HPLC法测定倍他米松片的含量及含量均匀度

上海华联制药有限公司　200072

上海医科大学药学院　200032

倍他米松系甾体激素药物，对倍他米松片的含量及含量均匀度的测定，目前中国药典所载的方法为紫外分光光度法^［1］。由于赋形剂在所测波长处也有一定的紫外吸收，对测定有干扰，加上样品的前处理时间长，尤其是在含量均匀度的测定中会产生较大误差。USP采用HPLC法^［2］，但前处理过程较复杂。为此我们采用HPLC法测定倍他米松片的含量及含量均匀度。样品用60 %甲醇溶液进行超声波抽提，以流动相为溶剂，样品前处理省时，测定结果较为满意。
1　仪器与材料
Hewlett Packard 1100高效液相色谱仪，四元梯度泵，DAD检测器，ChemStations化学工作站。甲醇(色谱纯)，双蒸水，倍他米松片(0.5 mg/片)及对照品(99.8 %，上海华联制药有限公司)。
2　色谱条件
流动相：甲醇—水(60∶40)，色谱柱：Whatman Partisphere C₁₈(125 mm×4.6 mm，5 μm)，流速：1.0 mL/min，检测波长：240 nm，柱温：20 ℃。
3　线性范围
精密称取倍他米松对照品，用流动相分别配制成浓度为7.60、15.21、22.81、30.42和38.02 μg/mL的甲醇水溶液，取10 μL进样，重复3次，以峰面积对相应的浓度进行回归，得回归方程：
Y＝3.34+20.46X　r＝0.9999
4　回收率
精密称取已知含量的样品(相当于倍他米松0.5 mg)，加入对照品0.5 mg，照含量测定项下操作，测得回收率为：100.8 %(n=3)，RSD=0.8 %。
5　样品测定
5.1　含量测定　取样品20片，精密称定，研细。精密称取相当于倍他米松0.5 mg的粉末于25 mL容量瓶中，加入流动相适量，超声波振荡5 min，放冷，加流动相至刻度，用滤膜过滤，得供试品溶液。另外精密称取对照品0.5 mg，置于25 mL容量瓶，加入流动相溶解并稀释至刻度，得对照品溶液。分别量取供试品和对照品溶液各10 μL，进样，测得峰面积，以外标法计算含量。本法和紫外分光光度法^［1］测定的结果见表1。

表1　含量测定结果(%，n=3)

批号

本法

UV法

961001

99.1

102.1

961002

102.3

105.6

5.2　含量均匀度测定　取样品10片，分别置于25 mL容量瓶中，按含量测定方法处理并测定，按中国药典计算A+1.8S，结果见表2。

表2　含量均匀度测定结果(A+1.8S值)

批号

本法

UV法

961001

4.8

14.57

961002

7.4

14.74

6　讨论
6.1　对超声波处理样品的时间进行比较，测定了处理时间为5、10、15和20 min的样品的含量分别为100.8 %、100.4 %、102.1 %和100.9 %，表明5 min之内样品已抽提完全。
6.2　USP采用的HPLC流动相为乙腈—水(1∶2)，考虑到试剂成本及与中国药典倍他米松(原料)的测定方法的一致，所以本文选择用甲醇和水作为流动相。

参考文献
1　　中国药典.1995.二部：749
2　　USP.ⅩⅩⅢ.188

(本文于1997年6月16日收到)