点击显示 收起
摘 要:目的:用高效液相色谱法测定兔血清中琥乙红霉素的浓度。 HPLC
Determination of Erythromycin Ethylsuccinate Wang Jiarui Chen Liqing Abstract:Objective:A HPLC method is described for
the analysis of erythromycin ethylsuccinate in rabbit serum.Methods:The YWG-C18
column(4.6 mm×150 mm,10 μm)was used.The mobile phase consisted of methanol -0.02
mol.L-1
ammonium acetate (70∶30,pH 7.3).Detection was at 210 nm.Results:Erythr omycin was used as achieved by internal standard.The
ranges of calibration curves were 0.25~12 mg.L-1(r=0.998 9).Detection limits were
0.02 μg and the lowest detectable concentration of roxithromycin
was 0.05 mg.L-1,while
the average recovery of the method was 96.26%.The RSD of intra-day
and inter-day assays all less than 6%.Conclusion:The method is quick,precise and good repeat. 琥乙红霉素(Erythromycin Ethylsuccinate)商品名利君沙是大环内酯类抗生素。其化学结构与红霉素相似,是红霉素的衍生物。本文结合临床用药情况,参考有关文献[1,2],建立了高效液相色谱法测定血液中琥乙红霉素浓度的方法,并对琥乙红霉素在家兔体内的生物利用度进行了分析研究。 1 仪器与试剂 日本岛津LC-6A高效液相色谱仪(包括:SPD-6AV可调波长紫外检测器、C-R4A色谱数据处理机、LC-6A输液泵、SCL-6B色谱系统控制器)。 2 实验方法 2.1 色谱条件 紫外检测波长:210 nm;色谱柱:YWG-C18 10 μm 4.6 mm×150
mm;流动相:甲醇-0.02 mol.L-1醋酸铵水溶液(70∶30,用氨水调pH
7.3);流速:1.0 mL.min-1;灵敏度:0.01(AUFS);纸速:5
mm.min-1;柱温:45 ℃;进样量:20
μL。 Y=0.218 8X-0.001 486 r=0.998 9 n=3 2.4 药代动力学研究 血液样品的制备:家兔5只,体重(2.5±0.5) kg,隔日禁食,次日按成人剂量10倍灌胃给药后于0.5,1.0,2.0,4.0,8.0,12.0,24.0,48.0 h取血3~4 mL离心,取血清1 mL按标准曲线项下操作,测得样品与内标峰面积之比,由标准曲线方程计算血液中琥乙红霉素的浓度。 3 实验结果 3.1 色谱行为 选用波长UV-210 nm,用二氯甲烷在碱性条件下提取,按标准曲线项下所述方法再次纯化后进样,提取回收率较高,在210 nm波长处检测无杂质干扰,血液中内标和琥乙红霉素的保留时间分别为6.93 min和8.47 min(见图1)。 |
图1 色谱图 3.2 线性范围和灵敏度 血液中琥乙红霉素的浓度在0.25~12
mg.L-1范围内,具有良好的线性关系,在本文条件下血液中琥乙红霉素最低检测浓度0.05
mg.L-1。 |
图2 兔血液中琥乙红霉素的药-时曲线(n=5) 3.5 药动学参数及相对生物利用度 每只受试家兔的血药浓度-时间数据,用3P87药代动力学程序经自动拟合,均符合二室开放模型,得出的有关药动学参数见表1。 表1 给药家兔药动学参数 |
参数 | 琥乙红霉素 |
T1/2α/h | 1.2±0.3 |
T1/2β/h | 6.5±1.4 |
AUC/μg.L-1.h | 25.8±4.8 |
Cl/mL.kg-1.h-1 | 1.8±0.4 |
Tmax/h | 2.0±0.7 |
Cmax/μg.L-1 | 10.4±1.5 |
4.1 柱温对色谱峰的影响 根据文献[3],红霉素在柱温升高时柱效提高,考虑到琥乙红霉素与红霉素属同类药物,因此考察了不同柱温对琥乙红霉素和红霉素的保留时间和峰高的影响。本文选用柱温45
℃时,检测峰及保留时间较好,同时这个温度对色谱柱的稳定性无影响。 作者单位:王家蕊(天津医科大学第三医院 300203) 参考文献: 收稿日期:1999-01-25 |