三七、白芍及西洋参中氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的残留量测定

摘要目的：测定西洋参、三七和白芍中氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯3种农药的残留量。
方法：运用石油醚-丙酮混合溶剂提取及毛细管气相色谱法测定。
结果：氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的添加回收率(%)分别为92.13～100.5,97.54～106.4，94.89～108.5;RSD(%)分别为1.29～5.64,0.70～4.87，1.71～5.34。被测样品中，三七中含有氰戊菊酯，个别样品中含溴氰菊酯；西洋参中含少量溴氰菊酯；白芍中未发现上述3种农药。
结论：本方法具有选择性强，操作简便，分离效果好，灵敏度高等特点。

Determination of Residual Amount of Cypermethrin,
Fenvalerate and Deltamethrin in Chinese Herbal Medicines
by Capillary Gas Chromatography(CGC-ECD)

Gao Tianbing,and Tian Jingai
(National Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products,Beijing　100050)
Zhang Shuming
(Institute of Medicinal Plant Development,Chinese Academy
of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Beijing　100094)

AbstractObjective：Determination of the residues of cypermethrin,fenvalerate and deltamethrin in Paeonia lactiflora Pall.,Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen and Panax quinquefolium L.
Method:The samples were extracted by petroleum ether-aceton(4∶1) and determined by CGC-ECD with a PE—5 capillary column(30 m×0.32 mm×0.25μm).
Results:The recoveries of cypermethrin,fenvalerate and deltamethrin were 92.13%～100.5%,97.54%～106.4% and 94.89%～108.5%,respectively;RSD(%) were 1.29～5.64,0.70～4.87 and 1.71～5.34,respectively.It showed that fenvalerate was in all three samples and deltamethrin in one sample of Panax notoginseng,deltamethrin was in two samples of Panax quinquefolium, other samples had no these three pesticides.
Conclusion:This method has easy operation,high sensitivity,reproduction and selectivity.
Key words　Paeonia lactiflora, Panax notoginseng,Panax quinquefolium, pyrethroid pesticides, CGC-ECD

　　拟除虫菊酯类农药是一类具有良好杀虫效果的广谱性农药，在药材种植中被广泛应用，然而它存有一定的异构体，这就导致了建立其多残留测定方法的困难性。尽管在农产品中其残留测定方法已有报道^［1～7］，其溶剂系统有：丙酮-己烷、丙酮-二氯甲烷、丙酮-石油醚、乙腈-己烷、乙腈-石油醚等；净化手段有：硅胶、氧化铝、氧化铝-弗罗里硅土(Florisil)、Florisil、Florisil-活性炭、Bio-Beads SX-3等。但因中药成分复杂，其中农药残留量属超痕量范畴，这样使得农药的提取、分离、净化与富集的难度加大，现有文献中有关中药中拟除虫菊酯类农药残留量检测的报道很少^［8］。本文成功地运用直接提取分离法和毛细管气相色谱法测定了部分中药材样品中氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的残留量，为其质量控制提供了一种快速检测方法，它有助于评价与监测中药材中拟除虫菊酯类农药残留状况，为指导药材种植者合理而有效地使用农药提供依据。

1　仪器与试药
PE—autosystem气相色谱仪(包括⁶³Ni电子捕获检测器)、PE—5弹性石英毛细管柱(30 m×0.32 mm×0.25 μm)(美国)。
丙酮、石油醚(60～90 ℃)［全部经过全玻璃蒸馏装置重蒸馏(其中石油醚收集62～64 ℃馏分)，经气相色谱法确认为符合残留检测的要求］，无水硫酸钠。
农药标准品：氯氰菊酯(cypermethrin)、氰戊菊酯(fenvalerate)和溴氰菊酯(deltamethrin)均购于农业部药检所，纯度大于95%。
样品：被测样品购于药材市场，均经中国药品生物制品检定所张继主管药师鉴定。

2　气相色谱条件
进样口温度270 ℃；检测器温度320 ℃；柱升温程序：初始温度160 ℃，保持1 min，以10 ℃^.min^-1升至240 ℃保持0.5 min，以5 ℃^.min^-1升至270 ℃保持15 min；载气：高纯氮；柱前压：140 kPa；采用不分流进样：不分流时间为3 min，3 min后开始分流(分流比为1∶20)；衰减：1；进样量1 μL；外标法定量。应用上述条件，取溴氰菊酯300 ng^.mL^-1、氯氰菊酯200 ng^.mL^-1和氰戊菊酯200 ng^.mL^-1的混合标准品溶液进样，有较好的分离度(图1-A)。

