气相色谱法测定富马酸比索洛尔中有机残留量

　　【摘要】  目的：建立富马酸比索洛尔原料药中乙醇及乙酸乙酯残留量的测定方法：方法：采用气相色谱法测定，色谱柱为AT·PEG20 M毛细管柱(30 m×0.53 mm×1.0 μm)，以N2为载气，FID检测器，进样口温度：200 ℃，检测器温度：250 ℃，柱温为程序升温：初始温度40 ℃保持3 min，以每分钟8 ℃的速度升至180 ℃，N2流量为7 mL／min，分流比为20∶1。结果：待测物均得到较好的分离，且线性关系良好。结论：本方法简便，可用于富马酸比索洛尔原料药中有机溶剂残留量的测定。

　　【关键词】  富马酸比索洛尔；乙醇；乙酸乙酯；残留溶剂；色谱法，气相

　　Residual Solvents determination in Bisoprolol Gemifrumarate by gas chromatography

　　WANG Shaojian, FU Chenglong

　　(Hainan Selection Pharmaceutical CO, LTD, Hainan Haikou 571124，P.R.of China)

　　［ABSTRACT］ Objective： To establish a method for the limit test of ethyl alcohol and ethyl acetate in Bisoprolol Gemifrumarate. Methods： Gas chromatography(GC) determination was employed and chromatographic column was capillary column AT·PEG20M(30m×0.53mm×1.0μm),with FID detector and nitrogen as carrier gas, Injector temperature was 200 ℃ and the detector temperature was 250℃, column temperature was programmed and initial temperature was 40℃, maintained for 3 min, raised to 180℃ with a rate of 8℃·min1.The flow rate of nitrogen was 7ml·min1.The split ratio was 20∶1. Results： The solvents can be completely separated and good linear relationship within a certain range. Conclusion： The method is easy to apply in detection of residual solvents in Bisoprolol Gemifrumarate.

　　［KEY WORDS］  Bisoprolol Gemifrumarate; Ethyl alcohol; Eethyl acetate; Residual solvents; Chromatography, gas phase

　　富马酸比索洛尔(bisoprolol gemifrumarate)为抗高血压类药，为肾上腺素能β1受体拮抗剂，具有高选择性、长效、强效、低副等优点，为当前治疗高血压、心动过速及心绞痛首选的洛尔类药物［1］。本文根据富马酸比索洛尔原料的合成工艺，参照人用药品注册技术要求国际协调会(ICH)颁布的《药品注册的国际技术要求》［2］及中国药典2005年版二部的有关规定［3］，采用PEG20 M为固定的毛细管柱对原料中可能存在的乙醇及乙酸乙酯进行检测，结果2种溶剂均得到良好的分离，且具有快速、准确，分离度较好的特点，结果满意。

　　1 仪器与试药

　　GC2010气相色谱仪(日本岛津)；PEG20 M毛细管柱(中科院兰州物理化学研究所)；富马酸比索洛尔原料药(海南绿岛制药有限公司提供)；所用试剂均为色谱纯。

　　2 实验方法与结果

　　2.1 色谱条件

　　色谱柱为AT·PEG20 M(30 m×0.53 mm×1.0 μm)的弹性毛细管柱，进样口温度：200 ℃，采用FID检测器，检测器温度：250 ℃，柱温为程序升温：初始温度为40 ℃保持3 min，以每分钟8 ℃的速度升至180 ℃；分流比为20∶1，载气为N2，柱流量为7 mL／min。进样量1 μL，按外标法以峰面积计算含量。

　　2.2 系统适用性与精度试验

　　取乙醇与乙酸乙酯各0.5 g，置100 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密量取1 mL置10 mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为对照器溶液。取对照品溶液1 μL注入气相色谱仪，重复进样5次，记录色谱图，测定结果见表1。

　　表1 方法的分离度与精密度（略）

　　2.3 线性关系

　　分别精密量取乙醇0.63 mL与乙酸乙酯0.56 mL于100 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度摇匀，再分别量取以上乙醇及乙酸乙酯溶液各0.8，0.9，1.0，1.1，1.2mL于10mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，取1μL注入气相色谱仪，记录色谱图，以峰面积与浓度进行线性回归。乙醇：Y=36181X+188635 (r=0.9983)，乙酸乙酯：Y=6827X+46805(r=0.9984)，结果表明乙醇与乙酸乙酯的线性关系均良好。

　　2.4 最小检出限

　　取乙醇与乙酸乙酯各0.5 g，分别置100 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，再分别精密量取1 mL置10 mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为供试品溶液；分别依次稀释，进样1 μL，得乙醇的最低检出量为1.7 ng，乙酸乙酯的最低检出量为3.2 ng(信噪比约S／N=3)。

　　2.5 回收率

　　精密称取乙醇、乙酸乙酯对照品适量，加水制成乙醇及乙酸乙酯均为0.4，0.5，0.6 mg／mL的3种浓度的溶液，作为对照溶液。另取本品适量，精密称定，分别精密加入上述3种对照溶液溶解并制成每1 mL中含100 mg的富马酸比索洛尔溶液，作为供试溶液。每种浓度同法制备3份。取量1 μL，注入气相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算回收率，回收率分别为乙醇101.2%，乙酸乙酯99.3%。

　　2.6 样品测定

　　精密称取乙醇与乙酸乙酯各0.5 g，分别置100 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密量取1 mL，置10 mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为对照品溶液；另精密称取本品适量，加水制成100 mg／mL的溶液，作为供试品溶液，照上述色谱条件测定，同法测定3批。结果3批原料均未检出乙酸乙酯，乙醇的含量分别为0.05%，0.01%和0.08%，结果均符合规定。

　　3 讨论

　　在色谱柱选择时，我们选用过SE30，SE54，HP5及AT·PEG20 M等不同极性毛细管柱，经多次试验调整色谱条件，SE54及AT·PEG20 M均能使待测物分离，但采用AT·PEG20 M色谱柱时，基线、分离度及拖尾因子及理论板数均较好，故采用。

　　根据中国药典2005年版二部［3］的规定，乙醇与乙酸乙酯均为三类溶剂，限度均为0.5%，3批样品的测定结果均远低于限度规定，表明原料残留溶剂控制良好。

　　【参考文献】

　　1 陈鹭颖.富马酸比索洛尔临床前药理研究进展［J］.海峡药学，1999，11(4)：12.

　　2 周海均.药品注册的国际技术要求(质量分册)［M］.北京：人民卫生出版社，2002.130.

　　3 国家药典委员会.中中华人民共和国药典2005年版(二部)［M］.北京：化学工业出版社，2005.附录ⅧP.