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摘要：目的建立肝豆灵片中大黄素含遥测定方法。方法：薄层扫描法，展开剂：正己烷-乙酸乙酯-甲酸(30：10：0.5)，检测波长420nm。结果 大黄素在0.202～1.010μg范围内线性良好，相关系数r=0.9986，平均回收率为97.9％，RSD=1.12％：结论：本法快捷，简便，准确，可用于肝豆灵片中大黄素的含量测定。
关键词：薄层扫描;大黄素；肝豆灵片；含量测定
肝豆灵片由大黄、黄连等组成，是安徽中医学院第一附属医院中药制剂，具有清热解毒，化瘀软坚，利胆排铜等作用，主治肝豆状核变性，疗效显著。为控制制剂质量，笔者应用薄层扫描法测定了其中大黄素的含量，方法简便，结果满意。
1 仪器与材料
Scanner-3薄层扫描仪，瑞士CAMAG公司；定量毛细管，瑞士CAMAG公司；Nanomat 4点样器，瑞士CAMAG公司；双槽展开缸，瑞士CAMAG公司；BP211D十万分之一电子天平，德国赛多利斯公司；SK3200 H超声清洗器，上海科导超声仪器有限公司；硅胶G高效薄层板，青岛海洋化工集团，批号：20030809。肝豆灵片，安徽中医学院第一附属医院制剂中心，批号20020115，20020416，20030605。大黄素对照品(含量测定用)，中国药品生物制品检定所，批号0756—200110。试剂均为分析纯。
2 实验条件
2．1 色谱条件吸附剂：l05℃ 活化30min的硅胶G板，展开剂：正己烷-乙酸乙酯-甲酸(30：10：0.5)，预饱和30min，上行展开，日光下定位。
2．2 扫描条件光谱扫描确定最大吸收波长：吸取1μl对照品溶液，1μl供试品溶液，1μl阴性对照品点于10cm x10cm的硅胶G薄层板上，依法展开。在400～700nm的波长范围内扫描大黄素斑点，结果供试品与对照品420 nm处有最大吸收，而无阴性干扰。因此选定420nm为检测波长。
3 方法与结果
3．1 对照品溶液的制备精密称取大黄素对照品1.0lmg，置5ml量瓶中，加甲醇适量使溶解，并加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
3．2 供试品溶液的制取肝豆灵片，研细，精密称定1.0g，
置具塞三角烧瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称重，超声处理45min，放冷后称重，补足损失的甲醇。滤过，取滤液25ml置蒸发皿中蒸干，残渣用甲醇分次溶解定容于1ml量瓶中作为供试品溶液。
3．3 阴性对照液的制备根据处方组方，取除大黄外其它药材按制剂工艺制成阴性对照制剂。按供试品溶液制备方法同法制得阴性对照液。
3．4 线性关系考察吸取大黄素对照液(0.202g/L)1，2，3，4，5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上。依法展开、扫描。以对照品点样量为横坐标，吸收峰面积积分值为纵坐标，扫描得回归方程C=2945.1 A+354.5，r=0.9986，结果表明大黄素在0.202～1.010μg范围内呈线性关系。由于标准曲线不通过原点，选用外标两点法测定样品含量。
3．5 稳定性考察吸取供试品溶液2μl，点于同一硅胶G薄层板上，依法展开后扫描测定峰面积值。在室温下放置，每隔lh测定一次。结果大黄素斑点在至少5h内稳定，RSD=1.86％ 。
3．6 精密度考察 吸取同一供试品溶液5份点于同一硅胶G薄层板上，依法展开，扫描测定峰面积值，RSD=2.11％ ，结果表明精密度良好。
3．7 重现性考察 对同一样品按上述测定5次，RSD=1.35％ ，结果表明重现性好。
3．8 加样回收率试验精密称定已知大黄素含量的样品5份，各加入大黄素对照品0.503mg，制成供试品溶液，依法测定大黄素的含量，结果计算平均回收率为97.9％，RSD=1.12％ 。
3．9 样品含量测定 吸取大黄素对照品溶液lμl，供试品溶液2μl，对照品溶液3μl分别于同一硅胶G薄层板上，依法展开，扫描测定三批肝豆灵片中大黄素的含量。
4 讨论
大黄素为本身具有颜色的葸醌类化合物，其含量测定方法文献报道的较多，本文应用薄层扫描法，供试品前处理简便，大黄素斑点分离清楚直观，Rf值适中，测定结果准确，不失为肝豆灵大黄素含量测定的一种有效方法。
参考文献：
[1] 李瑞莲，何芝义．薄层扫描法测定天麻首乌片中大黄素含量[J]．中国药事，2003，17(2)：118—9．
[2] 苗明三，李振明．现代实用中药质量控制技术[M]，北京：人民卫生出版社，2000：66—86．
来源：东方医药网