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【摘要】 目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）在胰腺癌患者血浆中的表达与肿瘤发展之间的规律。方法 采用ELISA检测30例正常人和30例胰腺癌患者血浆中VEGF含量。结果 30例正常人和胰腺癌患者血浆中VEGF平均含量分别是15.7和140.8pg/ml。早期胰腺癌患者和晚期患者存在明显差异，VEGF的表达随着胰腺癌的分期，分级和淋巴转移而显著增高（P<0.01）。但正常人与早期胰腺癌患者之间无明显差异。结论 胰腺癌患者尤其是晚期胰腺癌患者，其VEGF的表达增高。
and its clinical significance
Jia Wen，Wang Wei.
Huang He hospital of Xi′an，Shannxi710043
【Abstract】 Objective To investigate the expression of plasma level of vascular endothelial growth factor（VEGF）in patients with pancreatic cancer，and is relation with pancreatic cancer progression.Methods The plasma VEGF level was measured by ELISA kit in30healthy donors and30patients with pancreatic cancer.Results Compared with healthy donors，the average plasma VEGF of healthy subjects and pancreatic cancer subject was15.7and140.8pg/mL（P<0.001）.Conclusion In the patients with pancreatic cancer，especially in advanced stage，the expression of VEGF is up-regulated.Therefore，VEGF may be used to evaluate lymph nodes metastasis and the prognosis of pancreatic cancer.
Key words pancreatic cancer V ascular endothelial growth factor（VEGF） ELISA
胰腺癌是消化系统恶性度高、预后最差的肿瘤之一，其外科手术切除率低，术后生存率亦很低。血管形成在肿瘤的发生发展过程中起着重要作用，是肿瘤生长、浸润、转移中不可或缺的重要因素，也是癌前期病变转变为癌症的重要演化因素 ［1］ 。血管形成与肿瘤的进展和预后密切相关。VEFG在肿瘤转移中起重要的作用。笔者通过测定胰腺癌患者与正常人的VEGF，探讨胰腺癌患者VEGF表达与肿瘤发展的规律，为临床治疗提供帮助。
1 资料与方法
1.1 临床资料 健康志愿者30例，年龄25～70岁，平均年龄52.1岁。30例胰腺癌患者系1998年3月～2001年9月在本院收治病例，其中男21例，女9例。年龄31～80岁，中位年龄58岁。所有病例均经细胞学或病理组织学检查证实，TNM分期按照1997年UICC标准，临床分期:Ⅰ期2例，Ⅱ期7例，Ⅲ期10例，Ⅳ期11例。将Ⅰ期和Ⅱ期定为早期组，Ⅲ组和Ⅳ期定为晚期组，所有受检者1个月内未服用过任何免疫抑制剂。
1.2 VEGF测定方法 从前臂静脉抽取5ml血液，经10U/ml肝素抗凝。抗凝血经1500r/min离心10min，收集血浆用于VEGF检测。选用R&D公司生产的ELISA检测试剂盒，按生产商提供的检测方法进行。
1.3 统计学分析 数据均经SPSS10.0统计软件进行统计分析，计算各组的ˉx±s，采用t检验或方差分析对计量数据作统计分析，卡方检验对计数资料作统计分析，以P<0.05为差异有显著性的界限。
2 结果
胰腺癌患者的血浆VEGF含量分析:采用ELISA方法对肝素抗凝的正常人血浆进行VEGF检测，正常值为0～56pg/ml。本组30例正常人的VEGF含量分别为15.7±23.7pg/ml，与生产商提供的参考值吻合。而30例胰腺癌患者的VEGF含量达140.8±146.6pg/ml，与正常人之间差异极为显著（P<0.001）见表1，胰腺癌患者中血浆VEGF含量与年龄和性别间无明显相关性（P>0.05），但与病理分期高度相关，尤其是Ⅳ期患者的血浆VEGF含量显著增高（P=0.002）。
表1 血浆VEGF检测结果 （略）
但是，胰腺癌患者的血浆VEGF含量存在明显的个体差异，与文献报道一致 ［2］ 。若以VEGF≤56pg/ml作为正常值，上述病例中20例（67%）VEGF含量增高，10例（33%）属于正常范围。
3 讨论
