藜芦碱降压作用的实验研究

　　【摘要】  目的  为开发新型降压药奠定理论基础。方法  从藜芦中提取分离出藜芦碱，采用颈动脉直接测压法和尾动脉间接测压法，测定了其对正常猫血压、高血压大鼠的影响及其快速耐受性。结果  十二指肠或灌胃给药，藜芦碱对正常猫、SHR大鼠和肾性高血压大鼠均有明显的降压和减慢心率作用，且其降压作用与剂量成正相关。结论  藜芦碱在发挥显著降压作用的同时，未见明显的副作用，且反复给药无快速耐受性。

    【关键词】  藜芦碱；  降压作用；  耐受性

    Study on hypotensive effect of cevadine

    LI Wei， YANG Ming， WANG Qing，et al.Pharmacology Laboratary，Academy of Traditional Chinese Medicine and Chinese Medicinal Materials of Jilin Province，Changchun  130021,China

    【Abstract】  Objective  In order to establish the theoretical basis for developing new hypotensive  drugs.  Cevadine was isolated from Eranthis hyemalis and its effects on normal cats blood pressure, hypertension rats  and their tolerance to cevadine were determined by using direct carotis   and indirect arteria caudilis manometric methods.Results  The results show that with duodenum or intragastric administration methods, cevadine has the obvious effects of reducing the blood pressure and slowing down the heart rate on normal cats, SHR rats and renal hypertension rats.Conclusion  The hypotensive effect of cevadine is directly positive correlation with the dosage. The obvious side effects are not found while cevadine reduces significant hypotensive effect  and there is no rapid tolerance  although the animals were administrated repeatly.

    【Key words】  cevadine; hypotensive effect; tolerance

    藜芦是一种少常用中药，药典虽未收载，但在许多中药著作中均有记载［1～3］，在20世纪60年代前后对其研究报道较多，据研究结果表明，藜芦所含生物碱对多种麻醉动物均有明显而持久的降压作用,且无快速耐受现象，对肾性高血压犬和高血压家兔亦有显著的降压作用。其降压机制主要是由于颈动脉窦及心肺感受区经窦神经及迷走传入纤维反射性地抑制血管运动中枢，引起血压下降；离体兔耳及猫后肢灌流实验表明其无直接扩张血管作用［4］。近几年来，有关藜芦的研究较少，我们从百合科（liliaceae）植物黑藜芦（veratrum nigrum L）中提取分离出总生物碱，对其降压作用及其耐受性进行了系统的实验研究，现将结果报告如下。

    1  实验材料

    1.1  动物  自发性高血压大鼠（SHR），体重180～250g，雌雄各半，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号：（京）2002-0003；Wistar大鼠，体重180～200g，雄性，购自长春高新医学动物实验研究中心，合格证号：2003－0004；猫，体重2.5～3.5kg，雌雄各半，市售。

    1.2  药物  藜芦总生物碱（简称藜芦碱），由本院植化室提供，纯度65%，批号：031028，实验前用吐温－80配成混悬液，置4℃冰箱保存备用；阳性对照药司乐平，哈药集团三精制药有限公司，批号：0301183；吐温-80，上海三浦化工有限公司；盐酸氯胺酮注射液，江苏恒瑞医药股分有限公司，批号：KH20011；地西泮注射液（安定），上海旭东海普药业有限公司，批号：031101。

    1.3  仪器  RBP-1 型大鼠血压计，中日友好临床医学研究所；BL-420生物机能实验系统，成都泰盟科技有限公司。

    2  方法与结果

    2.1  对正常猫血压的影响  采用颈动脉直接测压法［5］，取健康猫12只，随机等分两组，每组6只。将动物以20%乌拉坦1g/kg腹腔注射麻醉，仰位固定手术，暴露左颈总动脉，左颈总动脉插管并连接于PT14M2型压力传感器上。借助于JH-2型肌张力换能传感器连于猫胸廓呼吸明显处记录呼吸；四肢连接心电导线，以上信号通过BL-420生物机能实验系统同步记录。术毕稳定60min后，测给药前正常值，然后十二指肠一次给予藜芦碱0.25mg/kg，正常对照组给予溶媒，体积均为5ml/kg。记录给药前及给药后5～120min的收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、平均压（MP）、心率（HR）和呼吸的变化。比较给药前、后自身差异及与对照组变化百分率的差异显著性。结果见表1、表2。

    由表1、表2可见，藜芦碱对正常猫的收缩压（SBP）、平均压(MP)、舒张压(DBP)均有明显的降低作用，于给药后10min起效，并可持续作用120min以上，对心率亦有一定的降低作用，但无明显统计学意义，对呼吸频率和呼吸幅度无明显影响。表1  藜芦碱对正常猫SBP、DBP和MP的影响 注：给药前、后自身实测值比较或与对照组的变化百分率比较，*P＜0.01，**Ｐ＜0.01，***P＜0.001表2  藜芦碱对正常猫HR、RR和呼吸幅度的影响注：给药前、后自身实测值比较或与对照组的变化百分率比较，*P＜0.01，**P＜0.01

