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【摘要】 目的 建立一种采用反离子对高效液相色谱测定马来酸曲美布汀缓释片含量的方法。 方法 采用Cromasil C18色谱柱（4.6mm×150mm，5μm），柱温40℃，乙腈-0.15%戊烷磺酸钠的高氯酸缓冲液（pH4.5）-乙腈（45：55）为流动相， 流速1.0ml/min，检测波长254nm，进样量 20μl。结果 在该色谱条件下，马来酸曲美布汀在20.35～286.22μg /ml浓度范围内与其峰面积呈良好的线性关系（r=0.9999，n=5）。3个浓度水平样品的平均回收率为100.5％（n＝9）。结论 本法灵敏、准确、专属性强，可作为马来酸曲美布汀缓释片的检测方法。
【关键词】 马来酸曲美布汀；缓释片；HPLC法
Determination of trimebutine maleate in sustained-release tablets by HPLC
WEI Chun-yan,LU Hong-guo,WU Chen,et al.Yangtze River Pharmaceutical Group, Taizhou 225321,China
【Abstract】 Objective To establish a RP-ion pair HPLC method for determination of the trimebutine maleate in sustained-release tablets. Methods The separation and analysis was performed on a C18 column（4.6mm×150mm,5μm）, column temperature 40℃,the mobile phase consisted of acetonitrile-perchloric acid buffer （45:55） .The flow rate was 1.0ml/min . The detection wavelength was set at 254nm.Loaded volume was 20μl. Results A good linear relationship was obtainted in the trimebutine maleate 20.35～286.22μg/ml（r=0.9999,n=5） .The average recovery was 100.5%（n=9）.Conclusion The proposed method is sensitive,accurate and simple,and can be used for the determination of trimebutine maleate in sustained-release tablets.
【Key words】 trimebutine maleate; sustained-release tablets; high performance liquid chromatography（HPLC）
马来酸曲美布汀（trimebutine maleate,TMB）是一种不同于胆碱能药物和抗多巴胺药物类型的胃肠道节律剂，临床上主要用于治疗慢性胃炎引起的胃肠道症状和肠易激综合征，法国等十几个国家广泛使用。TMB普通片剂（100mg/片），每日3次，每次1片，使用不便。研制TMB缓释片，旨在减少患者服药次数，提高患者的顺应性。本文采用反相高效液相色谱法［1,2］，建立了马来酸曲美布汀缓释片含量测定的方法，简单、准确、专属性强。现报告如下。
1 仪器与试药
Agilent 1200高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）；马来酸曲美布汀对照品（自制，批号：060924），纯度为99.8%，供试品（自制，批号：061105，061110，061116），3，4，5－三甲氧基苯甲酸、3，4，5－三甲氧基苯甲酯（自制），乙腈（色谱纯），其余试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件［3］ 色谱柱： Diamonsil C18柱（4.6mm×150mm，5μm）；流动相：乙腈-0.15%戊烷磺酸钠的高氯酸缓冲液（pH4.5）［取戊烷磺酸钠1.5g，溶于缓冲液（0.01molLl高氯酸溶液，用1.0％醋酸铵溶液调节至pH4.5）1000ml，过滤］（45：55）；流速：1.0ml/min；检测波长：254nm；进样量：20μl；柱温：40℃。理论板数按曲美布汀计不低于3000，马来酸曲美布汀与各杂质间的分离度应符合要求。
