恩曲他滨原料药中残留溶剂检测方法的研究

　　【摘要】  目的  检查恩曲他滨原料药中的有机溶剂残留量。方法  采用气相色谱法，SE-54石英毛细管柱(30m×053μm×5μm)，汽化室温度200℃；氢火焰离子化检测器(FID)温度：300℃；柱温：程序升温，起始柱温为45℃，保持6min,以30℃/min升温至230℃，保持10min;载气：氮气。结果  被测物质均能得到很好的分离，峰面积与浓度呈良好的线性关系，精密度良好。结论  该法可以作为恩曲他滨原料药中有机溶剂残留量的检测。

    【关键词】  恩曲他滨；气相色谱；残留溶剂

    【Abstract】  Objective  To establish a method for detection of residual solvents in emtricitabine substancesMethods  The residual solvents in emtricitabine substances were determined by GC with SE-54 capillary column(30μm×053μm×5μm)with FID detector and nitrogen as the carries gasThe injector temperature was 200℃，the detector temperature was 300℃，the column temperature raised by program,the initial temperature was 45℃ and maintained for 6 min,then raised to 230℃ with a rate of 30℃/min and maintained for 10minResults  The solvents can be completely separated,and the calibration curves of each solvent had good linear relationship within a certain rangeConclusion  The method is proved to be accurate and reliable,and is suitable for the determination of residual solvents in emtricitabine substances

    【Key words】  emtricitabine;GC;residual solvents

    恩曲他滨为核苷类逆转录酶抑制剂，与其他抗逆转录病毒药物联合，用于HIV成人感染患者的治疗。根据新药申报要求，参照人用药品注册技术要求国际协调会(ICH)颁布的《药品注册的国际技术要求》［1］中对残留溶剂的有关规定，对恩曲他滨原料合成中所使用的有机溶剂进行含量的检测，根据各类毒性和测得样品中含量的高低，确定是否需要订入质量标准进行控制。本文采用气相色谱法测定恩曲他滨合成工艺中用到的有机溶剂残留量。

    1  仪器与试药

    GC1690气相色谱仪。所用对照品及溶剂均为分析纯。恩曲他滨由扬子江药业集团有限公司自制(批号：05019、051102、051109)。

    2  试验方法与结果

    21  气相色谱条件  GC1690气相色谱仪，FID检测器，SE-54(54%苯基-95%聚二甲基硅氧烷)石英毛细柱(30m×053μm×5μm)，检测器温度300℃，汽化室温度200℃，柱温为程序升温：45℃保持6min,以30℃/min升温至230℃，保持10min；氮气为载气，分流比为1：1。以1-甲基-2-吡咯烷酮为溶剂。进样量：1μ1。在色谱条件下，各组分间分离度均大于15，符合药典的一般要求。

    22  线性试验  取甲醇、二氯甲烷、吡啶适量，精密称定，分别置量瓶中，用1-甲基-2吡咯烷酮稀释制成一系列线性溶液，照上述色谱条件分别进行测定，结果表明：甲醇、二氯甲烷、吡啶分别在浓度00603～05425mg/ml、00126～01136mg/ml(00043～00391mg/ml的范围内，峰面积与浓度呈良好的线形关系。

    23  检测限与定量限  分别取甲醇、二氯甲烷、吡啶适量，用1-甲基-2吡咯烷酮溶解并定量稀释。以三倍信噪比计，甲醇、二氯甲烷、吡啶的检测限分别为00274ng、0299ng、0271ng。以十倍信噪比计，甲醇、二氯甲烷、吡啶的定量限分别为274ng、299ng、271ng。

    24  精密度试验  取线性中间浓度溶液，按上述色谱条件连续进样5针，结果显示甲醇、二氯甲烷、吡啶的RSD值分别为109%、133%、185%。

    25  回收率试验  取甲醇、二氯甲烷、吡啶适量，用1-甲基-2-吡咯烷酮溶液稀释制成每1ml中含甲醇024～036mg、二氯甲烷0048～0072mg、吡啶0016～0024mg的3种不同浓度的溶液作为对照溶液。取本品适量，精密称定，分别精密加入上述3种对照溶液溶解并制成每1ml中含本品100mg的溶液作为回收率测定溶液。每种浓度的溶液制备3份。取上述对照液和样品溶液各10μl注入气相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算回收率，甲醇、二氯甲烷、吡啶的回收率分别为991%、986%、984%。

    26  样品测定  分别取甲醇、二氯甲烷、吡啶适量，精密称定，用1-甲基-2-吡咯烷酮制成每1ml分别含甲醇03mg、二氯甲烷006mg、吡啶002mg的溶液作为对照溶液；另取本品适量，精密称定，用1-甲基-2吡咯烷酮制成浓度约为100mg/ml的溶液，作为供试品溶液，照上述色谱条件测定。测定结果见表1。 表1  恩曲他滨残留溶剂检查结果(甲醇、二氯甲烷、吡啶)

    3  讨论

    31  溶剂的选择  恩曲他滨在水中易溶，在乙腈中溶解，在三氯甲烷中微溶。由于乙腈干扰测定，不能作为溶剂使用，1-甲基-2-吡咯烷酮对样品的溶解度较好，对被测物均无干扰，故选用1-甲基-2-吡咯烷酮作为溶剂。

    32  色谱柱的选择  为建立同时测定恩曲他滨的甲醇、二氯甲烷与吡啶，首先选用填充色谱柱进行试验，结果表明该色谱柱无法满足同时测定甲醇、二氯甲烷与吡啶的分离要求。而后采用的是SE-54(5%苯基-95%聚二甲基硅氧烷)石英毛细管柱(30m×053μ×5μm)，各组分间分离度均可达到要求。

    【参考文献】

    1 作者单位： 225321 江苏泰州，泰州扬子江药业集团药物研究院

　　  (编辑：石  岚)