血管形成在实体肿瘤的生长、浸润、转移中起着重要作用 ［3］ 。检测肿瘤组织内血管形成活跃程度可以反映肿瘤的生物学行为特征并可能有助于判断术后复发转移的风险以及预后。目前已经发现了多种血管形成相关因子 ［4］ 。VEGF被认为是最重要的血管生成的诱导因子，使血管通透性明显增加，血浆蛋白外渗，导致纤维素在肿瘤间质中沉淀:促进内皮细胞分裂增殖，从而诱发新生血管形成和肿瘤的生长 ［5］ 。因此在原发肿瘤中，通过VEGF诱导产生的血管生成了一个适宜于转移的环境。
肿瘤生长和转移是一个复杂的过程，需要细胞间接接触粘附，逃逸机体免疫监视，降解包绕其周围的角蛋白，而浸润或通过淋巴血循环进入靶器官，并形成新生血管从机体获得血供。瘤组织若不能形成新生血管，生长到一定大小就会凋亡，瘤细胞转移入血被血小板粘附包绕形成玫瑰花结而转移。
笔者发现血清VEGF浓度与TNM分期显著相 关（P<0.05），提示VEGF可能与肿瘤增殖活性和侵袭动力学有关。说明术前血清VEGF的检测对于预后的判断可能有一定价值，这需要长期随访后证实。Ikeda等 ［6，7］ 用免疫组化法测定40例胰腺癌IMD及VEGF蛋白表达，并用反转录PCR技术研究VEGF的基因表达。CD34染色测定肿瘤平均IMD为58.6±17.4/mm 2 ，统计显示VEGF基因的表达与IMD的增高有中等相关度（r 2 =0.181，P=0.006），通过Cox多元分析后认为:IMD和VEGF的表达是胰腺癌各项临床病理变量的独立预后因子。推测其机制可能为:①VEGF促进肿瘤血管形成，使肿瘤组织内血管数目增多，同时增加血管通透性，使肿瘤细胞能得到更多的氧气和营养物质，增殖加速。②胰腺癌组织及细胞系中的表达 ［8］ 。在6个细胞系中3个表达了VEGFR-2mRNA和蛋白，4个表达了VEGFR-1mRNA。在Capan-1细胞系中VEGF还有增强MAPK磷酸化及诱导c-fos基因的作用。所以，人类胰腺癌不仅有VEGF及其受体的过度表达，而且在某些情况下VEGF能直接通过MAPK途径刺激胰腺癌的生长。
参考文献
1 Lowenfels AB，Maisonneuve P，Cavallini G，et al.Pancreatitis and the risk of pancreatic cancer.N Eng1J Med，1993，328:1433-1437.
2 Duque JL，Loughhin KR，Adam RM，et al.plasma levels of vascular enˉdothelial growth factor are increased in patients with metastatic prostate cancer.Urology，1999，54:523-524.
3 Senger DR，Van De Water L，Brown LF，et al.Vascular permeability factor（VPP，VEGF）in tumor biology.Cancer Metastasis Rew，1993，12（3-4）:3003-3024.
4 杨晓芳，候桂华.PECAM 1 /CD 31 的研究进展.外国医学·免疫学分册，1998，21（1）:38-39.
5 Bonavera JJ，Sabu A，Kalra PS，et al.Evidence that nitric oxide may mediˉate the ovareansteroid-induced luteinizing hormone suge:involvement of exicitatory aminoacids.Endocrinology，1993，16（3）:167-169.
6 Good DJ，Polverini PJ，Rastinejad F，et al.A tumor suppressor or depent inhibitor of angiogenesis is immunologically and functionally indistinguis hable from a fagment of thrombopondin.Proc Natl Acad Sci USA，1990，87:6624-6628.
7 Shikawa H，Fujii H，Yamamoto K，et al.Tumor angiogenesis pedicts recuˉuence with normal serum carcino-embryonic antigen in advance rectal cancinoma patients.Surg Today，1999，29（10）:983-988.
8 Ikeda N.Prognostic significance of angiogenesis in human pancreatic canˉcer.Br J Cancer，1999，79（9-10）:1553-1563.
作者单位:1 710043陕西省西安黄河医院
2 710004西安交通大学第二附属医院
（收稿日期:2004-08-02） （编辑若 木）