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应用液质联用法检测肌肉组织中的磺胺类药物的残留

来源:中国色谱网
摘要:磺胺类药物(Sulfonamides,SAs)是指具有对氨基苯磺酰胺结构的一类药物的总称,是一类用于预防和治疗细菌感染性疾病的化学治疗药物。为了治疗饲养动物的疾病,提高动物的抗病能力,被广泛的应用于动物饲养过程中,从而造成了肉类中抗生素的残留。在欧盟237790EEC中规定牛奶中总磺胺类药物的最大残留量为100μgKg-1。国际......

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  磺胺类药物(Sulfonamides,SAs)是指具有对氨基苯磺酰胺结构的一类药物的总称,是一类用于预防和治疗细菌感染性疾病的化学治疗药物。SAs种类可达数千种,其中应用较广并具有一定疗效的就有几十种。为了治疗饲养动物的疾病,提高动物的抗病能力,被广泛的应用于动物饲养过程中,从而造成了肉类中抗生素的残留。通过任何途径摄入的SAs会在人体中蓄积,导致许多细菌产生抗药性,对人类的身体健康产生很大的危害,可能导致甲状腺致癌的可能性,过敏和抗药性。
  在欧盟237790EEC中规定牛奶中总磺胺类药物的最大残留量为100μgKg-1。国际食品法典委员会(CAC)和欧美等大多数国家规定食品和饲料中的SAs总量或者磺胺二甲基嘧啶等单个SAs的含量不得超过100μgKg-1-1-1,日本规定食品中不得检出SAs。现今测定磺胺残留的方法主要有酶联免疫法、薄层色谱法、液相色谱法和质谱联用法。酶联免疫法作为初筛法,具有速度快,可进行大批量检测。薄层色谱法可以作为半定量法对磺胺进行分析。液相色谱法具有高灵敏度、线性范围宽等优点而被广泛使用。KristofE.Maudens等人建立了应用柱后衍生荧光检测法测定了蜂蜜中12种磺胺类残留的方法,荧光衍生法需要专一的柱后衍生系统。KunihiroKishida应用二极管陈列检测器分析了肉类样品中的6种磺胺类化合物。MichelY.HaLLer应用了LC-MS联用技术测定了动物肥料里面的六种磺胺药物残留。邵兵等采用LC-MSMS联用技术对猪肉、肾、肝等中的17种磺胺类化合物残留进行了分析。LC-MSMS由于具有高灵敏度和选择性,并适合多组分检测平台的建立,使其在微量分析中得到广泛的应用。UPLC作为Waters公司推出的先进的分离工具,具有快速、高效的分离能力,与MSMS联用具有最佳的效果。Yipingren等很好的运用了UPLC-MSMS技术,分析了17种霉菌毒素,具有灵敏度高,分析速度快,选择性好等优点。该技术将会在生物毒素,兽药残留检测的平台的建立起到很好的推动的作用。
  样品的制备是多残留分析的关键。一般采用固相萃取的方法净化、富集磺胺类药物,特别是动物源性食品中的磺胺类药物残留分析。ThomasS.Thompson和KrispinStoob等人运用在线固相萃取技术(OnlinesoLidphaseextraction)对地表水中的磺胺类药物,中性和酸性杀虫剂,以及蜂蜜中的7种磺胺类药物残留进行了净化和提取。Kuan-HuiLu,Chung-YuChen,Maw-RongLee运用了固相微萃取分析了肉类制品中的磺胺类残留。Ji-DongLi等运用复合材料固相萃取净化了环境水样中的5种磺胺类药物。VimaLK.BaLakrishnan等人采用SPME技术测定了废水中的磺胺类药物,并对SPME和SPE(MCX)进行了比较。BingShao等人采用有机溶液提取和硅胶柱(Sep-PaksiLica)净化的方法测定了猪肉、肾、肝中17种磺胺类化合物残留。L.Verzegnassi等人建立了对蜂蜜中10种磺胺类化合物液-液萃取法。
  本研究采用简便、价格便宜的液液萃取方法前处理方法,快速、稳定、高灵敏度地应用超高压液相色谱四极杆串联质谱联用技术,检测了猪肉样品中的24种磺胺药物残留。经绞碎的样品用乙腈提取和沉淀蛋白,正己烷脱脂,再用乙酸乙酯液液再次萃取以净化基质,经旋转蒸发,在氮气下吹干后用初始流动相定容。WatersACQUITYUPLCBEHC18Column(2.1×100mm,1.7μm)超高效色谱柱分离,三重四极杆串联质谱检测(MRM)。经萃取条件,色谱和质谱参数的优化,建立了一个同时测定24种磺胺的多残留检测方法。使用三个同位素内标和基质加入法,有效的排除了基质干扰。经方法学验证:最低定量限(LOQ)范围:0.04-0.37μgKg-1(进样量5μL);在0.5-50μgKg-1线性范围中,相关系数R2在0.991-0.999之间,各物质回收率为55.3-113.9%(低浓度水平0.5μgKg-1),相对标准偏差均在10%以内。经对相关地区采集的240批次猪肉样品测试表明:方法具有方法操作简单、分离速度快、灵敏度高、定量准确、测定浓度范围宽阔等优点。

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作者: 未知 2009-4-17
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