HLA-B27启动子荧光素酶报告基因载体的构建及其在Hela细胞的转录调控研究

《中华风湿病学杂志》2007年第11卷第8期 中国研究者构建了荧光素酶报告基因（luc）与HLA-B27启动子融合蛋白哺乳动物细胞表达载体，观察其在Hela细胞的表达调控。研究者克隆出HLA-B27启动子序列（432bp），构建pGL4．14／B27pro-luc融合蛋白表达载体。转染Hela细胞构建稳定转染细胞系。观察不同的细胞因子对B27转录水平的表达调控。结果发现首先成功构建B27启动子-luc融合蛋白表达载体：然后使用此载体转染Hela细胞构建B27启动子的稳定转染Hela细胞株。应用该细胞株，发现肿瘤坏死因子（TNF）-α、干扰素（IFN）-α、IFN-β和IFN-γ可以通过调节稳定转染的B27启动子活性显著增加B27的转录水平（P〈0．05），其启动子活性比基础表达水平分别增高（1．67±0．20）倍，（1．79±0．71）倍，（2．94±0．68）倍和（1．98±0．45）倍。由此，研究者得出结论，HLA—B27启动子活性在Hela细胞中只有可调节性。细胞因子TNF-α、IFN-α、IFN-β和IFN-γ可通过调控HLA-B27启动子的活性而调节HLA-B27的表达。