T细胞亚群、IL-2、NSE与新生儿HIE的研究及临床意义

【摘要】  目的 探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)外周血T细胞亚群、IL-2及神经元特异性烯醇化酶(NSE)的动态变化，为新生儿HIE的诊断、分度、治疗及预后提供新的理论依据。方法 选择36例围生期有缺氧缺血性脑病的新生儿为研究对象(HIE组)，同时选择20例同期出生的正常足月儿为对照组，分别检测T细胞亚群CD3、CD4、CD8、CD4/CD8比值、IL-2和血清NSE的动态变化。结果 ①急性期HIE组T细胞亚群CD3、CD4、CD4/CD8比值及IL-2水平低于正常对照组(P＜0.01)，CD8及NSE水平高于对照组(P＜0.01)；②不同程度HIE组急性期T细胞亚群、IL-2及NSE水平之间相比有显著差异性(P＜0.01)；③恢复期T细胞亚群、IL-2及NSE水平与正常对照组之间相比仍有显著性差异(P＜0.01)，和急性期相比随病情的好转各项指标有明显改善(P＜0.01)；④T细胞亚群CD3、CD4、CD4/CD8比值、IL-2与 NSE呈负相关，CD8T细胞亚群与NSE呈正相关。结论 ①新生儿HIE存在着免疫功能紊乱；②T细胞亚群、IL-2及NSE参与了新生儿HIE的病理生理过程；③外周血CD8T细胞亚群和NSE水平升高，CD4/CD8比值和IL-2水平下调，与新生儿HIE轻重程度呈正相关。

【关键词】  缺氧缺血性脑病；T细胞亚群；神经元特异性烯醇化酶；IL-2；新生儿

    Study on T cell subgroups, IL-2 and NSE in neonates with hypoxic-ischemic encephalopathy and its clinical significance

    ZHENG Zhenwen  LI Jichang  LI Guiying  et al

    The People’s Hospital of Binzhou,Binzhou  256610

    【Abstract】   Objective  To evaluate the dynamic changes of T cell subgroups, IL-2 and NSE levels in the newborn babies with HIE and its clinical significance, and to provide new evidence for the diagnosis, therapy and prognosis of HIE.Methods  To select 36 cases of infants with HIE in perinatal period and they were divided into three groups depending on the severity of the patients’ condition, and at the same time to select 20 cases of healthy newborn babies as control group. To collect peripheral venous blood in acute stage and restoration stage of the HIE group .Two blood samples were collected in each cases, one is on the first to third day after birth, the other on the seventh to tenth day after the treatments.T cell subgroups CD3,CD4,CD8,CD4/CD8，IL-2 and NSE were measured differently by FC, RIA and ECLI. Results  ①In acute stage，HIE group’s CD3, CD4，CD4/CD8 and  IL-2 were lower than the control group’s, while CD8 and NSE higher than the control group ; and they had significant difference between HIE group and control group（P＜0.01）.②There was significant difference between the levels of T cell subgroups, IL-2 and NSE with different severity in acute stage of HIE (P＜0.01).③There was significant difference between the levels of CD3, CD4, CD4/CD8, IL-2 and NSE in the restoration stage with HIE and the control group (P＜0.01). ④ The concentrations of CD3, CD4, CD4/CD8, IL-2 had negative correlation with NSE，while CD8 positive correlation with NSE. Conclusion  It is suggested that immunity function was impaired and disodered in neonates with HIE. T cell subgroups, IL-2 and NSE may be involved in the pathophysiology course of HIE. T cell subgroups, IL-2 and NSE were correlated with the severity of HIE, the more serious of lower level of T cell subgroups and IL-2, the higher level of NSE.

    【Key words】  hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), T cell subgroups,neuron-specific enolase (NSE)，IL-2，newborn

    本研究通过对2004年1月—2005年12月在我院收治的36例新生儿HIE进行了探讨，分析T细胞亚群、IL-2、NSE与新生儿HIE的研究及临床意义，现报告如下。

    1  资料与方法

    1.1  标本来源  36例新生儿HIE组，其中男21例，女15例。对照组20例，男11例，女9例，为同期在产科出生的正常新生儿。两组之间比较无明显差异性。

    1.2  检测方法  HIE组及对照组T细胞亚群采用流式细胞仪检测，血清NSE同批采用电化学发光免疫分析法测定，IL-2采用放射免疫法测定。

    1.3  统计学处理  采用SPSS 10.0软件进行计算机统计分析。采用t检验和方差分析等，以P＜0.05为差异有显著性意义。

    2  结果

    急性期HIE患儿T细胞亚群水平低下，CD3、CD4低于对照组，两组之间比较差异有显著性（P＜0.01），CD8高于对照组，CD4/CD8比值下降，出现倒置，两组之间相比有显著差异性（P＜0.01）；IL-2水平下降，两组之间比较有显著性差异(P＜0.01)；NSE水平明显高于对照组，两组之间比较差异有显著性（P＜0.01），详见表1。表1  HIE组急性期与正常对照组各项检测指标比较轻度HIE组与对照组相比较，各项指标有显著性差异（P＜0.01,P＜0.05）；中度HIE组与对照组各项指标相比差异有显著性（P＜0.01）；重度HIE组与对照组相比差异有显著性（P＜0.01）；重度HIE组与中度HIE组相比较有高度显著性（P＜0.01）；中度HIE组与轻度HIE组相比较有显著性（P＜0.01）。重度HIE组与轻度HIE组相比较差异有高度显著性（P＜0.01）。T细胞亚群CD3、CD4、CD4/CD8比值下降，CD8升高，降低或升高的变化趋势随病情程度加重而更加明显；IL-2水平低下，随HIE患儿病情程度加重而降低；NSE水平升高，随新生儿HIE患儿病情程度加重而升高，详见表2。表2  不同程度急性期HIE组与对照组各项指标水平比较恢复期HIE组与急性期HIE组各项指标有明显改善。两组之间比较有显著差异性（P＜0.01，P＜0.05）。T细胞亚群水平上调，CD3、CD4及CD4/CD8比值上升，两组之间比较有显著差异性（P＜0.01），CD8水平下调，两组之间比较仍有显著差异性（P＜0.05）；IL-2水平上调，两组之间比较有显著差异性（P＜0.01）；NSE水平明显下调，两组之间比较有显著差异性（P＜0.01），详见表3。由此说明，新生儿HIE患儿经过积极治疗T细胞亚群的紊乱有了明显恢复。表3  恢复期HIE组与急性期HIE组各项指标水平比较

