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飞扬草薄层色谱鉴别方法的研究

来源:唐汉中医药网
摘要:飞扬草(EuphorbiahirtaL.)又名大飞扬草、大飞羊、大乳草、金花草等,为大戟科(Euphorbiaceae)植物飞扬草的全草或带根全草,一年生草本,广泛分布于广西、广东、福建等地区,具有清热,解毒,通乳,渗湿,杀虫止痒功效,可用于治疗肠炎、菌痢、上呼吸道感染、尿路感染,还可通乳,消肿,治疗各种出血,外治皮炎、湿疹、......

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  飞扬草(Euphorbia hirta L.)又名大飞扬草、大飞羊、大乳草、金花草等,为大戟科(Euphorbiaceae)植物飞扬草的全草或带根全草,一年生草本,广泛分布于广西、广东、福建等地区,具有清热,解毒,通乳,渗湿,杀虫止痒功效,可用于治疗肠炎、菌痢、上呼吸道感染、尿路感染,还可通乳,消肿,治疗各种出血,外治皮炎、湿疹、顽癣等。飞扬草中主要含黄酮苷、酚类、三萜等成分,主要活性成分为槲皮苷、没食子酸等。笔者通过大量实验,以槲皮苷、没食子酸为对照品,建立了飞扬草的薄层色谱鉴别方法,为药材的质量控制提供参考。

  1仪器与材料

  超声波清洗器(AS7240BT,天津奥特赛恩斯仪器有限公司);高速中药粉碎机(DP—o4,浙江省温岭市大鹏机械有限公司);显色加热器(BXR—I,湖北医药科技开发中心);层析缸;自制0.5%羧甲基纤维素硅胶G薄层板(规格:100 mmxl00 mm,厚度0.5 mm);槲皮苷对照品(批号:lll538—200403,供含量测定用)、没食子酸对照品(批号:0831—9501,供鉴别用)由中国药品生物制品检定所提供;试剂均为分析纯,水为纯化水;飞扬草药材采自广西柳江、武宣、象州、融水等地,原植物经本所中药室鉴定为大戟科(Euphorbiacea植物飞扬草的全草。实验温度:20℃一25℃;相对湿度:50%260%2。

  2方法与结果

  2.1  对照品溶液的配制  分别称取槲皮苷及没食子酸对照品,加无水乙醇制成每mL含0.5 m9的溶液,作为对照品溶液。

  2.2供试品溶液的制备取本品粉末1g,置于具塞三角瓶中,加入甲醇20mL,连续超声20min,过滤,滤液蒸干,残渣用2mL甲醇溶解作为供试品溶液。

  2.3薄层层析照薄层色谱法(2005版一部《药典》附录VIB)试验佣,吸取对照品溶液及供试品溶液各5ul,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿一乙酸乙酯一甲醇一甲酸(6:2.5:1.5:0.2)为展开剂,上行展开约8 cm,取出,晾干,用氨熏至斑点显色清晰。结果,供试品色谱中,在与槲皮苷对照品色谱相应位置上,显相同颜色的亮黄色斑点。

  2.4重复性实验取不同产地的4批飞扬草药材,按“2.2”项下操作,制成供试品溶液,按“2.3”项进行薄层色谱试验,结果,各产地药材的色谱均清晰,重现性好。

  3讨  论

  由于槲皮苷及没食子酸在弱碱水、不同浓度的甲醇、乙醇中均有一定的溶解度,笔者曾使用上述溶剂进行提取,并比较了超声提取、水浴回流提取等不同方法进行药材前处理,薄层实验结果均可检出两种成分,说明不同方法均可确保这两种活性成分得到有效提取。超声波提取具有操作简单、不需要加热、有效成分提取率高等特点,因此,选择超声波用于前处理。经试验,加20倍量甲醇,连续超声20 min,可满足实验要求。

  经查阅文献资料,并用氯仿一甲醇一水、氯仿一甲醇一甲酸、醋酸乙酯一丁酮一甲酸一水、甲苯一氯仿一丙酮、甲苯一醋酸乙酯一甲酸等系统作为展开剂,结果存在样品成分无法分离或没食子酸与槲皮苷斑点嗍近等问题,而笔者经过研究确定的氯仿一乙酸乙酯一甲醇一甲酸(6:2.5:1.5:0.2)展开系统,较好地解决了上述问题。

  在显色剂的选用方面,实验证明用氨气熏的显色效果好于用三氯化铝试液等显色剂显色,不需要在紫外灯下观察荧光,显色快速,直观,斑点清晰易辨。实验发现,空气湿度对薄层色谱结果影响较大。当空气湿度达到65%以上时,槲皮苷及没食子酸的斑点Rf值明显较小,湿度达80%左右,对照品斑点的Rf值几乎一致,样品斑点也无法分开。因此,必须严格控制实验环境的湿度。试验了4个产地的飞扬草薄层色谱鉴别,结果认为,该方法简便,快捷,专属性强,可为制定飞扬草的质量标准提供参考依据。

 

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