点击显示 收起
血小板保存和临床应用一直是输血医学领域研究的重点和难点之一。冰冻血小板以其保存期长、可大量储备、及时供应、特殊血型、自身输血、疗效可靠及无不良反应等优点，为医疗临床提供了满足需要的保证，我站自2001年10月开展冰冻机采集血小板以来，出现纤维蛋白析出38袋，笔者就此进行探索和分析，找出了产生的原因，并制定了相应的措施，现报告如下。
1 对象与方法
1.1 分析对象 2001年10月～2005年3月我站2928袋机采冰冻血小板的相关资料。
1.2 方法 2004年7月以前，将新鲜机采的血小板1袋（1个治疗量），在无菌净化间内，按冷冻保护剂（DMSO）（ml）=富含血小板血浆（ml）×0.071进行简单计算需要添加DM-SO原液的量，终浓度为5%，然后交付血库放入-80℃的深低温冰箱内冻存。2004年7月以后，改用20ml注射器经插入血小板袋中心部位的无菌专用导管一次性推入-60℃左右的75%DMSO溶液后摇匀，终浓度为5%，也放入-80℃的深低温冰箱内冻存;2004年9月以后，改进为将加入冷冻保护剂后的血小板直接放入-50℃速冻冰箱内，1h内冻结完成后再迅速冻存在-80℃低温冰箱内。
2 结果
见表1。在DMSO的温度、浓度改变以后纤维蛋白已有减少，说明对冷冻剂添加方式的改变有积极意义，但没有杜绝析出所以不是根本原因。
在调查过程中发现:冰冻血小板出现纤维蛋白析出在2003年是5袋，而2004年上半年却增至20袋，正是由于用血量的加大，血小板数量月月攀升，冻存血小板时还冻入增加的冰冻红细胞，大量热源的加入，使低温冰箱降温速率受到了影响，延长了血小板的冻结完成时间，致冰冻血小板出现纤维蛋白析出。为了解决这一矛盾，我站经探索用-50℃速冻冰箱在1h内冻结完成后再放入-80℃冰箱内保存，能很好地化解在冻入-80℃低温冰箱不能保证2h内冻结完成的问题，从而彻底杜绝了纤维蛋白析出的发生。
表1 2001年10月～2005年3月冰冻血小板纤维蛋白析出情况（略）
3 讨论
3.1 对添加DMSO方式的改进 由于DMSO原液直接添加于血小板悬液中，将产生大量的热，部分血小板和血浆蛋白的灼伤也将不可避免，减慢添加速度，可以挽救部分血小板，但是这项操作既费时又费力，同时还造成了塑料血袋局部明显变白，并且血小板激活率仍然增加5%左右。添加-60℃左右的75%DMSO溶液经导管送入能有效地去除对塑料血小板收集袋的腐蚀，又使保护剂能在瞬间大面积与血小板混匀，使-40℃～-70℃75%DMSO溶液与血小板的溶解扩散界面的产热效应，避免了对血小板的冷损伤，溶解扩散界面的温度保持在20℃～40℃之间又避免了热灼伤。这符合深低温保存血小板的关键技术指导原则 ［1］ 。
3.2 深低温保存血小板的降温速率至关重要 根据血小板降温反应原理，在低温保存过程中，血小板胞膜在降至约15℃～13℃左右即开始由流动的液态转变为凝胶态，在不断运动的液体溶液中显得非常僵硬，受到的损伤常常是不可逆的，造成血小板的多种功能减弱或消失，血小板在15℃～13℃以下的液态条件下受到的损伤随时间的延长而增加，快速度过15℃～13℃以下的液态可显著减少冷休克带来的血小板损伤。DMSO的加入使溶液的凝固点下降，能有效地抑制血小板胞内冰晶的形成，血小板胞内冰晶形成温度范围理论值为（-35±5）℃，由于深低温保存血小板有一定厚度，传热温差造成在实际降温过程中，局部细胞胞内冰晶形成在总体平均温度为-15℃左右就已经开始，血小板冷冻降温需要在-（15～40）℃维持合适的速率，而其中-0.5℃/min～-4℃/min的降温速率对血小板损伤最小。我们改进的将20℃左右的血小板放入-50℃冰箱内速冻，60min冻结完成，其平均速率为-0.8～-1℃/min在要求范围内，也符合深低温保存血小板的关键技术指导原则。
经过这次研究探索得出，对血小板添加的冷冻保护剂及冰冻血小板的降温速率对纤维蛋白析出起决定作用。为了保证血小板的活性及治疗效果，一定要严格遵守血小板深低温保存的关键技术指导原则，并根据深低温保存机采血小板的理论和经验加快开展新鲜富含血小板血浆的新技术，为开发和利用无偿献血者捐献全血中的血小板而打下坚实的基础。
参考文献
1 刘景汉.血小板深低温保存及其临床应用.北京:解放军临床输血中心，2004，11.
（编辑川 夏）
作者单位:264003山东省烟台市中心血站