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【摘要】 目的 探讨谷胱甘肽转移酶基因（GSTM1基因)缺失多态在胃癌发病中的意义。方法 采用免疫组织化学技术（S-P法）及聚合酶链反应（PCR）方法对48例胃癌组及45例胃炎组患者进行GSTM 1基因检测。结果 胃癌组GSTM1基因缺失率为75.0%，明显高于胃炎组缺失率24.44%（P<0.05）。结论 GSTM 1基因缺失可能参与胃癌的发生机制。
【关键词】 胃癌；GSTM1
在我国，胃癌的发病率或死亡率均居恶性肿瘤之首，每年死于胃癌的患者达十几万人。胃癌的发生是多因素作用，多阶段发展的过程，其确切病因病机仍未完全阐明。近年来有研究认为胃癌的发病可能与hMSH2蛋白表达有关［1，2］，谷胱甘肽转移酶基因（GSTM1基因)与胃癌的发病过程也有一定的关系［3］。为了探讨目前我国人群胃癌发病可能的主要机制，为胃癌的病因预防提供科学依据，笔者对胃癌患者hMSH2蛋白表达与GSTM1基因缺失进行了检测，现将结果报告并分析如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 研究对象均为我院近期收治确诊的胃癌及胃炎患者，共收治93例；胃癌组48例，其中男31例，女17例；胃炎组45例，其中男34例，女11例。
1.2 试剂与方法 常规免疫组织化学染色（S-P法染色）。取已知阳性组织作阳性对照，PBS 取代一抗作阴性对照。PCR 条件采用饱和氯化钠法提取外周血白细胞DNA［4］。PCR 反应总体积为25μl，其中Taq DNA 聚合酶（5u/μl）0.2μl，10×反应缓冲液（MgCl2 15mmol/L）2.5μl，dNTPs（2.5 mmol/L）2μl （北京Taq gene公司），基因组DNA（50～450ng/L）4μl，GSTM1基因（目的基因）引物一对各0.8μl，β球蛋白基因（内对照基因）引物一对各0.5μl［5］，无菌去离子水13.7μl，于94℃变性5min进入循环，94℃48s，57℃48s，72℃90s，经23个循环扩增后72℃延伸5min（PE-480型PCR仪）。
1.3 结果判定 选择人类GSTM1基因的625bp特异片段作为扩增目的基因，同时扩增人类β-球蛋白基因的268bp基因片段作为内对照，检测样本基因组DNA中GSTM1基因是否缺失。
1.4 统计学方法 两组数据采用SPSS11.0统计软件进行χ2 检验，P<0.05为差异有显著性。
2 结果
胃癌组和胃炎组患者GSTM1基因缺失率比较发现，胃癌组患者的缺失率为75.0%，而胃炎组仅为24.44%，两组经统计学分析其间差异有显著性（P<0.05），见表1。 表1 两组GSTM 1 基因缺失率比较
3 讨论
谷胱甘肽转移酶是一组具有多种生理功能的蛋白质的超基因家族。目前将胞浆型GSTs同功酶分为AlHpa、Mu、Pi、Theta 4种类型。群体调查中发现，约有50%的人缺乏一种主要的GSTmu同功酶（GSTM1-1酶），并且已经证实此类酶的个体缺失是由GST-Mu基因簇中的一个基因（GSTM1基因）缺失所引起的。由于GSTM1-1同功酶对多环芳烃类（polycyclic aromat-ichydrocarbon，PAH）致癌物具有较强的解毒代谢功能，那么GSTM1基因缺失即GSTM1-1同功酶的缺失则可能增加宿主对恶性疾病的易感性［6］。
本研究采用PCR技术等对散发性胃癌病例进行GSTM1基因检测，以研究GSTM1 基因缺失多态与胃癌发病的相关性，从分子生物学角度为胃癌防治工作提供理论依据。本研究结果表明胃癌组hMSH2蛋白阳性表达率为79.17%，高于胃炎组的37.14%；胃癌组患者的GSTM1基因缺失率为72.91%，而胃炎组仅为51.42%，两组经统计学分析其间差异有显著性，表明GSTM 1基因与胃癌的发生密切相关。
目前关于GSTM1基因缺失多态与胃癌发病相关性研究的报道不多，Takahiko Katoh［7］与Enders KWNg等［8］认为GSTM1基因缺失能够增加个体发生胃癌的危险性，尤其是有吸烟史或幽门螺杆菌感染的人。本研究结果再次证明GSTM1基因缺失多态与胃癌发病相关，该基因缺失可作为胃癌的宿主易感性标志之一。胃癌是我国最常见的高发恶性肿瘤，其发病率和病死率均居各种恶性肿瘤的首位。研究胃癌的遗传易感性及其生物学行为有助于改善预防措施，了解疾病的发展和预后。在遗传咨询和流行病学调查中，通过对GSTM1基因缺失的检测，可能有助于胃癌，特别是散发性胃癌的早期诊断及预后评价。
【参考文献】
1 吴剑秋,张晓梅,吴晓柳,等.错配修复基因hMSH2多态性IVS1+9CvG与胃癌发病关系的研究.医学研究生学报,2005,18(6):509-515.
2 刘飞飞,李梅,王朝晖,等.hMSH2 蛋白和P53 蛋白表达在胃癌发病中的意义 .大连医科大学学报,2006,28(4):286-288.
3 刘屹,徐荣天,孙贵范,等.GSTM 1 基因缺失多态与胃癌发病相关性研究.中国医科大学学报,2000,29(4):287-289.
4 林长坤,姜莉,张励,等.一种实用的基因组DNA 提取方法及其应用.中国医科大学学报,1998,27(4):440-442.
5 Mclellan RA,Oscarson M, AlexandrleA K, et al. Characterization of a human GST Lcluster containing a dup licated GSTM1 gene that causes ultra rapid enzyme activity. Mole Hparmac,2003, 52: 958- 965.
6 Shigeki Tsuchida, Kiyomi Sato. GST s and cancer. Crit Rev Biochem Mol Bio, 2002,27 (4.5):337-384.
7 Takahiko Katoh, NaokiN agata, Yusuke Kuroda, et al. GSTsM 1 (GST M 1) and T1 (GST T1)genetic polymorHpism and susceptibility to gastric and colorectal adenocarcinoma. Carcinogenesis,2000,17(9):1855-1859.
8 Enders KW Ng, JoseHpb JY Sung, Thomas KW Ling, et al. Helicobacter pylori and the null geno type of gA lutathiones transferase μ in patients with gastric adenocarcinoma. Cancer,1998,82:268-273.
(编辑：余 强)
作者单位：435005 湖北黄石，湖北大冶有色金属公司职工总医院