SF-3000全自动血液分析仪白细胞分类的临床应用

　　【摘要】  目的  探讨Sysmex SF-3000全自动血液细胞分析仪白细胞五分类结果的临床价值。方法  对临床250例全血标本进行SF-3000血细胞分析仪白细胞五分类及对照目测分类。结果  无异常提示150例，中性粒细胞两者相关系数(r)为0.935；淋巴细胞为0.935；单核细胞为0.574；嗜酸粒细胞为0.724；嗜碱粒细胞为0.113。除单核细胞、嗜碱粒细胞外，两种分类方法差异无显著性(P＞0.05)，而嗜碱粒细胞、单核细胞差异有极其显著性(P＜0.001)。有异常提示100例，发现警告真实值为83%，假警告为17%，50例白血病标本仪器检查结果均提示有异常细胞或无法分类。结论  无异常提示，除单核细胞、嗜碱粒细胞外，中性粒细胞、淋巴细胞及嗜酸粒细胞，用仪器分类的结果相当于目测分类。说明该仪器对分类正常者是一种较理想的过筛工具，同时也说明仅靠全自动血液细胞分析仪分类仍不能完全代替人工镜检。

　　【关键词】  全自动血液细胞分析仪；白细胞分类

　　The clinic application of SF-3000 automated hematology analyzer in WBC differentiation

　　ZHUANG Wen-fang,ZUO Xue-mei,CHEN Yan-hong,et al.

　　Changning District Central Hospital of Shanghai,Shanghai 200336，China

　　【Abstract】  Objective  To investigate the clinic significance of sysmex SF-3000 blood analyzer in WBC classification.Methods  Compaing with microscope classification,250 cases blood samples were analysed.Results  The correlation coefficientr values were 0.935 in neutrophil;0.935 in lymphocyto;0.574 in monocyto;0724 in eosinophil,0.113 in basophil,and except for monocyte and basophil there was not significant difference between microscope classification and sysmex SF-3000 blood analyzer (P＞0.05).There was significant difference in monocyte and basophil (P＜0.001).We check 50 blood samples which are shown to be abnormal by microscope,and notice that 8
3% alarms are true,17% alarms are false.The system display abnormal message or unable to determinate WBC differential in 50 samples from leukemia patients.Conclusion  Except for monocyte and basophil,the precision and accuracy of sysmex SF-3000 blood analyzer corresponds to microscope classification.This article shows that the SF-3000 system is a ideal screening instrument to patients with normal WBC differential.Otherwise,it was found that automated hematol
ogy analyzer cannot substitute manual examine by microscope entirely.

　　【Key words】  automated hematology;WBC differentiation
   
　　SF-3000全自动血液细胞分析仪是目前最先进的一种血液分析仪，该仪器采用VCS(细胞体积volume，高频传导conductivity,激光散射scatter)等多种先进技术对细胞进行计数和分类，特别是能准确地将白细胞分为中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞、淋巴细胞和单核细胞，该仪器每次检测结果包括白细胞5种组分在内的23个项目；若测定结果异常，在输出结果时分别以分布图和文字给予提示［1］。当怀疑有异常细胞时，屏幕会自动提示有：Leftshift?(核左移?)，ImmGran?(幼稚粒细胞?)，Blast/A-Ly?(原始/异型淋巴细胞?)，A-Ly/AbnLy?(异型/异常、原始淋巴细胞？)，NRBC/PLTC?(有核红细胞/成簇的血小板?)等5项。为了正确认识该仪器的白细胞分类计数的应用价值，本文将仪器的白细胞分类结果与人工显微镜检查结果进行比较，现报告如下。

　　1  资料与方法

　　1.1  一般资料  所选病例均为我院住院部患者200例，男109例，女91例，其中50例为已确诊白血病患者，年龄17～93岁；健康体检者50例，男27例，女23例，年龄23～61岁。

　　1.2  方法

　　1.2.1  样品采集  EDTA-K2抗凝静脉血1.8ml。

　　1.2.2  仪器  (1)Sysmex SF-3000血液细胞分析仪：日本东亚医用电子仪器有限公司生产。(2)Olympus显微镜：日本奥林巴斯光学工业株式会社生产。

　　1.2.3  试剂  (1)SF-3000所用测定试剂以及EDTA-K2抗凝真空采血管，由日本东亚医用电子仪器有限公司及武汉致远医疗科技有限公司提供。(2)瑞氏染料，由上海仁宝医用试剂研究有限公司研制、上海玉兰生物技术有限公司生产。

　　1.2.4  方法  SF-3000的操作按生产厂商的操作说明要求进行；手工操作方法按照《全国临床检验操作规程》［2］进行。每份标本用SF-3000测定，同时将同一份样推制2张血涂片，经瑞氏染色后由具有丰富经验的临床血液学检验者在显微镜油镜下分类计数200个白细胞，白细胞分类参照NCCLSH20-A文件［3］的要求进行。

　　1.3  结果判断  人工分类的阳性结果判断为出现下列中的1项或1项以上为阳性［4］：（1）幼稚细胞；（2）有核RBC；（3）异淋细胞＞0.01；（4）杆状核细胞＞0.05。仪器结果以出现前述提示为阳性。仪器结果与人工结果比较，两者都有异常为真阳性；两者都无异常为真阴性；仪器结果异常而镜检未见异常为假阳性；镜检异常而仪器未提示为假阴性。然后与SF-3000的测定结果进行统计学比较。

