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为探讨急进高原后平原兔睾丸组织的病理变化特点，对直接迁饲到海拔4200m地区及先在较低海拔地区（2260m）短期适应后再迁饲4200m地区，且不同时间的平原兔睾丸标本进行病理观察，报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 平原地区（海拔31.2m）健康同龄雄性大白兔5只，高原地区（海拔2260m）健康同龄大白兔2只，兔龄6个月，体重2.5～3.5kg。迁饲高原前后相同方式和饲料喂养。
1.2 分组 A组5只为平原兔。其中A l 为平原对照组，原饲养地区海拔31.2m，就地宰杀;A 2 、A 3 、A 4各1只，直接迁饲到海拔4200m地区，分别于24h、7d及30d后宰杀;A 5 （1只），先在较低海拔地区（2260m）饲养20d后再迁饲4200m地区7d后宰杀。
B组2只为高原兔，原饲养地区海拔2260m。其中B 1 （1只）为高原对照组，就地宰杀。B 2 （1只）直接迁饲到海拔4200m地区，于24h后宰杀。
1.3 标本处理 各组均钝性致死后立即留取标本，热缺血时间不超过15min。标本以10%甲醛溶液固定，石蜡包埋，常规切片，行HE染色，低倍和高倍光镜观察。
1.4 细胞计数 支持细胞因其数量较少，计数方便，本组采用人工计数，计每视野数及10个视野总数;生殖细胞则采用图文病理观察软件，计算机统计5个视野细胞数总数。
1.5 生殖细胞与支持细胞比率 ［1］ 计算5个视野中2种细胞数目之比。
1.6 胶原纤维及粘液染色 采用苦味酸法及PAS，观察胶原纤维及PAS阳性物密度 ［2］ 。由于染色方法繁杂，本文不予详述。
1.7 生殖细胞成分及精子发生与精子密度评分（Acker-man'S评分） ［1］ 计算5个小管断面精子数，并观察生殖细胞成分，按以下标准计1～10分:10分，精子完好，小管结构完整。9分，有许多精子，但精子发生不规律。8分，仅见少量精子。7分，无精子，但有许多精子细胞。6分，仅见少量精子细胞。5分，无精子及精子细胞，但有许多精母细胞。4分，仅见少量精母细胞。3分，仅见少量精原细胞。2分，无生精细胞。1分，无生精细胞或支持细胞。
2 结果
胶元纤维染色及PAS阳性物各组差异无显著性。
2.1 支持细胞计数见表1。
表1 支持细胞计数（略）
2.2 曲细精管内细胞总数场参数计数，见表2。
表2 曲细精管内细胞计数（略）
2.3 生殖细胞与支持细胞比率，见表3。
表3 生精细胞与支持细胞比率 （略）
A l :睾丸左右各1个，成不规则蝌蚪形，长约4.5cm，最宽处约1.0cm，与附睾、输精管相连续。新鲜标本呈紫红色，鲜艳、光滑，光镜下切面间质组织、曲细精管清晰可辨，结构完整，曲细精管内可见大量不同发育时期的生精细胞及支持细胞。其中，支持细胞呈不规则长锥体形，核椭圆形或不规则形，核仁明显。间质细胞丰富，并有成堆现象。Ackerman'S评分10分。A 2 :曲细精管上皮内可见精原细胞、初级精母细胞及精子细胞但大部分曲细精管内的初级精母细胞减少，精子细胞明显减少，无精子。小睾丸间质内血管充血，间质细胞减少。Ackerman'S评分7分。A 3 :各级生精细胞明显减少，无精子，间质细胞减少，无成堆现象。Ackerman'S评分6分。A 4 :曲细精管内各级生精细胞存在，大部分管腔内有精子生成。Ackerman'S评分8分。A 5 :曲细精管紧密排列，间质成分减少，曲细精管内各级生精细胞存在，多少不一，部分管腔内有少量精子生成。Ackerman'S评分8分。B 1 :与A l 相比，切面间质组织轻度充血、曲细精管结构完整，曲细精管内可见大量生精细胞及支持细胞，精子丰富。富含间质细胞，但无成堆现象。Ackerman'S评分9分。B 2 :部分曲细精管内各级生精细胞明显减少，无精子细胞，睾丸间质内血管充血明显，间质细胞减少（极少）。Ackerman'S评分6分。
