点击显示 收起
摘要 目的:用HPLC法测定帕司烟肼片中对氨基水杨酸和异烟肼的含量。方法:以ODS为固定相,流动相为0.05%十二烷基硫酸钠-甲醇(7∶1,含0.2%醋酸钠),检测波长为254
nm,采用外标法。结果:对氨基水杨酸、异烟肼的线性范围分别为0.21~1.2 μg和0.18~1.1
μg,回收率分别为100.1%和100.5%。结论:本法结果准确,重现性好,以此法测定帕司烟肼的含量,更具合理性,能有效地控制质量。 Determination
of Aminosalicylic Acid and Isoniazid Cheng
Huiyue Abstract Objective:Aminosalicylic acid and isoniazid were determined by
HPLC in pasiniazide tablet.Methods:SHIMADZU ODS(10 cm×4.6 mm,5 μm),the
mobile phase constisted of 0.05% sodium dodecyl sulphate-methanol(7∶1,with
0.2% sodium acetate).Detection was done at 254 nm,external standard
method.Results:The calibration curves were linear in the range of 0.21~1.2
μg for aminosalicylic acid and 0.18~1.1 μg for isoniazid.The average
recoveries(n=5)of aminosalicylic acid and isoniazid were
100.1%(RSD=1.1%)and 100.5%(RSD=0.9%),respectively.Conclusion:This method
is accurate,good repeatability and is very suitable for the quality
control pasiniazide tablet. 帕司烟肼(原名百生肼)为治疗肺结核的药物,其制法为等摩尔的对氨基水杨酸和异烟肼在热稀乙醇中冷却结晶而得,为异烟肼的衍生物[1],其抗结核效果是基于其中所含的异烟肼,口服后在胃肠道迅速分解为对氨基水杨酸和异烟肼,分子中的对氨基水杨酸可阻止异烟肼在体内的乙酰化,从而加强异烟肼的抗结核作用。比单纯的异烟肼或异烟肼加高剂量的对氨基水杨酸混合治疗效果优越。原片剂质量标准[2,3]含量测定为高氯酸滴定,不能有效地控制本品的质量。本文采用HPLC法,分别测定了其中的对氨基水杨酸和异烟肼的含量。 1 试药与仪器 帕司烟肼片、对氨基水杨酸和异烟肼对照品均由重庆华邦制药有限公司提供(对氨基水杨酸、异烟肼经高效液相色谱面积归一化法测定,含量分别为99.2%和99.3%),水为二次蒸馏水,其余试剂均为国产分析纯。 2 色谱条件 色谱柱:Shimadzu CLC-ODS(10 cm×4.6 mm,5 μm);流动相:0.05%十二烷基硫酸钠-甲醇(7∶1,含0.2%醋酸钠),流速:1 mL.min-1。检测波长:254 nm。 3 测定条件 3.1 系统适用性试验 分别取对氨基水杨酸和异烟肼对照品适量,用流动相配制成均为4
μg.mL-1的溶液,按照上述色谱条件进样20 μL,理论板数以对氨基水杨酸计为1
670,与异烟肼的分离度为5.5。 |
图1 样品(A)、对照品(B)、空白辅料(C)色谱图 3.2 检测波长的选择 对氨基水杨酸和异烟肼的UV图中(以流动相为溶剂),最大吸收波长分别为269
nm和263
nm,参照美国药典Ⅹ [4]版异烟肼制剂的HPLC测定及有关资料[5,6],并根据试验结果,选择254
nm为检测波长,使2成分的色谱峰相匹配。 4 样品测定 取本品20片精密称定,研细,称取细粉适量(约相当于帕司烟肼0.1
g),加入甲醇适量,振摇使溶解,并稀释至50 mL。滤过,精密量取续滤液2.0 mL,于50 mL量瓶中,加流动相至刻度。取20
μL进行色谱分析。 表1 样品测定结果(标示量%,n=4) |
批号 | 本法 | 高氯酸滴定法 | ||
对氨基水杨酸 | 异烟肼 | 合计 | ||
981206P | 51.3(0.6) | 44.3(0.7) | 94.8 | 103.5 |
981205d | 51.2(0.9) | 44.7(0.6) | 95.2 | 105.9 |
981201 | 52.8(1.0) | 46.0(0.8) | 98.8 | 100.0 |
注:括号内为RSD(%)值。
5 讨论 5.1 在十二烷基硫酸钠和醋酸钠的浓度恒定的情况下,随甲醇比例的增加,对氨基水杨酸和异烟肼的保留时间及分离度均减小(见图2,流动相其余部分为0.05%的十二烷基硫酸钠和0.2%的醋酸钠水溶液)。流动相中加入一定量的醋酸钠,可以延长对氨基水杨酸的保留时间,以及减小与异烟肼的分离度,本试验中醋酸钠的浓度为0.2%,对氨基水杨酸和异烟肼的分离度为5.5,并能将杂质完全分离,符合高效液相色谱的要求。 |
图2 不同浓度的甲醇对异烟肼(1)和 5.2 帕司烟肼是由等摩尔的对氨基水杨酸和异烟肼在热稀乙醇中结晶而得,理论上对氨基水杨酸、异烟肼各占帕司烟肼的52.75%和47.25%,根据测定样品对氨基水杨酸和异烟肼的含量,均表明对氨基水杨酸过量,并且均较原标准高氯酸滴定测定的含量结果低。故采用HPLC法分别测定对氨基水杨酸和异烟肼的含量,以确定帕司烟肼的含量,更具合理性。 程辉跃(重庆市药品检验所 400015) 参考文献 1,王泽民主编.当代结构药物全集.上册.北京科学出版社,1993.665 (本文于1999年4月27日收到) |