　　2  结果

　　2.1  SF-3000白细胞分类结果与人工分类计数结果的相关比较  见图1~5(n=150)。

　　图1－图5　略

　　2.2  Sysmex SF-3000仪器的可信性分析  见表1。

　　表1  Sysmex SF-3000白细胞分类结果的可信性分析  （略）

　　3  讨论

　　Sysmex SF-3000血液细胞分析仪采用流式细胞仪的工作原理和半导体激光技术通过WBC/BASO和DIFF两个检测通道将白细胞分为中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸粒细胞和嗜碱粒细胞。由图1~5可见中性、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸及嗜碱粒细胞的相关系数依次为0935、0.935、0.574、0.724及0.113，SF-3000血液细胞分析仪白细胞5分类与传统的显微镜方法相比较，除嗜碱粒细胞和单核细胞之外，具有良好的符合性。因此建议当临床检测发现嗜碱或单核细胞有异常时，应用手工显微镜法进行复检。正常人血液中单核细胞3%～8%，嗜碱粒细胞0～1%，而仪测比镜检样本大40倍(8000∶200)及单核细胞不易与大淋巴细胞区别等因素，使嗜碱粒细胞相关系数低，单核细胞相关系数较低，亦可说明SF-3000全自动血液分析仪性能良好。

　　从表1可得出SF-3000对异常细胞的检出率：真阳性83%，假阳性17%；真阴性为98%，假阴性为2%。上述样品中所包括的病种有各种急性白血病50例(包括急性淋巴细胞白血病、急性粒细胞性白血病、急性单核细胞白血病、急性粒单核细胞性白血病、急性红血病)、健康体检者50例、多发性骨髓瘤5例、贫血11例、脾亢3例、骨髓异常增生综合征3例、白细胞减少15例，肺部、妇科及手术等多种感染性疾病63例。SF-3000对异常细胞检出的假阴性为2%(3/150)，3例均为异型淋巴细胞；检出假阳性为17%(17/100)，其中5例显示有幼稚细胞，3例显示有原始/异型淋巴细胞，2例显示有有核红细胞/成簇的血小板，7例显示核左移，凡显示核左移的病例均伴有白细胞总数升高，但人工除样本的抽样镜检未见核左移；假阳性率也不能完全排除镜检分类结果的误差，仪器分类的细胞数量大，人工仅分类200个细胞，难免会漏掉个别幼稚细胞，提高人工分类细胞数可使假阳性率降低，同时也不能完全排除误差。白细胞总数和中性粒细胞绝对值大于正常是仪器做出核左移判断的基本依据。而这仅是核左移时周围血象的常见现象之一，故而仪器出现假阳性和假阴性。异型淋巴细胞假信息多来自幼儿患者和病毒感染患者，显微镜检查多能发现刺激淋巴细胞。幼稚细胞假阳性多见于肿瘤化疗和发热患者，显微镜检查可发现胞体增大、胞浆中出现中毒颗粒和空泡的中性粒细胞。这类细胞易被认为是幼稚细胞的现象曾被文摘报道［5］。很多文献［6，7］都报道过血细胞分析仪白细胞分类与人工分类不符的病例，继而出现假阳性、假阴性的现象。引起这类现象的原因很多、很复杂，有的是与该机设置的提示阈值较低有关，应增高提示的灵敏度，减少漏掉异常细胞的机会；有的是与患者患病的类型有关，其中后一点尤应引起重视。目前的血液细胞分析仪检测血液细胞的方法(无论是采用电阻法或激光技术还是其他技术)与显微镜目测观察细胞形态的方法不同，还不能完全替代显微镜目测观察细胞形态。因此，血液细胞分析仪检测形态异常细胞时的作用仍然是筛选，对提示检测结果异常的标本仍应按照操作规程认真进行显微镜目测复核。这就要求我们不仅要掌握与该仪器有关的各种异常标记，散点图的理解与解释，还要熟练掌握手工显微镜分类白细胞这一项基本技能，做到手工与机器的密切结合，获得准确结果，为临床提供可靠诊断依据。本机具有自动、手动和末梢血三种进样方式，根据临床需要选择合适的进样方式。总之，SF-3000血细胞分析仪计数细胞数量大、速度快，提高了工作效率及准确性，其WBC分类与人工分类相比有较好的相关性，是一种值得推广使用的较理想的血液细胞分析仪。

　　【参考文献】

　　1  潘柏申，王玉亭，林镇海，等.Sysmex SF-3000血液细胞分析仪应用评价.中华医学检验杂志，1998，21(5)：318-319.

　　2  叶应妩，王毓三.全国临床检验操作规程，第2版.南京：东南大学出版社，1997，4-7.

　　3  National Committeefor Clinical Laboratory Standards.Refer-enceleukocytedifferential (proportional) countandevalua-tionofinstrumentmethods,approvedstandard.USA NCC LSDocument H2O-ANccLs,1907，1992.

　　4  戚仁锋.诊断学.北京：人民卫生出版社，1990，237.

　　5  霍梅，梁宝铎，程梅，等.SysmexNE-5000血液细胞分析仪提示有异常细胞的可信性分析.临床检验杂志，1997，15(1)：49.

　　6  张发，徐晓麟.CEL-DYN1600全自动血细胞分析仪应用和评价.上海医学检验杂志，1996，11(1)：13.

　　7  高洁，许宏敏，卢晋英.Sysmex SF-3000血液分析仪对形态异常细胞提示功能的评价.中华医学检验杂志，2001，19(4)：221.

　　作者单位： 200336 上海，上海市长宁区中心医院

　　(编辑：江  枫)