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摘要：目的 探讨冠心病(Coronary heart disease, CHD)患者血清总胆红素(Total bilirubin, TBIL)与氧化修饰低密度脂蛋白(low density lipoprotein, OX-LDL)水平的变化及其相互关系。 方法 采用氧化酶法和ELISA(Enzyme-linked immunoadsordent assay)法分别检测血清TBIL及血浆OX-LDL水平。 结果 冠心病患者血清TBIL水平显著低于正常对照组（P<001），而血浆OX-LDL水平则明显高于正常对照组（P<001）; 冠心病患者血清TBIL与血浆OX-LDL水平呈显著负相关（r =－059, P＜001），而正常对照组这两成分间则无明显相关性（r =－018，P<005）。 结论 冠心病患者血清TBIL水平显著降低而OX-LDL显著升高；冠心病患者血清TBIL抗LDL氧化能力的减弱可能是导致OX-LDL升高的重要原因之一。
关键词：冠心病；胆红素；脂蛋白；氧化修饰低密度脂蛋白；血红素氧化酶
中图分类号：R5414 文献标识码：A 文章编号：1009-9727（2005）02-203-02
Study on the relationship between total bilirubin and oxidized low density lipoprotein in patients with coronary heart disease YI Wei-lian, YUAN Han-rao, CHEN Ling, et al (laboratory Department of Affiliated Hospital of Guangdong Medical College, Zhanjiang 524001, Guangdong, P R China)
Abstract：Objective To investigate the changes of total biliruin (TBIL) and oxidized low density lipoprotein (OX-LDL) and the relationship in patients with coronary heart disease(CHD) Methods Total bilirubin is measured by analysis Plasma OX-LDL was measured by double antibody enzyme-linked immunoadsordent assay Results Serum level of TBIL is greatly decreased in patients with CHD as compared with healthy subjects(P<001), while plasma level of OX-LDL is markedly increased in patients with CHD as compared with healthy subjects (P<001) Serum level of TBIL is inversely correlated with plasma level of OX-LDL in patients with CHD(r =-059, P<001) There is no difference in serum level of TBIL and plasma level of OX-LDL in healthy subjects Conclusion TBIL plays roles against LDL oxygenation in CHD and the impairment of anti-oxidate ability of TBIL may be an important factor causing OX-LDL level to be increased in patients with CHD
Key words： Coronary heart disease; Bilirubin; Lipoprotein, oxidatively modified low density; Heme oxygenase
低密度脂蛋白（low density lipoprotein，LDL）脂质过氧化是发生动脉粥样硬化（AS）过程中的重要环节之一，而抗氧化剂对抑制LDL氧化、延缓动脉粥样硬化过程十分有益。胆红素被证明是人体内的一种天然抗氧化剂，具有比维生素E更强的抗氧化活性［1］，属于能有效抑制低密度脂蛋白（LDL）氧化修饰的抗氧化物质之一。在生理情况下，胆红素对防治因氧化修饰低密度脂蛋白（OX-LDL）而致的动脉粥样硬化所致冠心病(coronary heart disease, CHD)发挥着重要的作用［2］。近年来的研究表明血浆中低浓度的胆红素可能是冠心病的一个独立危险因素，与冠心病的发生发展密切相关［3］。本文旨在进一步探讨冠心病患者血清TBIL 和血浆OX-LDL水平的变化及其相互关系。
1 材料和方法
