血小板计数法（直接试管法）

　　１　原理

　　　　用一种能破坏血液中的红细胞，但能保护血小板形态完整的稀释液稀释血液，滴入血细胞计数池，在高倍镜下直接计数血小板数。

　　２　器材和试剂

　　　　器材同白细胞计数法。稀释液用许汝和氏尿素稀释液。许汝和氏尿素稀释液配制法：尿素１０ｇ，福尔马林０．１ｍｌ，枸橼酸钠０．５ｇ，加水至１００ｍｌ，溶解后过虑，在冰箱内保存。

　　３　操作步骤

　　　　ａ．用２ｍｌ吸管准确吸取血小板稀释液０．３８ｍｌ置小试管中。

　　ｂ．从耳垂采血，用０．０２ｍｌ吸管准确吸取第一滴血，吹入稀释液中，并吹吸两次洗净吸管壁内的血。

　　ｃ．充分振摇，滴入计数池，静置１５～２０分钟，使血小板下沉，以便计数。

　　ｄ．在高倍镜下用计数红细胞所用的５个中方格中的血小板数，乘以１０００，即得每立方毫米血中血小板数。

　　ｅ．血小板在稀释液中表现为富于折光之小点，约为红细胞的１／２～１／３大小。

　　４　注意事项

　　ａ．取血时动作要迅速，穿刺要深。

　　ｂ．一定要用第一滴血，以使血小板保持完整，在稀释液中易于分散。否则，血小板因耳垂受挤压而破坏较多，形态也不规则，在稀释液中不易分散，这样，会使计数结果偏低。

　　ｃ．尿素在室温中容易分散而失效，故稀释液尽可能小量配制，并保存于冰箱之中。

　　ｄ．如红细胞不完全溶解，影响血小板计数的准确性时，可加大稀释倍数，或另换稀释液。

　　ｅ．如室温较高时，可将滴好的计数池放在培养皿下，中间放一湿棉球，以防计数池中的稀释液干掉。