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【摘要】 建立补肾强身胶囊的含量测定方法。方法 采用HPLC法测定补肾强身胶囊中淫羊藿苷的含量。 结果 淫羊藿苷在0.2052～1.0260μg范围内线性关系良好，平均回收率98.39%, RSD为 1.93%（n=9）。结论 该方法专属性强，灵敏度高，重现性好，可用于补肾强身胶囊的含量控制。
【关键词】 补肾强身胶囊 淫羊藿苷 HPLC
【Abstract】 Objective To establish a method for determination for icariin in Bushenqiangshen Capsules. Methods The contents of icariin were determined by HPLC. Results Icariin showed a good linear relationship at the range of 0.2076～1.0380μg. The average recovery was 98.39%, and RSD was 1.93%(n=9）.Conclusion The method is sensitive, with strong specificity and reproducibility, and can be used for quality control of Bushenqiangshen Capsule.
【Key words】 bushenqiangshen capsule; icariin; HPLC
补肾强身胶囊由淫羊藿、金樱子、菟丝子、女贞子、狗脊五味药材组成，收载于《卫生部药品标准中经成方制剂》第四册，具有补肾强身的功效。用于治疗腰酸足软，头晕耳鸣，眼花心悸，阳痿遗精等病症。该制剂的质量标准过于简单，只对其性状进行了描述，没有含量测定的方法，不能有效地控制该制剂的质量。为了提高质量标准，本实验采用HPLC法对淫羊藿中的淫羊藿苷进行含量测定【1】
1 仪器与试药
1.1 仪器 Waters高效液相色谱仪：1525泵、2996紫外检测器、1500柱温箱、717自动进样器；AG-135电子天平［梅特勒-托利多（上海）有限公司］。
1.2 试药 淫羊藿苷对照品（110737-200414,供含测用）购自中国药品生物制品检定所；补肾强身胶囊(陕西海普药业有限公司提供）；硅胶G购自青岛海洋化工厂；试剂：甲醇为色谱纯；水为重蒸馏水；其他试剂均为分析纯。
2 淫羊藿苷的含量测定
2.1 色谱条件【2】 色谱柱：Kromasil C18 (4.6mm×250mm,5μm）；流动相：乙腈-水（28:72）；检测波长：270nm；柱温：35℃；流速：1.0ml/min；进样量：10μl。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取淫羊藿苷对照品5.19mg，置100ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液（0.0519mg/ml）。
2.3 供试品溶液的制备 精密称取本品0.2501g置25ml容量瓶中，加甲醇适量使溶解，并用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精取续滤液5.00ml，在水浴上蒸干，加10ml水，转移至分液漏斗中，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次10ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至25ml容量瓶中，并用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.4 阴性样品溶液的制备 取除淫羊藿外的其他处方量药材，按制备工艺方法制备缺淫羊藿的阴性样品，按上述供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液。
2.5 系统适用性试验 分别取对照品溶液、供试品溶液和阴性样品溶液，按确定的色谱条件进样测定。结果色谱行为良好，淫羊藿苷峰与其他组分色谱可达基线分离，且与相邻色谱峰分离度大于1.5；理论板数按供试品淫羊藿苷峰计，在3000以上；而阴性样品溶液色谱中在对照品相应的位置无色谱峰，说明阴性样品无干扰（见图1～3）。
图1 淫羊藿对照品HPLC图图2 阴性样品HPLC图图3 供试品HPLC图2.6 线性关系考察 分别精密吸取浓度为0.0519mg/ml的淫羊藿苷对照品溶液2、4、6、8、10μl，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积积分值，以对照品进样量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程为：A=100653.43C+41807.14，r=0.9997。结果表明淫羊藿苷在0.1038～0.5190μg范围内具有良好的线性关系。
2.7 精密度试验 取同一浓度的淫羊藿苷对照品溶液，在上述色谱条件下测定，连续进样5次，测定峰面积积分值，平均值为1009563，RSD=1.02%。结果表明本法精密度良好。
2.8 稳定性试验 分别精密吸取同一供试品溶液10μl，于0、1、2、4、8、16h进样，测定其淫羊藿苷峰面积积分值，平均值为805027，RSD=1.12%。结果表明，供试品溶液在16h内稳定。
2.9 重复性试验 取同一样品（批号20070101）5份，分别按上述含量测定方法测定其淫羊藿苷含量，平均含量为0.40%，RSD=0.64%。结果表明，本法重现性良好。
2.10 回收率试验 精密量取已知含量的供试品0.125g各9份置100ml容量瓶中（批号：070606，含量：0.40%），分别精密加入浓度为80.2μg/ml的对照品溶液5.0、5.0、5.0、7.0、7.0、7.0、9.0、9.0、9.0ml，加甲醇适量使溶解，照2.3项下供试品溶液制备方法同法操作，按上述色谱条件测定淫羊藿苷含量，得淫羊藿苷平均回收率为98.39%，RSD为1.93%。结果表明本方法加样回收率好（见表1）。表1 淫羊藿苷回收率试验结果
2.11 样品测定 按上述条件和方法测定三批样品中淫羊藿苷的含量，结果见表2。 表2 淫羊藿苷的测定结果
3 讨论
处方中淫羊藿为君药，故选择淫羊藿作为含量控制对象。经试验采用HPLC法测定淫羊藿中淫羊藿苷的含量，准确性好，灵敏度高。
检测波长的确定：用淫羊藿苷对照品溶液在230～300nm范围内进行紫外光谱扫描测定，结果在268.8nm波长处有最大吸收,故确定其检测波长为270nm。
以上结果表明，本方法专属性强、重现性好，精密度高，回收率满意，因此可作为补肾强身胶囊的质量控制方法。
【参考文献】
1 张贵君. 常用中药鉴定大全. 哈尔滨:黑龙江科学技术出版社,1993,780.
2 苗明三,李振国. 现代实用中药质量控制技术. 北京：人民卫生出版社，2000,966.
作者单位：422001 湖南邵阳，邵阳市药品检验所