2.2 专属性试验 取马来酸曲美布汀缓释片适量，研细，精密称取细粉适量，加0.01mol/L盐酸溶液-乙腈（13：7）混合液溶解并稀释制成1.0mg/ml的溶液，过滤，作为供试品溶液；精密称取3，4，5－三甲氧基苯甲酸（杂质1）、3，4，5－三甲氧基苯甲酯（杂质2）各适量，加上述混合液制成1.0mg/ml的溶液。取供试品溶液加入杂质溶液各适量，摇匀，取20μl注入色谱仪，记录色谱图（见图1～4）。
由色谱图可以看出，主成分曲美布汀与最近杂质峰的分离度为5.8，表明在本色谱条件下，马来酸曲美布汀与各有关物质能达到有效的分离和检测，无其他明显干扰吸收峰。
图1 杂质1色谱图图2 杂质2色谱图 图3 供试品色谱图图4 供试品＋杂质色谱图2.3 线性关系试验 精密称取马来酸曲美布汀对照品适量，加上述混合液制成1.0mg/ml的溶液，精密量取0.5、1.0、3.0、5.0、7.0ml,分别置于25ml量瓶中，加混合液稀释至刻度，摇匀。精密量取各浓度溶液20μl，注入液相色谱仪，记录峰面积（A），以峰面积A对浓度C进行线性回归，得回归方程为A=14.8254C+5.6521（r=0.9999，n=5），线性范围为20.35～286.22μg/ml。
2.4 精密度试验 取马来酸曲美布汀对照品适量，精密称定，加上述混合液溶解并稀释制成0.2mg/ml的溶液，进样20μl，重复进样6次，记录色谱图，结果峰面积的RSD为0.38%，表明该溶液进样精密度良好。
2.5 回收率试验 精密称取马来酸曲美布汀对照品16.0、20.0、24.0mg各3份，置100ml量瓶中，分别加入处方量的空白辅料，加上述混合液适量，超声，定量稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液各20μl注入色谱仪，按上述色谱条件测定，记录色谱峰，计算回收率。结果低、中、高3 种浓度溶液的回收率分别为100.4%，99.8%，101.2%；RSD分别为0.67%，0.58%，0.50%；平均回收率（n=9）为100.5%。表明本检测方法准确。
2.6 马来酸曲美布汀缓释片含量的检测 取本品20片，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于马来酸曲美布汀20mg），置100ml量瓶中，加上述混合液适量，超声溶解，并定量稀释至刻度，滤过，取续滤液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取马来酸曲美布汀对照品适量，精密称定，用上述混合液溶液定量稀释制成0.2mg/ml的溶液，同法测定，按外标法计算。结果，批号为061105、061110、061116的三批样品，含量分别为100.2%、99.4%、100.9%。
3 讨论
3.1 流动相的选择 马来酸曲美布汀为弱酸弱碱盐，不同pH（3.0～5.5）对弱碱性曲美布汀的保留时间影响较大，采用乙腈-0.15%戊烷磺酸钠的高氯酸缓冲液（45：55）为流动相系统，在不同的pH条件下考察曲美布汀与各杂质的保留时间及分离情况。结果表明：pH较小时，主成分曲美布汀的保留时间较短，随着pH的增大，曲美布汀保留时间不断延长。在高氯酸缓冲液pH>4.5时，主成分曲美布汀与杂质1和2能较好分离，因此将流动相中缓冲液用1.0%醋酸铵溶液调节至pH4.5。调节流动相中乙腈的比例（30%～60%）,分析同一供试品溶液，考察其对各化合物保留时间的影响。结果当乙腈比例为45%时，曲美布汀与杂质1和2可达到良好的分离。综上，选定乙腈-0.15%戊烷磺酸钠的高氯酸缓冲液（pH4.5）（45：55）为流动相。
3.2 优点 本文采用反离子对高效液相色谱法，对马来酸曲美布汀缓释片进行含量测定，灵敏度高、专属性强、结果准确，能有效控制马来酸曲美布汀缓释片的质量。
【参考文献】
1 王锐利,张丽锋,张淑秋.高效液相色谱法测定马来酸曲美布汀缓释微丸的含量及有关物质.山西医科大学学报,2006,37（7）:23-726.
2 王卫,左文坚.反相离子对高效液相色谱法测定马来酸曲美布汀片的含量及有关物质.药物分析杂志,2003,23（2）：111-113.
3 国家食品药品监督管理局.马来酸曲美布汀质量标准.［WS1-（X-469）-2003Z-2006］.
作者单位：225321 江苏泰州，扬子江药业集团有限公司