IgA的分离与提纯

（一）材料与试剂配制 1．DEAE52纤维素 2．0.10Mol/L ZnSO₄液 ZnSO₄·7H₂O   2.88g 加水至1 000.00ml 3．饱和硫酸铵溶液 4．10％EDTA—Na 5．SephadexG200 6．0.01Mol/L pH7.4PB液 7．0.10Mol/L pH6.4PB液 8．血清 （二）操作方法 1．取血清加等量的0.1Mol/L ZnSO₄液，调pH至7.0，室温搅拌1h，离心去沉淀。 2．于上清液中加入等量的饱和硫酸铵溶液，混匀后静置30min或冰箱过夜。 3．10 000r/min离心10min，去上清。 4．取沉淀溶于4ml10％EDTA－Na溶液中。 5．生理盐水中透析除盐。 6．过DE₅₂柱，用0.01Mol/L pH7.4PB液洗脱蛋白（IgG）弃去。 7．换用0.1Mol/L pH6.4PB液洗脱，收集蛋白峰，即为IgA。 8．再过SephadexG200柱，洗液为0.01Mol/L pH7.4PBS（0.14Mol/L NaCl），收集洗脱液测OD₂₈₀值，取第一峰即为纯化IgA。 9．透析、浓缩、鉴定。