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[摘要] 目的 观察慢性化脓性骨髓炎与细菌L型感染的关系,探讨慢性化脓性骨髓炎迁延不愈、反复发作的机制。方法 应用普通细菌培养和细菌L型培养以及免疫组织化学的方法,对37例慢性化脓性骨髓炎病理组织进行检测。结果 37例中培养出细菌型伴细菌L型11例,仅有细菌型而无L型者2例,而单独表现为L型者8例。细菌型阳性率为35.1%,细菌L型阳性率为51.4%(两者相比差异无显著性,P>0.05)。经免疫组织化学染色表现为细菌型及L型者分别为24例及33例。其阳性率分别为70.6%与97.1%,两者相比差异有非常显著性(P≤0.01)。结论 慢性化脓性骨髓炎与细菌L型感染有密切的关系。后者可能是慢性化脓性骨髓炎反复发作,病程迁延的主要原因之一。
[关键词] 骨髓炎;细菌;感染
慢性化脓性骨髓炎的治疗仍然是骨科领域的棘手问题。对其迁延不愈、反复发作的本质亦未完全明了。研究表明细菌L型与慢性、反复发作性感染有关。我们应用病原微生物培养和免疫组织化学的方法,对37例慢性化脓性骨髓炎患者的病理组织进行细菌型及细菌L型的检测,旨在了解慢性化脓性骨髓炎与细菌L型感染的关系,探讨慢性化脓性骨髓炎迁延不愈、反复发作的机制。
1 资料与方法
1.1 一般资料 收集1991~1998年住院手术的37例慢性化脓性骨髓炎患者。男28例,女9例,年龄8~42岁,病程短者为3个月,长者为11年。感染灶分别位于胫骨、股骨、髂骨、尺骨及跟骨等部位。
1.2 方法
1.2.1 病原微生物培养 术中自慢性化脓性骨髓炎感染灶深部获取脓液或感染组织,分别接种于普通血平板和L型平板培养基,置37 ℃培养48~72 h,观察结果。菌落数≥5个为阳性。菌落数<5或未见菌落生长则为阴性。
1.2.2 免疫组织化学染色(ABC法) 第一抗体为金黄色葡萄球菌Cowan I株细菌型及其L型抗体1∶40(蚌埠医学院微生物研究所提供),第二抗体为羊抗兔IgG 1∶200(购自上海医科大学)。ABC试剂盒为美国Vector公司产品,DAB为Dako公司产品。以乳腺纤维瘤组织为阴性对照,省去1抗、2抗和ABC者为省略对照。切片内有棕黄色细颗粒状物质沉积,为细菌型或L型抗体标记阳性,若无则为阴性。
1.3 统计学方法 细菌型与细菌L型检出率的比较采用u检验。
2 结果
2.1 病原微生物培养 在37例中培养出细菌型伴L型11例,仅有细菌型而无L型者2例,而单独有L型8例。其菌种主要表现金黄色葡萄球菌18例,表皮葡萄球菌2例,铜绿假单胞菌1例,后两者均伴有细菌L型。病原微生物培养细菌型阳性率35.1%,细菌L型阳性率为51.4%(两者相比u=1.41,P>0.05,差异无显著性)。
2.2 免疫组织化学染色 金黄色葡萄球菌Cowan I株细菌型及其细菌L型抗体标记阳性率分别为70.6%(24/34)与97.1%(33/34)(两者相比u=2.96,P<0.01,差异有非常显著性)。
3 讨论
大多数致病性细菌在某些不利因素作用下发生细胞壁缺陷的变异,但仍能进行繁殖,这种细胞壁缺陷型细菌称为细菌L型。抗生素、溶酶体、抗体及补体等都可以促使细菌转变成L型。细菌L型由于细胞壁缺陷,其形态、生物学特性和致病性等均与原细菌明显不同,且形态多变,不易识别。L型细菌由于细胞壁的缺陷,导致细菌对渗透压极为敏感,在普通的培养基上可因膨胀而破裂,故普通培养可为阴性。同时由于细菌细胞壁上抗原的部分丢失,导致抗原性减弱,从而逃避机体免疫系统的攻击,而长期存留于体内。在合适的条件下,L型又可以回复转变为细菌型,使疾病复发,病程迁延不愈。
作者单位: 165100 黑龙江呼玛,呼玛县人民医院
(编辑:江 宇)