    3  讨论

    新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)是指在围生期缺氧窒息而导致的缺氧缺血性损害，临床出现一系列脑病的表现。围生期缺氧性脑损伤对患儿最长远的危害是神经系统后遗症，主要发生在中度以上缺氧缺血性脑病［1］。

    负责T细胞免疫的T淋巴细胞，CD3代表总T细胞，占外周血淋巴细胞的70%～80%。除CD3主要表达成熟T细胞外，一部分淋巴细胞同时表达CD4，其功能为辅助免疫反应的产生，另一部分表达CD8，其主要功能为直接杀伤靶细胞，又称细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。CD4T细胞的功能为调节免疫反应，又称辅助性T细胞(Th)，按分泌的细胞因子不同可分为Th1和Th2细胞两个亚群。Th1细胞分泌白介素-2和干扰素，促进CTL和自然杀伤细胞消灭靶细胞，发挥细胞免疫作用。Th2细胞分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-9、IL-10和IL-13等，辅助B细胞合成和转换免疫球蛋白，发挥抗体免疫作用［２］。T细胞的辅助与抑制功能处于相互平衡状态。任何原因影响T细胞的增殖与分化都可导致CD3、CD4、CD8及CD4/CD8比值改变［3］。T淋巴细胞不仅是细胞免疫反应的效应细胞，而且还是重要的免疫调节细胞，其中CD4/CD8比值对机体的细胞免疫和体液免疫具有重要的免疫调节作用［4］，而且是判断机体免疫状态的重要指标［5］。CD4是机体合成分泌IL-2的主要细胞，IL-2是主要的T细胞生长因子，它具有促进T细胞增殖、增强活化的T细胞产生淋巴因子，诱导淋巴细胞表达IL-2受体等广泛生物活性，是参与体内免疫调节的重要淋巴因子［3，6］。在免疫系统中各免疫细胞间需要相互调节，形成网络才能发挥作用。本研究表明，CD4细胞明显减少，这样使得IL-2生成减少，最终导致IL-2水平下降，从而减少机体的自分泌反应，抑制T淋巴细胞克隆扩增，导致细胞免疫功能降低。有文献报道,HIE患儿外周血成熟T淋巴细胞CD3+，辅助/诱导T细胞CD4+，抑制/细胞毒T细胞CD8+均明显降低。本研究显示，新生儿HIE患儿急性期T细胞亚群CD3、CD4、CD4/CD8比值明显下调，CD8T细胞亚群上升。恢复期HIE患儿CD3、CD4、CD4/CD8比值上升，CD8下降。本研究表明，新生儿HIE患儿存在着T细胞亚群功能紊乱，而且参与了新生儿 HIE的病理生理过程。

    IL-2主要由活化的T淋巴细胞产生。IgM的生成需要IL-2参与，而IL-2又是CD4细胞所分泌，由于患儿CD4细胞减少，故IgM降低，因此IL-2在机体免疫应答、免疫调节中具有重要作用［7］。本研究表明，新生儿HIE急性期不同程度之间IL-2水平有着不同程度的下降，恢复期有了不同程度的上调。说明新生儿HIE导致了IL-2分泌的紊乱。

    NSE在正常体液中含量甚微，波动范围小，呈相对稳定性，与非神经元性烯醇化酶之间无交叉免疫反应。在脑损伤时神经细胞受损裂解，血脑屏障被破坏，NSE释放至脑脊液及血液中，使NSE浓度升高，因此NSE的含量改变可反映中枢神经系统的病理变化，血清NSE测定可反映脑损害程度［８，９］，是检测脑内神经元损伤或坏死的客观指标［１０～12］。本研究表明，HIE组急性期血清中NSE水平增高，并且随着病情程度的加重，NSE 水平逐渐增高，提示NSE与脑缺氧缺血性损伤以及损伤程度有关。因此，临床可根据NSE水平，判断新生儿HIE的严重程度，并及时指导临床治疗。本组2例重度HIE新生儿，其血清NSE水平高达370 ng/L以上，住院2 d均死亡。

    综上所述，通过对HIE患儿T细胞亚群、IL-2及NSE的动态变化的观察，得以提示，新生儿HIE存在着免疫功能紊乱，并且T细胞亚群、IL-2及NSE参与了新生儿HIE的病理生理过程，与新生儿HIE病情的轻重程度有相关性，T细胞亚群和IL-2水平越低，NSE水平越高，脑损伤程度越重，亦是新生儿HIE患儿早期诊断的较好的敏感生化指标。从而为新生儿HIE的早期诊断和治疗提供了极大的帮助，从免疫学的角度对新生儿HIE的治愈率有望展现新的突破。

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作者单位：滨州市人民医院 滨州市 256610