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【关键词】 微柱凝胶法 ABO血型 正反定型
血型鉴定是输血科日常工作,血型的正确鉴定是输血安全的重要保证。现在笔者使用微柱凝胶法来检测血型。它是近年来新发展的一项免疫学检测技术。它和试管法相比具有减少标记,操作简单,易观察,易保存,血型正反定型在一卡上,易对照观察等优点[1]。我们用此法在2007年检测血型17 812例,遇到ABO血型正反定型不相符16例,现对这些影响因素进行探讨。
1 材料与方法
1.1 试剂 血型鉴定卡(DiaMed)由达亚美公司提供。抗A、抗B单克隆试剂由长春博德生物技术公司提供。人ABO血型反定型用红细胞试剂,抗A1、抗H由上海血液医药生物有限责任公司提供。
1.2 方法 标本:抽取患者抗凝血3 ml,置37 ℃水浴15~30 min,离心分离出血浆,红细胞配制成5%红细胞。反定型:50 μl A1细胞、B细胞加入A1、B管中,50 μl血浆加入A1、B管中。正定型:10 μl 5%样本红细胞加入Ctrl、A、B、D管中离心10 min,判断结果。若红细胞沉积凝胶管底部,则表明红细胞未发生凝集(阴性反应), 若红细胞聚集在凝胶的上部,则表明红细胞发生凝集反应(阳性反应)。
2 结果
17 812例血型中正反定型不符合16例。具体原因见表1。表1 MGT法检测ABO血型正反定型不符的原因
3 讨论
笔者鉴定的16例正反定型不符标本,经重新抽取患者血样,留取唾液做进一步的血型物质鉴定。将患者红细胞配成5%浓度,分别与抗A、抗B、抗A1、抗AB、抗H、自身血清反应,患者血清分别与AC、BC、OC反应,并做吸收放散试验,鉴定出正确的血型。
我们观察到MGT法应用过程中,患者血标本纤维蛋白增高、血浆球蛋白异常增高、高效价冷凝集素等均可引起假阳性反应。对于这些标本,红细胞要用37 ℃的温盐水洗涤3遍,反应结果应放37 ℃水浴30 min后再离心观察。对于老年人和肿瘤患者由于血型抗原减弱可适当多加血细胞。对于抗体较弱的标本,可适当增加血清的比例[2]。在试验过程中通过微柱凝胶法和试管法的比对,笔者发现微柱凝胶法比试管法灵敏。
【参考文献】
1 杨世民,张勇萍,王春霞,等.微柱凝胶法对ABO血型中假阳性与假阴性的处理.临床输血与检验杂志,2007,4(9):2.
作者单位:264000 山东烟台,烟台市毓璜顶医院