骨髓间充质干细胞来源类肝细胞的功能和超微结构评估

2005年05月18日 中华传染病杂志2004 Vol.22 No.6 P.372-376 (重庆)为了对骨髓间充质干细胞(MMSCs)来源的类肝细胞进行功能和超微结构评估，研究者从人胎儿骨髓中分离MMSCs，在1%基质胶(Matrigel)作基质，2.5 μmol/ml氮胞苷(AZA)预处理10～12 h，肝细胞生长因子(HGF)10 ng/ml+成纤维细胞生长因子4(FGF4)10 ng/ml+肝细胞生长培养基(HGM)中培养和诱导。以未诱导的MMSCs作对照，对诱导4 d、7 d、14 d、21 d、28 d MMSCs采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清液中人白蛋白(ALB)水平，脲酶法检测合成尿素的能力，过碘酸希夫试验进行糖原染色，电镜观察细胞超微结构。结果在分化过程的不同时相点检测ALB和尿素生成，未诱导分化的MMSCs没有分泌ALB和产生尿素，而给予FGF4和HGF处理后，MMSCs以时间依赖方式产生ALB和尿素。用过碘酸希夫(PAS)染色法分析发现MMSCs诱导14d时首先见到部分细胞出现红紫色染色的糖原积聚物，28 d后阳性染色细胞数量增多，提示诱导后MMSCs已具备肝细胞的糖原合成能力。电镜显示未诱导MMSCs具有幼稚细胞的结构特点。诱导28 d的MM-SCs已分化，并具有上皮样细胞的极性结构特点。可见诱导后MMSCs已具备肝细胞特有的结构和功能性特征。