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【摘要】 目的 探讨全自动酶偶联法检测胸腹水腺苷脱氨酶(ADA)在鉴别结核性、细菌性、无菌性胸腹水患者中的临床意义。方法 利用双试剂酶偶联法,在全自动生化仪CX7上测定胸腹水ADA,分三组:结核性胸、腹水组20例,细菌性胸、腹水组40例,无菌性胸、腹水组40例。结果 细菌性胸、腹水组ADA值与无菌性胸、腹水组比较差异无显著性(P>0.05),结核性胸腹水组ADA值显著高于细菌性胸、腹水组和无菌性胸、腹水组P<0.01。结论 胸腹水ADA含量测定可作为结核性胸、腹膜炎和细菌性胸、腹膜炎及无菌性胸、腹膜水的鉴别诊断的一个重要指标。
【关键词】 腺苷脱氨酶; 结核性胸、腹膜炎
腺苷脱氨酶(ADA)广泛分布于人体各组织中,在嘌呤核苷酸代谢中起重要作用。腺苷脱氨酶(ADA)以往的测定方法为波氏比色法[1],该法操作繁杂,反应时间长,只适于手工比色法[1]。我们引进北京利德曼公司试剂,在美国贝克曼公司生产的全自动生化分析仪(CX7)上采用全自动酶偶联法测定胸腹水腺苷脱氨酶(ADA),该法具有灵敏度高、精密度好、结果准确、干扰少,操作简便、快速,适用于全自动生化分析[2]。共测定100例,报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试剂与仪器 试剂盒由中德合资北京利德曼生物有限公司提供;仪器为贝克曼库尔特公司的CX7全自动生化分析仪。
1.1.2 冻干质控品 由中德合资北京利德曼生物有限公司提供。
1.2 方法
1.2.1 研究对象 分三组:(1)结核性胸、腹水组20例,男12例,女8例;年龄24~76岁,平均50.5岁,来自2005年我院住院病人,根据相关诊断标准确诊为结核性胸、腹膜炎病例。(2)细菌性胸、腹水组40例,男24例,女16例;年龄27~62岁,平均44.5岁,通过涂片和细菌培养发现细菌。(3)无菌性胸、腹膜水组40例,男26例,女14例;年龄35~81岁,平均48.6岁,通过涂片和细菌培养未发现细菌。
1.2.2 测定原理 腺苷在ADA作用下脱氨基形成黄苷,黄苷在PNP作用下生成次黄嘌呤,次黄嘌呤在XOD作用下转化为尿酸和过氧化氢(H2O2),H2O2与EHSPT和4-AA在POD作用下生成醌色物,560nm处测定其吸光度,吸光度变化率与ADA活性成正比。ADA活性用U/L表示,即在最佳实验条件下,ADA每分钟催化1μmol底物(腺苷)发生转变所需的酶量为1个单位。用速率法监测吸光度升高的速率从而计算出标本中ADA的含量(U/L)。
1.2.3 统计学处理 统计学处理采用样本均数t检验,采用SPSS10.0统计软件。
2 结果
3组患者胸、腹水ADA水平比较,见表1。细菌性胸、腹水组与无菌性胸、腹水组ADA值差异无显著性(P>0.05),结核性胸、腹膜炎组ADA值显著高于细菌性胸、腹膜炎组与无菌性胸、腹膜水组P<0.01。结果见表1。
表1 3组患者胸、腹水ADA水平比较 (略)
注:细菌性胸、腹水组与无菌性胸、腹水组比较:*P>0.05;结核性胸、腹水组与无菌性胸、腹水组比较**P<0.01;结核性胸、腹水组与细菌性胸、腹水组比较P<0.01
合并细菌性胸、腹水组和无菌性胸、腹水组为对照组,对照80例ADA值为(7.40±5.68)U/L, 取总体x+1.96S作参考值,结果为(7.40±11.13)U/L,以ADA活性大于18.5U/L为界值,测定胸、腹水ADA诊断结核的敏感性80%,特异性93.8%。
3 讨论
文献报道胸、腹水 ADA水平的高低可用于结核性和非结核性胸、腹膜炎的鉴别诊断[3]。本研究显示细菌性胸、腹膜炎组与无菌性胸、腹膜水组ADA值差异无显著性(P>0.05),结核性胸、腹膜炎组ADA值显著高于细菌性胸、腹膜水组与无菌性胸、腹膜水组P<0.01,因此胸腹水ADA含量测定可作为结核性胸、腹膜炎和细菌性胸、腹膜炎及无菌性胸、腹膜炎的鉴别诊断的一个重要指标。但是,要注意测定胸、腹水ADA活性鉴别诊断结核有一定的假阴性、假阳性结果,因此,需结合临床表现,影像学检查等以准确诊断。
【参考文献】
1 叶应抚,王毓三.全国临床检验操作规程.第二版.南京:东南大学出版社,1997,235-236.
2 周美霞,管茶英,陈肖燕.全自动酶联法测定腺苷脱氨酶.临床检验杂志,2004,22(5):338-340.
3 Indian Journal of clinical biochemistry,2004,19(1):129-131.
(编辑:秋 实)
作者单位: 643020 四川自贡,自贡市第三人民医院