P53和Ki-67抗原在胆囊癌中的表达

    【摘要】  目的  研究P53和Ki-67抗原在胆囊癌中的表达及与肿瘤的关系。方法  用免疫组化LSAB法对33例胆囊腺癌的存档资料作染色观察。结果  P53阳性表达率为87.7％，Ki-67阳性表达率为91.0％，二者在Ⅲ级肿瘤中的阳性率多于Ⅰ、Ⅱ级肿瘤，差异有显著性（P<0.05）。结论  P53、Ki-67抗原表达异常和胆囊腺癌的发生有密切的关系：P53的改变在胆囊腺癌发生以及发展过程中起着重要的作用；胆囊癌细胞增殖活性的改变直接与肿瘤的恶性程度有关。

　　【关键词】  胆囊肿瘤；腺癌；P53；Ki-67免疫组织化学

    胆囊的恶性肿瘤以腺癌为最多，达95％以上，胆囊腺癌占整个消化系统恶性肿瘤之第五位［1］。目前应用免疫组化方法研究P53和Ki-67在常见恶性肿瘤中的表达的有关文献报道较多，而有关胆囊癌的报道较少见。我们运用免疫组化方法，观察了P53和Ki-67抗原在胆囊癌中的表达，以了解他们和肿瘤的关系。

　　1  资料与方法

　　1.1  资料来源  收集我院1995年1月～2002年12月收治的入院病人33例，复查全部切片，并将存档蜡块重新切片，病理证实为胆囊腺癌，其中包括1例壶腹部腺癌。

　　1.2  方法  33例胆囊腺癌手术及活检标本，经10％福尔马林固定，石蜡包埋后制成4μm厚的连续切片，然后HE及免疫组化染色检测。免疫组化（LSAB法）抗体来源：P53，Dako-Do-7,1：100；Ki-67Phamingen Intemaitional.P53阳性颗粒位于细胞浆，Ki-67阳性颗粒位于细胞核。本文同时采用Ki-67指数作为统计方式，Ki-67指数指阳性细胞数占被数细胞总数的百分比。

　　2  结果

　　2.1  临床资料  性别、年龄：男7例，女26例，男女之比为1：3.75。年龄39～78岁，平均65.1岁。病变部位：胆囊底部10例，胆囊颈部4例，壶腹部1例，9例因浸润范围广泛而不能确定其原发部位。另外9例为活检标本。

　　2.2  形态学检查  巨检：肿瘤均为单发性，除了9例为活检标本，在其余24例中，肿瘤直径自0.4～2.8cm，以浸润性生长为主：包括溃疡型12例，乳头状或结节状隆起型12例。

　　2.3  镜检  多表现为腺体散在分布于增生的纤维组织中，腺体轮廓不整齐。Ⅰ级细胞呈柱状，细胞核略呈异型；Ⅱ级由单个的、复合的或稍不规则的腺体组成；Ⅲ级具有高度不规则的腺体。本组33例中Ⅰ级10例，Ⅱ级9例，Ⅲ级14例。

　　2.4  免疫组化结果  见表1。

　　表1  免疫组化结果  (略)

    P53阳性表达率为87.7%，其中在Ⅲ级肿瘤中的阳性率多于Ⅰ、Ⅱ级肿瘤，差异有显著性（P<0.05）。Ki-67阳性表达率为91.0％，其中在Ⅲ级肿瘤中的阳性率多于Ⅰ、Ⅱ级肿瘤，但差异无显著性（P>0.05）。而用Ki-67指数统计，Ⅰ级0～5.3%，平均为1.8％，Ⅱ级9.1％～30％，平均为19.3％，在Ⅲ级肿瘤中的百分比高于Ⅰ、Ⅱ级肿瘤，差异有显著性（P<0.05）。

　　3  讨论

　　肿瘤抑制基因P53为细胞癌基因中研究最为广泛和深入的基因之一，并为Science杂志评为1993年度的明星基因［2］。查阅以往文献发现，P53基因的异常几乎存在于人类的所有恶性肿瘤中［3］，包括50％以上的上皮性、间叶性、血管源性、淋巴造血系统以及中枢神经系统的肿瘤［4］。但有关P53基因异常和胆囊腺癌的关系的文章少见。本文论证了P53基因异常和胆囊腺癌的发生有密切的关系，同时数据显示分化差的胆囊腺癌（Ⅲ级）阳性表达率明显高于分化好的胆囊腺癌（Ⅰ、Ⅱ级），提示P53的改变在胆囊腺癌发生以及发展过程中起着重的作用。

　　Juan等把影响胆囊腺癌预后的因素归为六点：包括分期、分级、切缘、DNA内容物Ki-67、C-erbB2［1］。其中Ki-67也起着重要的作用。Ki-67抗原可标记除G0和G1早期以外的增殖细胞［5］。它的优点是既可保存肿瘤的组织结构，又可行定量计数［6］。许多人体肿瘤增殖细胞指数和肿瘤的恶性程度有联系。本文Ki-67阳性表达率为91.0％，Ki-67指数统计显示：分化差的胆囊腺癌（Ⅲ级）数值明显高于分化好的胆囊腺癌（Ⅰ、Ⅱ级），提示胆囊癌细胞增殖活性的改变直接与肿瘤的恶性程度有关。

　　同时本文发现P53蛋白与Ki-67的表达之间有着相关性，提示异常增殖的细胞中可能有P53的突变，二者可能对肿瘤的发生、发展起着相互促进作用。

　　本文运用免疫组化方法，研究了P53和Ki-67抗原在胆囊腺癌中的表达意义，其中还存在许多可深入研究的地方，如：他们和预后的关系，他们在胆囊结石病人胆囊黏膜上皮中的表达，以了解胆囊腺癌的关系等。

　　【参考文献】

　　1  Juan Rosai.Acdenman’s Surgical Pathology (eight edition),1996,954-960.

　　2  Koshland DE.Science,1993,262:1953.

　　3  Harris AL. J Pathol,1990,162:50-56.

　　4  Finlay CA,Hinds PW ,Levine AJ.Cell Tissue Kinet,1990,23:505-522.

　　5  Hally PA,woods AL.Cell Tissue Kinet,1990，23:505-522.

　　6  钟传庆，于晓红.临床与实验病理学杂志，1998，14（6）：542-544.
 
　　作者单位： 028000  内蒙古通辽，通辽市医院（原哲盟医院）放疗科

　　(编辑：秋  实)