图1　色谱图
A.农药对照品　B.三七样品添加对对照品　C.三七样品
1.氯氰菊酯　2.氰戊菊酯　3.溴氰菊酯

3　标准曲线的绘制
分别精密称取氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯5，5，7.5 mg，置50 mL量瓶中，加石油醚溶解并稀释至刻度；再各精密吸取1 mL置50 mL量瓶中，加石油醚稀释至刻度，制成储备液。分别精密吸取5 mL储备液于50 mL量瓶中，用石油醚稀释成混合标准品溶液(溴氰菊酯300 ng^.mL^-1、氯氰菊酯200 ng^.mL^-1和氰戊菊酯200 ng^.mL^-1)。依次精密吸取混合标准品溶液制成1，5，25，125倍的稀释液，依“2”项条件测定。其化合物的出峰顺序由单一农药标准液在同样条件下予以确证。以峰面积计算，得到相应农药的回归方程(表1)。其中Y为含量(pg)，X为峰面积。线性范围见表1。

表1　氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的回归方程、线性范围和相关系数

农药

t_R/min

回归方程

r

线性范围/pg

氯氰菊酯

18.35

Y=-22755.45+19116.98X

0.9998

1.60～200

氰戊菊酯

20.27

Y=-23579.78+16680.02X

0.9998

1.60～200

溴氰菊酯

22.77

Y=-57768.66+18900.95X

0.9993

2.40～300

4　供试品溶液的制备
精密称取通过40目筛的样品粉末适量(约1.0 g)于100 mL磨口具塞三角瓶中，精密加入石油醚-丙酮(4∶1)混合液50 mL，称定重量，浸泡过夜，超声处理15 min，补足重量，取上清液于100 mL磨口具塞三角瓶中，加入适量无水硫酸钠脱水，从中精确移取25 mL于100 mL旋转蒸发瓶中，在40～45 ℃水浴下浓缩近干，再用石油醚3～4 mL替换并浓缩近干，重复2～3次，使样品中的丙酮完全除去， 用石油醚溶解并转移至5 mL量瓶中，作为供试品溶液。

5　重现性考察
取混合标准品溶液1 μL注入气相色谱仪，测定峰面积，计算，即得：氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯RSD分别为1.15%，2.60%，1.50%(n=5)。

6　加样回收试验
精密称取西洋参样品10份(各1 g)，分别精密加入混合标准品溶液(溴氰菊酯300 ng^.mL^-1、氯氰菊酯200 ng^.mL^-1和氰戊菊酯200 ng^.mL^-1)1和0.1 mL，混匀，自然晾干后，依次按“2”项及“4”项下操作并计算回收率(见表2)。从白芍的回收率中可以看出，样品提取基本完全。

7　样品中氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的含量测定及讨论
　　按上述条件操作，对3种药材共9个样品中氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的含量进行了测定，结果见表3。测定结果表明：白芍中未发现有这3种农药；西洋参中含有少量溴氰菊酯；三七中含有氰戊菊酯，个别样品中含有溴氰菊酯。说明了药材种植过程中不同产地的使用农药状况存在一定差异。为了降低中药中残留农药的含量，以提高其质量及延缓害虫抗药性的产生，在防治药材病虫害时，必须注意安全、有效和合理地使用农药，采用交替或混合使用农药。

表2　氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的回收率(%，n=5）

农药

添加量

三七

白芍

西洋参

回收率

PSD

回收率

PSD

回收率

PSD

氯氰菊酯

200
20

94.83
100.5

5.64
2.26

99.34
93.73

4.02
3.04

94.42
92.13

3.57
1.29

氰戊菊酯

200
20

101.3
102.7

4.24
0.89

97.54
99.32

2.36
0.70

106.4
106.1

3.91
4.87

溴氰菊酯

300
30

101.0
94.89

4.15
2.35

97.59
108.5

2.26
2.44

100.7
101.6

5.34
1.71

表3　样品中氯氰菊酯、氰戊菊酯
和溴氰菊酯的残留量(ng^.g^-1，n=3)

样品

产地

氯氰菊酯

氰戊菊酯

溴氰菊酯

西洋参

1

-

-

-

2

-

-

5.42

3

-

-

1.59

三七

昆明砚山

-

64.41

9.41

昆明文县

-

53.70

-

云南(统)

-

65.79

-

白芍

浙江盘安

-

-

-

山西繁峙

-

-

-

陕西阜平

-

-

-

8　方法的实用性
中药中拟除虫菊酯类农药的测定仅见王敏娟等^［8］对氰戊菊酯的报道。本文经过上述药材各样品的分析测定表明：本方法具有快速、简便、回收率高和重现性好等特点，具有良好的应用前景。

*本课题为国家中医药管理局科学基金课题(95B142)

作者单位：高天兵 田金改 中国药品生物制品检定所 北京100050
张曙明 中国医学科学院 中国协和医科大学药用植物研究所 北京100094

参考文献
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4　Bottomley P，Bakar P G.Multi-residue determination of organochlorine, organophorus and synthetic pyrethroid pesticides in grain by gas-liquid and high-performance liquid chromatography.Analyst,1984,109:85
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8　王敏娟，袁蔼芝，余洪等.庆余肾气片、复方丹参片中氰戊菊酯分析方法的研究.中成药，1995，17(5)：34

收稿日期:1998-07-06