mm的不锈钢引导管经颅骨钻插入一侧侧脑室内用502粘合剂和牙托粉固定于颅骨表面。在引导管内插入外经0.5mm的不锈钢内管，其尖端比引导管长1mm，另一端和微量注射器相连，用以注射微量药液，每次注射容量为30μl。为保持脑室容量恒定，每次注射前皆先放出等量脑脊液。用微量注射器恒速（min）注入侧脑室，调好所有参数，给药前先描记兔的正常膈神经放电、呼吸，5min作为基础值，给药后每5min立即记录膈神经放电、呼吸指标一次。并计算各观察指标在给药后不同时间的变化百分率，并与给药前及对照组比较。
   
　　1.3 统计学方法 所有数据以均数±标准差（ˉx±s）表示，经t检验确定实验结果的显著性差异。

　　2 结果
    
　　2.1 生理盐水对照组 8只兔于侧脑室内注射0.9%NS30μl连续观察30min，膈神经放电、呼吸未见明显变化（P>0.05）。
   
　　2.2 侧脑室内注射丹参组 8只兔于侧脑室内注射SM100μg/30μl，一般在给药后5min膈神经放电开始增加，30min时升至最高，由给药的（41.2±14.92）次/s升高至（51.30±23.63）次/s，升高幅度为42.26%左右，呼吸频率20min时升至最高，由（47.57±9.48）次/min升高至（56.14±17.07）次/min，升高幅度为18.73%，呼吸幅度10min升至最高，由（6.84±2.20）mm升高至（9.27±5.94）mm，升高幅度为66.03%。然后各项指标逐渐恢复（见表1～3）。

　　表1 侧脑室内注射丹参与生理盐水对兔膈神经放电的影响 （略）
    
　　注:与给药前比较 ※※ P<0.01， ※ P<0.05;与对照组比较 △ P<0.01
    
　　表2 侧脑室内注射丹参与生理盐水对兔呼吸频率的影响 （略）

　　注:与给药前比较 ※※ P<0.01， ※ P<0.05;与对照组比较 △ P<0.01
    
　　表3 侧脑室内注射丹参与生理盐水对兔呼吸幅度的影响 （略）

　　注:与给药前比较 ※ P<0.05;与对照组比较 △ P<0.01， △△ P<0.05
      
　　在8只兔侧脑室内注射SM观察到膈神经放电、呼吸频率和幅度变化与SM的剂量在一定范围内呈一定依赖关系。
   
　　2.3 静脉注射丹参组 在4只兔于静脉注射同样剂量的SM，连续观察30min，膈神经放电、呼吸频率、呼吸幅度无明显变化（P>0.05）。
   
　　2.4 心得安+丹参组 4只兔与侧脑室内注射β受体阻断剂心得安4μg/30μl，连续观察30min膈神经放电、呼吸频率、呼吸幅度无明显变化（P>0.05）。另4只兔于侧脑室内预先注射心得安4μg/30μl，5min后从原导管注射SM100μg/30μl，观察到丹参使膈神经放电频率、呼吸频率和呼吸幅度增加的作用明显减弱，与单纯SM组相比其中10min、15min、及20min时间点差异显著（P<0.05）。
   
　　2.5 吗啡+丹参组 4只兔与侧脑室内注射中枢抑制剂吗啡5μg/30μl，观察到吗啡使膈神经放电频率、呼吸频率和呼吸幅度明显降低，5min后从原导管注射SM100μg/30μl，连续观察30min，丹参并不减弱吗啡对呼吸抑制的作用。
   
　　2.6 酚妥拉明+丹参组 4只兔于侧脑室内预先注射α受体阻断剂酚妥拉明20μg/30μl，5min后从原导管注射SM100μg/30μl，连续观察30min给予SM后各观察时刻的膈神经放电、呼吸频率和幅度与单纯SM组相比，差异无显著意义（P>0.05）。
   
　　2.7 阿托品+丹参组 4只兔于侧脑室内预先注射Μ受体阻断剂阿托品2μg/30μl，5min后从原导管注射SM100μg/30μl，连续观察30min给予SM后各观察时刻的膈神经放电、呼吸频率和幅度与单纯SM组相比，差异无显著性（P>0.05）。
    
　　3 讨论
    
　　现代药理研究证明，复方丹参注射液能增加血清cAMP水平，使肥大细胞内cAMP增加，抑制细胞外钙内流及细胞内贮钙释放，降低细胞内游离钙浓度，降低细胞兴奋性，从而抑制生物活性物质的释放，抑制气道高反应性，改善肺的通气功能;增加全血和红细胞内2，3-二磷酸甘油含量，明显改善缺氧动物的氧分压和血氧饱和度，提高机体耐缺氧能力;增加冠脉血流量，改善心肌供血，加强心肌收缩力;丹参可明显抑制细胞超载，减少脑细胞兴奋性氨基酸释放，阻滞钙离子内流，减少脑损伤 ［8］ 。可改善微循环障碍、组织缺血缺氧和代谢障碍，使组织细胞恢复能量物质和恢复Na + -K + -ATP酶活性等作用 ［9］ 。本文主要研究SM对膈神经放电和呼吸的中枢性作用。
   
　　本实验观察到中国白兔侧脑室内注射SM100μg/30μl，膈神经放电、呼吸频率、呼吸幅度明显增加，注射容积和pH与SM药液相同的NS对上述指标无明显影响，静脉注射等量的SM也不引起上述变化，由此可见，兔侧脑室内注射SM引起的膈神经放电、呼吸频率、呼吸幅度明显增加的效应并不是机械性刺激和药液pH值等的非特异性影响，而是SM本身的中枢性作用。
   
　　从侧脑室内注射M受体阻断剂阿托品不能阻断SM增加膈神经放电频率、呼吸频率、呼吸幅度的作用来看，SM的此作用不是经由中枢胆碱能系统起作用的;而注射α受体阻断剂酚妥拉明不能阻断这一效应;在侧脑室注射中枢抑制药吗啡，可引起膈神经放电频率、呼吸频率和呼吸幅度逐渐降低，实验中SM并不能减弱吗啡对呼吸的抑制作用;但从侧脑室注射β受体阻断剂心得安可部分阻断SM对膈神经放电频率、呼吸频率、呼吸幅度增加的效应来看，可能是SM刺激了中枢肾上腺素能系统并且一部分可能是通过β受体而实现的。丹参为一复杂多种物质的混合物，详细机制尚有待进一步探讨。
    
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　　作者单位:442000湖北十堰郧阳医学院生理教研室（△ 机能实验室）