水杨梅根提取物的GC—MS分离鉴定

　　【摘要】［目的］研究水杨梅根提取物不同提取部位的主要成分。［方法］采用系统溶剂法，对水杨梅根水提液进行氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分步萃取，对各提取液进行气相色谱质谱联用法分析其化学成分。［结果］水杨梅根提取物中含有较多的苯基及含氧基等活性基团成分。［结论］水杨梅根成分为进一步药用研究提供了依据。

　　【关键词】  GC—MS；水杨梅根；提取物

　　Abstract:［Objective］ To research main compounds in different fractions of water extract from the root of Adina rubelle Hance. ［Method］ By systematic solvent extraction, the root was boiled by distilled water, then extracted with Chloroform, acetic ester and butayl alcohol respectively, then analyzed by GCMS. ［Results］Lots of active compounds such as phenyl and oxygen compounds were found. ［Conclusion］The results presented the basis of further study on medical compounds in Adina rubelle Hance.

　　Key words:GCMS;the root of Adina rubella Hance, extract

　　华南理工大学自然科学基金资助项目（322E5041170）， 学生研究计划SRP项目（B10Y13014）    水杨梅根为茜草科落叶灌木植物水杨梅Adina rubella (Sieb. et Zucc.) Hance的根，具有清热解毒，散淤止痛之功效。临床证明水杨梅根具有良好的抗肿瘤活性，尤其是对消化道肿瘤如胃癌、胰腺癌、肠癌等［12］效果显著。水杨梅的花果序中含儿茶素类化合物，另有熊果酸、齐墩果酸、β谷甾醇、水杨梅甲素及生物碱等，但水杨梅根的有效成分报道较少，只有何直升等［3］曾报道了自水杨梅根中分离的数种新的Quinovic acid糖苷化合物。但水杨梅根含有多种成分，对其不同提取部分的比较分析，有助于发现其特征性成分，为针对性的提取分离提供帮助。本文对水杨梅根的煎煮液经系统溶剂提取，采用气—质联用方法分析了其中的主要成分，为有效成分的分离研究提供基础。

　　1  实验材料与方法

　　1.1  仪器：GCMSQP2010气相色谱－质谱联用仪，日本SHIMADZU公司生产。质谱质量范围m/z :21024， S/N>60，精度：PFTBA的各峰（m/z 69/131/219/264/414/502/614/）在±0.1质量数以内。毛细管柱：（30.0m×0.25mm），载气：甲烷 氦气，有机相针式过滤器（13mm×0.22μm）。

　　1.2  色谱条件

　　柱温40.0℃，进样温度270.0℃，进样量1μL，分离度10，总流速16.4mL/min，初始温度设定40.0℃ ，保留2min， 以10.0℃/min 升温到250.0℃，保留3.00min，再以 10.0℃/min升温到270.0℃，流速1.22mL/min，扫描时间3.00min～31.00min，扫描频率2次/s，线性速率39.8cm/sec。扫描范围：30.00m/z～800.00m/z。

　　1.3  质谱条件

　　离子源温度 200.0℃；分离面温度250.0℃；溶解断裂时间2.9min, 极小扫描宽度 0,极限100。

　　1.4  试验方法

　　水杨梅根1kg，加入蒸馏水5000mL，90℃水温煎煮2h，保留滤液，滤渣加入3000mL蒸馏水，90℃水温再煎煮2h，过滤后合并滤液。减压浓缩至1500mL。先后用1000mL氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取2次，分别吸取1mL萃取液，用相同溶剂定容50mL。充分混合。用有机相针式过滤器过滤，进样分析。

　　2  结果

　　2.1  GCMS总体分析

　　分离色谱图见图1。大部分组分色谱峰形较好，能够采用数据分析软件直接进行NIST库搜索，并进行峰面积相对百分含量计算。成分名称及相对含量见表1。表1  水杨梅根不同溶剂提取物中主要成分及相对含量（略）

　　2.2  氯仿提取物

　　水杨梅根水提物经氯仿萃取后，极性较小的成分均被提取，其中主要成分为三十六碳甾体、林丹类化合物，另含有少量吡啶类生物碱。如图1中A所示。

　　2.2  乙酸乙酯提取物

　　乙酸乙酯萃取物中含有较多的小分子化合物。GCMS显示较多的含苯基团，如甲苯基、乙苯基。除了溶剂峰外，另有突出的2峰为环已酮和丁醇，2丁氧基。如图1中B所示。

　　2.3  正丁醇提取物

　　正丁醇萃取物色泽为红棕色，GCMS显示多数为庚酮类及丁酸酯类化合物。如图1中C所示。

　　3  讨论

　　水杨梅根具有很多药理作用，其抗肿瘤效果显著，故在传统中医中多有运用，但是现代药物研究还未对其进行有效成分的鉴定及分离，本试验通过GC－MS联用对水杨梅根不同溶剂提取液进行分析，发现许多含苯基及含氧基化合物，这些活性基团易氧化，是水杨梅根药理作用的基础。这些成分多存在于乙酸乙酯萃取相中，故推断水杨梅根主要成分是可用乙酸乙酯萃取的酚性成分。为了证实该推断，需要对不同提取部位的抗肿瘤活性进行研究，并对有效成分作进一步分离，以期找到主要的抗肿瘤活性成分。

　　【参考文献】

　　［1］管思杰, 杨晓虹, 李怀林，等.草本水杨梅根、茎、叶无机元素的比较分析［J］.长春中医学院学报, 2005, 21(2):30.

　　［2］李郁仁.中医肿瘤学［M］.北京：科学技术出版社,1997:7273.

　　［3］何直升,方世跃,胥传凤.水杨梅化学成分的研究［J］.中草药,1995, 26(6):285287.