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【关键词】 泌尿生殖道;病原体;检测
Analysis of results in detection of pathogens in uroreproductiv tract of patients.
YANG Ji-qing, CHEN Li-yan, SUN Jie-sheng,et al.
(Enshi Tujia Nationality Autonomous Prefecture Central Hospital, Enshi 445000, Hubei, P. R. China)
为了解恩施地区泌尿生殖道患者各种病原体感染的情况,为防治工作提供参考,我们应用荧光定量PCR的方法对来就诊的1 220例泌尿生殖道患者进行病原体检测,兹将结果分析报告如下。
1 材料和方法
1.1 对象 2006年2月~2007年2月到妇产科及皮肤科诊查的1 220泌尿生殖道疾病患者,其中男性457例, 女性763例,年龄20~72岁。
1.2 仪器和试剂 采用瑞士Roche公司LightCyclerTM全自动荧光定量PCR循环仪,仪器数据处理软件5.32版。试剂采用的荧光定量PCR试剂盒由广州中山大学达安基因股份公司提供。
1.3 方法 标本采取严格按实验要求进行。标本检测全部操作严格按照试剂盒说明书进行,均设有阴性对照、强阳性对照、临界阳性对照、和104~107 4种阳性参考品,所有样本同时扩增,得出所测样本中的测定值用拷贝/ml表示。每次试验中,阴性对照的Ct值(循环阈值)不显示任何数值,阳性参考品的标准曲线的r值介于0.98~1。试剂检测下限为5×102拷贝/ml。
2 结果
2.1 病原体总检出结果 1 220例患者808例检出病原体,总阳性率为66.2%。其中男性457例中检出阳性247例,阳性率54.0%;女性763例中检出阳性561例,阳性率73.5%。
2.2 病原体检出分布
2.2.1 种类分布 共检出溶脲脲原体(UU)、沙眼衣原体(CT)、奈瑟淋球菌(NG)、单纯性疱疹病毒2型(HSVⅡ)和人乳头瘤病毒6.11型(HPV6.11)五种病原体,检出阳性率及占构成比详见表1。
2.2.2 病原体检出的标本分布 见表2。
3 讨论
1 220例患者共检测出808例,阳性率为66.2%。其中UU(溶脲脲原体)阳性580例,占总数的47.5%,占构成比71.8%,其中女性440例,男性140例,与有关文献报道60%[1]相近,分泌物标本占921例,检出686例,阳性率56.2%。说明分泌物具有病原体含量高,易取样,易检出等特点;而尿液、疱液和精液所占比率较低,故泌尿生殖道感染的患者采集标本最好建议直接采取病灶分泌物。本实验运用实时荧光定量PCR技术检测病原体,它不仅具有普通PCR的高灵敏性,而且由于探针的应用,可以通过光电信号的变化以获得定量结果,所以还具有DNA杂交的高特异性和光谱的高准确度,克服了常规PCR的许多缺点[2]。
表1 1 220例患者检出病原体分布(略)
表2 病原体检出标本分布(略)
由于本试剂的检测灵敏度为5×102拷贝/ml,大大提高了检测的阳性率,为临床提供了早期诊断、早期治疗的科学依据,对及时控制感染具有重要的临床意义。
【参考文献】
[1] 徐向荣, 叶红,周宗立.支原体感染与不孕的关系[J].中华检验医学杂志,2004,27:604.
[2] 孙静, 陈曲波, 张林林,等.乙肝标志物模式与HBV-DNA定量的分析比较[J].现代中西医结合杂志,2002,11:750.
作者单位:恩施土家族自治州中心医院, 湖北 恩施 445000.