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【摘要】 目的 探讨不同剂量的蕨麻提取物对小鼠肝组织结构的影响。方法 昆明小鼠40只，随机分为5组，正常对照组及实验组（为4组），每组8只。正常组用生理盐水灌胃，实验组小鼠用不同剂量的蕨麻提取物每日灌胃，每只 0.05ml/g， 实验小鼠1周后断颈处死。取肝组织用10%的福尔马林固定，脱水、透明浸蜡、切片、HE染色及特殊染色。肝组织肉眼及OLYMPUA-BX50显微镜下观察。结果 对照组小鼠肝组织无明显改变。实验Ⅰ组小鼠肉眼肝脏表面暗红色加深。显微镜下肝细胞明显变性和坏死，肝血窦明显扩张充血。Ⅱ组小鼠肉眼肝脏暗红色轻度加深，显微镜下肝细胞见变性和坏死，肝血窦扩张充血较明显。Ⅲ组及Ⅳ组的小鼠肝脏肉眼未见异常，显微镜下见肝血窦不同程度的轻度扩张充血，肝细胞再生明显。结论 不同剂量的蕨麻提取物对小鼠肝组织的影响不同，表明可能与蕨麻提取物的不同浓度作用有关。
【关键词】 蕨麻； 肝细胞； 肝血窦
The effect of potentill anserine on liver tissue structure of small rat
WEI Huan-ping,SHAN Na-na,CHEN Hong,et al.
Department of Pathology,Medical College of Chinese People's Armed Police Force,Tianjin 300162,China
【Abstract】 Objective Study different measure of potentill anserine extract to the relation between the effects of potentill anserine on liver tissue structure of small rat. Methods 40 Kunming small rats are divided into 5 groups at random. Control group and experimental group （4 groups）,each eight. The control group infuses stomach with normal saline; the experimental group infuses stomach with different measure of potentill anserine extract everyday,each 0.05ml/g. Test small rat breaking the neck to death after a week. The liver tissue fixes with 10% formalin,dehydrates,and immerses the transparent examples in the wax,cuts into slices,HE stain. Liver tissue is observed with naked eye and OLYMPUA-BX50 microscopically. Results The liver tissue of control group has no obvious change. The dark red liver tissue surface of I group becomes darker. Under the microscope,hepatocyte has obvious degeneration and necrosis,and hepatic sinusoid also has obvious hypertrophy and hyperemia. The liver of II group becomes little dark. Hepatocyte can see degeneration and necrosis,and hepatic sinusoid has relative hypertrophy and hyperemia. III and IV group have no obvious abnormality by naked eye. Hepatic sinusoid has little hypertrophy and hyperemia in different degree under the microscope. Hepatocyte has obvious regeneration. Conclusion Different measure of potentill anserine extract has different effects on liver tissue of small rat. It has relation with the different concentration of petentill anserine extract.
【Key words】 potentill anserine; hepatoeyte; hepatic sinusoid
蕨麻（Potentill anserine，又名人参果）属蔷薇科，是青海等高寒地区一种野生植物为膨大的块根［1］，为药食两用品。近年来对蕨麻的研究，主要是新化合物及其多糖的方面［2］；药用方面着重对其免疫功能、抗氧化方面进行研究，而抗应激方面只是初步观察了其对小鼠在疲劳、寒冷等应激状态下的作用。本实验着重从不同剂量的蕨麻提取物对小鼠肝、肺、脑、肾等脏器组织结构形态改变的影响进行探讨。目前尚未有同类研究的报道［3～12］，以期为中医药的研究开发提供初步参考依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 青海干蕨麻，称重、用水反复冲洗，蒸馏水浸泡，剪碎，水提取。根据不同剂量将提取物配成 100%、50%、20%、10% 液态状物。
