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【摘要】 目的了解下呼吸道感染住院患者中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的流行及耐药性现状，为指导临床合理使用抗生素提供依据。方法 收集2005年7月～2007年3月广西第二人民医院呼吸道感染住院患者痰和咽拭子培养物，经API 20E鉴定系统鉴定为大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌株并作药敏检测后的数据进行统计分析。结果 2 905份标本中共检出病原菌941株。其中,大肠埃希菌174株，检出率为5.99%,又其中产ESBLs116株，占66.7%，肺炎克雷伯菌259株，检出率8.92%,其中产ESBLs117株，占45.2%。两菌检出数分别占检出革兰阴性菌总数(658)的26.4%和39.4%。产ESBLs菌株对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦的耐药率分别仅为0.00%、1.72%、2.59%，对头孢西丁、丁胺卡那耐药率相对也比较低，而对庆大霉素、阿莫西林/棒酸、环丙沙星、复方新诺明耐药率高达68.10%～95.69%，显著高于非产ESBLs菌株。结论 下呼吸首感染患者中肺炎克雷伯菌检出率高于大肠埃希菌,两菌检出数占革兰阴性菌较高比例。产ESBLs菌不仅对青霉素类及头孢菌素类抗生素耐药，而且对氨基糖苷类、喹诺酮类及磺胺类抗生素呈现多重耐药。
【关键词】 下呼吸道感染;大肠埃希菌;肺炎克雷伯菌;流行;耐药性
大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是临床常见病原菌，主要引起呼吸道和泌尿道感染。随着第三代头孢菌素的广泛应用，对这类抗生素耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌不断增多，且不易被呼吸道防御机制杀灭，尤其是产ESBLs菌的出现，成为下呼吸道感染常见的病原菌。因此，及时、准确地了解目前地区性大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌流行及耐药情况，对于指导临床合理使用抗生素、延缓细菌耐药性的产生和控制耐药菌的播散及流行具有重要意义。为此,我们对2005年7月～2007年3月期间从广西第二人民医院下呼吸道感染患者的痰等标本培养出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌株及其药敏结果进行分析如下。
1 材料和方法
1.1 标本来源
收集本院2005年7月～2007年3月住院患者的所有痰及咽拭子标本共2 905份。
1.2 细菌培养分离与鉴定
培养所用营养琼脂为美国产哥伦比亚琼脂，每份标本均接种羊血琼脂平皿、巧克力平皿和麦康凯平皿3种培养基，按常规规程分离培养,菌种鉴定采用法国生物梅里埃API鉴定系统。
1.3 药敏试验
采用K-B纸片扩散法，药敏纸片购自英国Oxoid公司，MH琼脂购自杭州天和生物有限公司，操作及药敏结果判断严格按照美国临床实验室标准委员会（NCCLS/CLSI）2004年标准执行。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿假单胞菌ATCC27853、肺炎克雷伯菌ATCC00603，均由卫生部临检中心提供。
1.4 ESBLs确证试验
按美国NCCLS/CLSI推荐的双纸片协同试验进行。
1.5 统计分析
采用世界卫生组织推荐的WHONET5.3微生物实验室数据管理软件进行统计分析。
2 结果
2.1 细菌培养结果
2 905份标本共培养出细菌阳性1 732份，培养阳性率为59.6%，除去同一患者培养出同一病原菌引起的重复，非重复阳性标本共941份，其中革兰阴性菌658株，占所检出病原菌总数(941)的69.9%。革兰阴性菌中以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌常见，共433株，占所有革兰阴性菌的65.8 %，其中大肠埃希菌174株，占26.4%；肺炎克雷伯菌259株,占39.4%。
2.2 ESBLs检出情况
共检出产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌233株，。其中产ESBLs大肠埃希菌116株，占大肠埃希菌株的66.7 %，产ESBLs肺炎克雷伯菌117株，占肺炎克雷伯菌株的45.1 %。
2.3 产ESBLs株与非产ESBLs株的耐药率比较详见表1。
3 讨论
大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌在下呼吸道感染中日益占居重要地位，并呈逐年上升趋势［1］，本资料显示这两种细菌感染的总和占居革兰阴性菌的首位。产ESBLs菌株是肠杆菌科细菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药的主要原因。本结果显示，产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的总检出率为53.8%(233/433),与吕霞等［2］报道的相近，但高于孟祥红等［3］的报道，说明不同地区因所选择的抗菌素不同导致ESBLs的分离率不同。产酶株主要来自老年科、呼吸内科、脑外科、胸外科和神经内科的标本，说明患者病情危重、住院时间长、机体抵抗力低和长期大量使用广谱抗生素，尤其是一～三代头孢类抗生素极易导致ESBLs菌的产生，应引起临床的高度重视，避免产ESBLs菌株在院内的爆发流行。表1 产ESBLs株与非产ESBLs株的耐药率（%）比较（略）
比较产ESBLs菌和非产ESBLs菌对16种抗生素耐药率发现：对产ESBLs菌仍保持有较高活性的抗生素有亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦，对头孢西丁、丁胺卡那耐药率相对也比较低，而对庆大霉素、阿莫西林/棒酸、环丙沙星、复方新诺明的耐药率高达68.10%～95.69%，且显著高于非产ESBLs菌株，表明产ESBLs菌不仅对青霉素类及头孢菌素类抗生素耐药，而且对氨基糖苷类、喹诺酮类及磺胺类抗生素呈现多重耐药。产ESBLs菌株在体外实验中对某些广谱头孢类敏感，但在体内无效。NCCLS-1999版中也指出产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌虽然体外药敏呈敏感，但临床上青霉素类、头孢菌素类和氨曲南的治疗可能呈耐药［4］。因此，凡临床分离株的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均应检测是否为产ESBLs株，若产ESBLs，无论体外对青霉素类、头孢菌素类和氨曲南的药敏结果如何，均应报告为耐药，即一旦确定为产ESBLs菌株，均应首选亚胺培南等碳青霉烯类或加酶抑制剂的复方β-内酰胺类抗生素治疗。
【参考文献】
［1］林庆安，罗文侗，修清王，等. 上海部分地区肠杆菌科产超广谱β-内酰胺酶情况及药敏监测［J］. 中华结核和呼吸杂志，2000，23（7）：420～422.
［2］吕霞，李从荣. 产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希氏菌耐药性检测［J］. 医学临床研究，2006，23（3）：353～355.
［3］孟祥红，肖漓，匡铁吉，等. 产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌的耐药性研究［J］. 中国实验诊断学，2006，10（1）：55～57.
［4］National Committee for Clinical Laboratory Standards. Performanec standards for antimicrobial susce-otibility testing［S］. NCCLS, M100-S, 1999, 19(1):20～36.
作者单位：广西壮族自治区第二人民医院检验科,广西 桂林 541002.