3 讨论
评价动物生殖功能的一个重要依据，就是观察睾丸曲细精管内生殖细胞的数目，换句话说，就是只有保持一定数量的生殖细胞才能维持正常的生殖能力 ［3］ 。尤其是要保证一定数量的成熟精子。本组实验结果显示，兔睾结构同人睾基本相似，睾丸实质主要由曲细精管和细胞间质组成，健康平原兔睾丸组织结构完整，内有大量生精细胞及支持细胞，足以维持正常的生殖能力。而平原兔急进高海拔地区后（海拔4200m），曲细精管内生殖细胞数量急剧减少，急进24h及7d的兔睾标本内甚至无精子存在，Ackerman'S评分7分以下。而且由2260m地区急进4200m地区的高原兔睾有同样的表现（Ackerman'S评分6分）。但当平原兔先在较低海拔（2260m）地区20d后再送到4200m地区，并饲养较长时间（30d）后，这种改变似有逆转，表现为曲细精管内已有精子生成，如A 4 和A 5 的Ackerman'S评分达8分以上。虽然本组缺乏人睾实验依据，但理论上两者应是相似的，即任何原因的睾丸生殖细胞数量的减少，都是反映睾丸生殖功能低下的主要原因之一。
支持细胞是睾丸曲细精管内生精上皮主要的组织成分，其主要功能有:（1）支持和保障生精细胞的发育，促进生精细胞的移动和释放精子;（2）其内分泌功能可保障雄性生殖器官的正常分化及发育;（3）通过受体接受促卵泡刺激素（FSH）和睾酮的调节 ［4，5］ 。支持细胞数量或结构的改变，必将影响睾丸生理功能的稳定。本组支持细胞人工记数显示，A 2 、A 3 支持细胞数目均高于A 1 ，而A 4 、A 5 则相反。该现象目前尚无明确的理论依据加以说明，可能与进驻高原时间（高原适应期）有关。为判断支持细胞数量的减少对精子发生的影响程度，本组计算了同视野内生殖细胞数与支持细胞数的比率—人睾生殖细胞数与支持细胞数的比率较为稳定，约为13:1，本实验由于条件所限，仅测得5个视野、每视野约5个小管断面。其中平原组比率为7.8，A 2 为6.9，A 3 为2.1，A 4 为12.1，A 5 为1.5，B 1 为7.6。假定本组实验数据可靠，那么，不稳定的比率说明低氧环境对睾丸精子发生程度的影响是可信的。
动物睾丸是合成雄性激素（睾酮全部来自睾丸）的重要场所，其中最重要的是间质细胞，其内分泌功能及细胞膜上的促黄体生成激素（LH）等可以合成和分泌睾酮、双氢睾酮（DHT）等。间质细胞膜上还存在促性腺激素释放素及其类似物的受体 ［4］ 。本组虽未检测睾酮、DHT含量及外周血浓度，但理论上间质细胞和支持细胞（具有合成与分泌雄性激素结合蛋白（ABP）、转运和浓缩睾酮和DHT）的减少，势必会影响到睾酮、DHT的合成，外周血中浓度降低。而文献资料表明，高原人睾酮、DHT均高于平原人，并与海拔成正比。本组结论与之相反。由于实验条件及时间所限，尚不清楚该现象是否与动物居留高原时间有关，或存在细胞器微观结构改变等因素。
以往文献中已观察到动物对高原低氧环境有一定的适应能力，如表现在免疫力、细胞微观结构等方面 ［6～8］ ，本组结果支持该理论，即动物进入高原后通过一定时间的饲养，其组织急性损伤是可以逆转的。
参考文献
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（编辑毅 文）
作者单位:100039北京武警总医院泌尿外科