    2.2  对自发性高血压大鼠（SHR）血压的影响  采用尾动脉间接测压法［5］，取SHR大鼠50只，于实验前1周每日定时测量尾压（SBP）1次，取其平均值作为药前值。按SBP水平、体重随机分为五组，每组10只，第一组为高血压模型组，给予蒸馏水，第二组为阳性药对照组，给予司乐平0.36mg/kg，第三、四、五组分别给予藜芦碱4、2、1mg/kg，灌胃给药，体积均为20ml/kg，分别于药后0.5h、1h、1.5h、2h、3h、4h、6h、8h以RBP-1 型大鼠血压计各测量血压1次。比较给药前、后自身差异及与对照组变化百分率的差异有显著性。结果见表3、表4。由表3、表4结果可见，藜芦碱对SHR自发性高血压大鼠收缩压有明显的降低作用，于药后0.5h起效，并可持续2h以上，同时于药后0.5h具有明显减慢心率作用，其降压作用随给药剂量的增加而增强。司乐平在明显降压的同时具有加快心率的作用。表3  藜芦碱对自发性高血压大鼠血压（SBP）的影响 注：给药前、后自身实测值比较或与对照组的变化百分率比较，*P＜0.01，P＜0.01；*P＜0.001 表4  藜芦碱对自发性高血压大鼠心率（HR）的影响注：给药前、后自身实测值比较或与对照组的变化百分率比较，*P＜0.01，P＜0.01，P＜0.001

    2.3  对结扎肾动脉所致肾性高血压大鼠血压的影响  采用尾动脉间接测压法［5］，取雄性Wistar大鼠60只，将每只大鼠置于RBP-1型大鼠血压仪中，测其清醒时正常尾动脉压（SBP），连续测3次，取其平均值作为正常值。肾性高血压大鼠制备［5］，以安定5mg/kg和氯胺酮50mg/kg混合剂腹腔注射麻醉，将动物侧卧位固定，剪去腹部手术部位皮毛，经皮肤消毒后，于侧腹部正中切开皮肤及肌层，暴露左肾，于肾门处小心分离肾动脉，用内径0.2mm的银夹夹狭窄肾动脉，右肾不触及。术后4周测SBP 1次，以SBP升高4kPa以上者作为肾血管性高血压大鼠模型。取合格高血压大鼠40只，随机等分五组，每组8只，第一组为模型对照组，给予蒸馏水，第二组为阳性药对照组，给予司乐平0.36mg/kg，第三、四、五组分别给予藜芦碱4、2、1mg/kg，灌胃给药，每日1次，连续8日，给药体积均为20ml/kg。于给药后1d、2d、4d、6d、8d各测一次SBP和心率（HR）。比较给药前、后自身差异及与对照组变化百分率差异显著性。结果见表5、表6。

   由表5、表6结果可见，藜芦碱于给药后1～8天内，对肾性高血压大鼠均有明显降低SBP和减慢HR的作用，其降压作用随给药剂量的增加而增强；而阳性对照药司乐平在降低血压的同时，其尚可明显加快心率，且后者的降压作用强于藜芦碱。表5  藜芦碱对肾性高血压大鼠SBP的影响注：给药前、后自身实测值比较或与对照组的变化百分率比较，P＜0.01，P＜0.01，P＜0.001表6  藜芦碱对肾性高血压大鼠HR的影响 注：给药前、后自身实测值比较或与对照组的变化百分率比较，**Ｐ＜0.01，P＜0.001

    2.4  降压作用耐受性的测定  取麻醉猫6只，十二指肠一次给予藜芦碱0.25mg/kg，于药后45min时SBP明显降低。待血压恢复或接近原水平90％左右时重复给药2次（每次间隔约150min）。3次给药引起的血压下降分别为（-33.3±7.66）%、（-24.0±8.10）%和（-25.6±8.58）%，它们之间并无明显差异。表明藜芦碱降压作用并不产生明显的快速耐受性。

    3  讨论

    高血压是中、老年人多发常见病之一，对人类的健康危害极大，同时也是心、脑血管疾病的主要诱发因素之一。近年来，由高血压引起的死亡率逐年增加，现已位于各种疾病引起死亡的第3位，目前已被医学界称为人类的第一杀手。据2004年我国卫生组织初步调查统计，我国高血压患者已超过1.35亿，且每年呈上升趋势。因此，降压药物的筛选和开发研究具有重要现实意义。

    近年来，广大医药工作者在对常用中药进行广泛研究的同时，也越来越重视有毒中药的研究和探索，特别是对治疗疑难杂症、危象疾病有毒中药的研究备受关注，同时发现某些有毒中药亦有较强的生理活性，在治疗某些重大疾病的应用中，起到了良好的治疗效果。

    实验结果表明，藜芦碱对正常猫、SHR大鼠和肾性高血压大鼠均有明显而持久的降压作用，且无快速耐受现象，与文献报道基本一致［4］。藜芦为有毒中药，其有效成分主要为生物碱，口服可产生恶心、呕吐、心律不齐、血压急剧下降、呼吸抑制或呼吸停止等不良反应。但在此次实验剂量范围内，藜芦碱在显示明显降压的同时，仅见心率减慢，未见恶心、呕吐、心律不齐和呼吸抑制等副作用。可见，在严格控制用药剂量的条件下，有毒中药仍可发挥其有益的作用。目前已上市销售的秋水仙碱片即是从藜芦中分离出的单体化合物，其在临床上用于治疗痛风取得了令人满意的效果。由此可见，通过进一步的深入研究，将藜芦碱开发成新型降压药具有良好的前景，有毒中药的研究值得重视。

    【参考文献】

    1  江苏新医学院编. 中药大辞典. 上海：上海科学技术出版社，1986，2692-2695.

    2  侯士良. 中药八百种详解. 郑州：河南科学技术出版社，1999，1046-1048.

    3  肖培根. 新编中药志.  北京：化学工业出版社，2002，1036-1042.

    4  王本祥. 新编中药学辞典. 天津：天津科学技术出版社，1996，1363-1364.

    5  徐叔云，卞如濂.  药理实验方法学，第2版. 北京：人民卫生出版社，1991，804-817.

     作者单位： 130021 吉林长春，吉林省中医中药研究院药理室(Δ延边大学硕士研究生)

　　(编辑：宋  冰)