WT1基因干扰质粒的构建

2006年09月25日 中国血液流变学杂志 2006 Vol.16 No.1 P.1-3 4 （苏州）为了构建WT1(Wilms'tumor susceptibility gene，WT1)基因siRNA(small interference RNA，siRNA)载体，为进一步探讨WT1的生物学功能奠定基础。研究者根据针对WT1 mRNA的有效的siRNA序列，设计合成两条shRNA(smallhair RNA，shRNA)的DNA模板单链，同时模板链两端分别设计不同的两个限制酶切位点。退火形成siRNA载体插入片断。用限制性内切酶将siRNA空载体线性化，T4连接酶将插入片断插入siRNA空质粒中。结果经酶切、PCR及测序鉴定确定构建成功。可见成功构建了WT1的干扰质粒，可对其生物学行为作进一步研究。