11 研究对象 冠心病组65例，为本院住院或门诊患者，其中男37例，女28例，年龄37～79岁（平均58岁）。均符合WHO冠心病的诊断标准［4］。所有病例均排除肝胆肾系统疾病、贫血、溶血及内分泌疾病；正常对照组48例，均为本院健康体检者，其中男25例，女23例，年龄34～72岁（平均53岁）。均排除高血压、肝肾疾病、心脑血管疾病及脂类代谢异常。所有研究对象均于试验前10d禁服抗氧化药物，清晨空腹时采肘静脉血4 ml，其中2 ml用于制备血清（测定TBIL），另2ml用于制备血浆（测定OX-LDL）。
12 实验方法 血清TBIL测定采用氧化酶法测定，使用美国贝克曼公司CS500型全自动生化分析仪，试剂由该公司配套提供；血浆OX-LDL测定采用酶联免疫吸附双抗体夹心法（ELISA）测定，使用美国Microplate Reader公司的RT-2100C型酶标仪，试剂盒由美国雅培公司（ABOOT）提供，全部操作严格按试剂盒要求进行。
13 统计学处理 应用SPSS100统计分析软件进行统计分析，所有数据均以均数±标准差（±s）表示，两组间计量资料比较用t检验，直线相关分析应用pearson相关分析。
2 结果
21 CHD组与正常对照组TBIL 和OX-LDL水平的比较（见表1）。
表1 两组TBIL和血浆OX-LDL水平的比较(x±s) (略)
Table 1 Comparison of TBIL with the plasma level of OX-LDL in the tuo groups(x±s)
注：*P＜001
22 相关性分析 CHD组血清TBIL与血浆OX-LDL呈显著负相关（r =-059，P＜001）；而正常对照组血清TBIL与血浆OX-LDL间无明显相关性（r =-018，P＞005）。
3 讨论
胆红素是由血红素氧化酶（HO）作用下分解代谢的产物，其分子具有特殊的卷曲结构和不对称性，在体内与白蛋白结合后存在于心室肌细胞部位极易与自由基反应，因而具有清除自由基的功能，对维持体内氧化与抗氧化的平衡有着重要的作用［5］。本文结果显示，CHD患者血清TBIL水平降低，而OX-LDL水平则升高，两者与正常对照组相比较均有显著性差异（P＜001）。胆红素降低，其清除自由基的能力必然减弱，导致体内自由基聚集，增强了机体内的氧化能力，沉积在血管壁中的血浆LDL在过量的氧自由基的作用下，与体内大量多价不饱和脂肪酸发生过氧化反应，大量卵磷脂转化为溶血卵磷脂，过氧化的脂肪酸与载脂蛋白B中的赖氨酸结合，发生氧化修饰形成OX-LDL。大量研究证实从人和兔AS病变中提取的LDL与体外OX-LDL在理化性质和生物学特性方面有许多相似之处，一方面OX-LDL对循环的单核细胞具有化学趋化作用，而对组织巨噬细胞的趋化性有抑制作用；另一方面OX-LDL具有较强的细胞毒性能导致血管内皮细胞损伤，而且有很强的免疫原性可刺激机体产生自身抗体，并与其形成免疫复合物，促进泡沫细胞的形成；此外OX-LDL还能直接引起血小板聚集，促进血栓形成，促使AS的发生、发展［6］。在LDL氧化过程中会产生大量的羟自由基参与OX-LDL的形成，在此过程中自由基及OX-LDL攻击细胞膜，使红细胞中含较多不饱和脂肪酸的饱和度增加，使生物膜变性，造成细胞膜跨膜流动性降低，引起心肌缺血缺氧导致冠心病［7］。目前人们对胆红素水平的降低而导致人体病理生理改变的机理还未十分明了，有作者认为胆红素具有抑制OX-LDL所诱导的单核细胞的趋化性，阻抑脂蛋白在血管沉积、减缓血管斑块的形成等［8～10］，这可能是胆红素影响冠心病发生发展的机制之一。本文实验结果发现，冠心病患者血清总胆红素与血浆OX-LDL呈显著负相关，随着总胆红素的逐步降低，OX-LDL呈现出明显的同步反向增高的趋势；而健康成人总胆红素与OX-LDL间则无明显的相关性。提示胆红素在冠心病中参与了抗LDL氧化的作用，这可能与胆红素阻断了LDL脂质过氧化增殖链式反应的某一个环节，从而抑制了OX-LDL的形成有关。
冠心病患者TBIL偏低的原因目前尚未完全明了。Hopkins等［11］对一组早期家族性CHD患者分析发现，其TBIL水平远低于正常人的水平。日本学者观察到患有动脉粥样硬化的大鼠血中铁原卟啉Ⅸ含量升高，与对照组比较具有显著性差异，而铁原卟啉Ⅸ是HO活性的抑制剂；Ishizaka等［12］用血管紧张素II处理培养的鼠动脉平滑肌细胞，观察到诱生型HO（HO-1）mRNA水平降低，其蛋白含量及活性也相应下降，冠心病患者体内的血管紧张素II显著增高。因此可以推测，冠心病患者体内存在有影响HO活性的因子。HO-1是胆红素的限速酶，其活性改变无疑会影响胆红素的生成，目前认为这是机体缺氧应激作用和抗氧化应激作用的结果。这些资料及本文结果提示，胆红素可能是一种强内源性抗氧化剂, 具有强效抗脂类和脂蛋白氧化的作用，尤其是能防止LDL被氧化成OX-LDL，而后者是公认的致AS的关键因素。所以，胆红素的抗氧化功能特别是对LDL的保护，可能是其防止AS发生和降低冠心病风险的重要因素。
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作者单位：广东医学院附属医院检验科，广东 湛江 524001
作者简介：易伟莲(1963～)，女，汉族，广东吴川人，主管技师，主要从事临床检验工作