1.1.2 昆明小鼠40只，体重18～20g，雌、雄不限，随机分为5组，对照组及实验组（4组，分别为Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组），每组8只。
1.2 方法 对照组用生理盐水灌胃，实验组小鼠用不同剂量的蕨麻提取物每日灌胃（即实验组Ⅰ组用100%蕨麻提取物灌胃、Ⅱ组用50%蕨麻提取物灌胃、Ⅲ组用20%蕨麻提取物灌胃、Ⅳ组用10%蕨麻提取物灌胃）每只 0.05ml/g,实验小鼠1周后断颈处死。取肝脏肉眼观察及常规固定，脱水、浸蜡、透明、制作石蜡切片，用于HE染色。切片OLYMPUA-BX50显微镜下观察、照相。
2 观察结果
2.1 肉眼观察结果 对照组小鼠肝组织无明显改变。不同浓度的蕨麻提取物对实验组小鼠肝脏的影响不同。肉眼见小鼠肝脏暗红色加深程度不同，Ⅰ组小鼠肝脏肉眼见暗红色加深，Ⅱ组小鼠肝脏肉眼暗红色轻度加深，Ⅲ组及Ⅳ组小鼠肝脏肉眼未见异常。
2.2 显微镜下观察结果 对照组小鼠肝组织无明显改变。Ⅰ组小鼠肝小叶结构完整，中央静脉、肝血窦明显扩张充血，枯否细胞散在增生肥大，肝细胞浆明显疏松，呈细颗粒状，细胞核增厚，染色质边集、核固缩，碎裂或增大淡染，偶见肝细胞核大深染及出现双核，门管区小血管明显扩张充血。Ⅱ组小鼠肝小叶结构完整，中央静脉、肝血窦扩张充血较明显，枯否细胞散在增生肥大，可见肝细胞浆疏松，呈细颗粒状，细胞核增厚，染色质边集、核固缩，碎裂或增大淡染，见肝细胞核大深染及出现双核，门管区小血管扩张充血较明显。Ⅲ组及Ⅳ组小鼠肝小叶结构完整，见中央静脉、肝血窦不同轻度扩张充血，枯否细胞增生肥大，肝细胞浆疏松，呈细颗粒状，细胞核增厚，染色质边集、核固缩，碎裂或淡染，可见散在的肝细胞核大深染及双核，门管区小血管轻度扩张充血。
3 讨论
3.1 实验结果表明 不同剂量的蕨麻提取物对小鼠肝脏影响不同，对照组小鼠肝脏在肉眼及显微镜下观察结果无明显改变。实验组Ⅰ组小鼠肝脏肉眼见暗红色加深，显微镜下观察肝小叶结构完整，中央静脉、肝血窦、门管区明显扩张充血，枯否细胞散在增生肥大、肝细胞见变性或坏死，偶见肝细胞增生。Ⅰ组实验表明显扩张充血，肝血窦在1周仍明显扩张充血使肝细胞处于受压状态；肝细胞由于受压可导致功能障碍而致形态变化。Ⅱ组小鼠肝脏肉眼见暗红色轻度加深，显微镜下观察肝小叶结构完整，中央静脉、肝血窦、门管区小血管扩张充血，枯否细胞增生肥大，肝细胞增生。Ⅲ组及Ⅳ组的小鼠肝脏肉眼未见异常。显微镜下观察肝小叶结构完整，中央静脉，肝血窦、门管区小血管轻度扩张充血，枯否细胞散在增生肥大，偶见肝细胞变性或坏死，肝细胞明显增生。Ⅲ组及Ⅳ组实验表明轻度扩张充血可促进肝细胞功能代谢，促使肝细胞的增生。
3.2 实验表明 实验组小鼠肝组织形态学的变化不同，尤其是中央静脉、肝血窦、门管区不同程度的扩张充血可能与不同剂量的蕨麻提取物的作用有着密切关系。可提示在药用及食用时希望要注意量的问题，大剂量的蕨麻提取物对肝组织可能有损伤作用，适当剂量的蕨麻提取物对肝组织可能有保护作用。
【参考文献】
1 蔡武城,袁厚积. 生物物质常用化学分析法. 北京: 科学出版社，1982,1-3.
2 江苏新医学院. 中药大词典（下册）. 上海: 上海人民出版社，1997,2606-2607.
3 黄伟坤. 食品检验与分析. 北京: 轻工业出版社，1989,43-44; 98-99.
4 黄芝蓉. 家常食物药用大全. 北京: 中国中医药出版社，2000,180-193.
5 杨桦,贾旭,易红. 藏药蕨麻中多糖的含量测定研究.中草药,2001,32 （1） : 29-31.
6 马春花. 藏药蕨麻的化学成分及药理作用研究概况唐汉中医药网Copyrightc 2006 chinesemedicines. net Inc. All rights reserved， 2006-9-8， 18: 24: 13 《时珍国医国药》.
7 Stuefr J F H. Differential effects of light quantity and spectral light quality on growth,morphology and development of two Stoloniferous potentilla species. Oecologia,1998,117:1-8.
8 周华坤,周兴民,周立,等. 鹅绒委陵菜（Potentilla anserine）生长特征. 西北植物学报,2002,22（1）: 9-17.
9 王晋,张坚,刘凤云,等. 青海产蕨麻营养成分的研究. 青海医药杂志,1998,28（2）:52-53.
10 Weiner FR, Giambrone MA, Czaja MJ, et al. Ito - cell gene expresion and collagen regulation. Hepatology,1990,11（7）:111.
11 Roe E, Eraer L, Hoffmann R, et al. Gene expression by cytokines and deamethasone in rat heptocyte primary culture.Hepatology,1993,18（5）:1437.
12 Kimuro A,Ando K,Ohnishi H,et al. Immunopathogenesis of hepatic fibrosis in chronic liver injury induced by repeatedly ad2ministered Concanavalin A. Int - Immunol,1999,11（9）:1491-1500.
作者单位： 300162 天津，武警医学院病理教研室
（编辑：齐 永）