点击显示 收起
【摘要】 目的 了解临床产超广谱β-内酰胺酶（ESBLS）革兰阴性杆菌的耐药情况，以利于对ESBLS的监测和治疗。方法 用NCCLS推荐的初筛和确证试验对临床分离的216株革兰阴性杆菌进行ESBLS鉴定，并用K-B法对检出的ESBLS阳性菌株进行9种抗生素的药敏试验，作耐药性分析;调查ESBLS阳性菌株产生的重点科室。结果 共检出ESBLS阳性菌株82株，总检出率38.0%;亚胺配能、头孢西丁、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦的敏感率分别为99%、90%、86%、98%、86%。结论 亚胺配能、头孢西丁、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦是对ESBLS临床治疗有效的药物;新生儿病房、血液科病房、肾病病房、外科ICU是ESBLS产生的重点科室。
关键词 超广谱β-内酰胺酶 革兰阴性杆菌 耐药性分析
随着临床头孢菌素类超广谱β-内酰胺酶类抗生素的广泛使用，使得产超广谱β-内酰胺酶（ESBLS）菌株检出率逐年增多，给临床抗生素的使用造成很大困难，为更好地控制产ESBLS菌株传播，指导临床用药，我们对2002年1月～2003年12月本院临床标本中分离的216株大肠埃希菌，克雷伯菌产ESBLS情况及耐药性进行了研究。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验菌株 实验所用菌株来自本院2002年1月～2003年12月临床标本中分离的标本，其中大肠埃希菌125株，肺炎克雷伯菌70株，产酸克雷伯菌21株，质控菌株为标准菌株大肠埃希菌ATCC25922，肺炎克雷伯菌ATCC700603。
1.1.2 药敏纸片 头孢他啶、头孢噻肟、头孢曲松、氨曲南、庆大霉素、环丙沙星、阿米卡星、亚胺配能、头孢西丁、阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦、氨苄西林/舒巴坦、复方新诺明（上海伊华公司）头孢他啶/棒酸、头孢噻肟/棒酸（英国Oxoid公司），M-H琼脂干粉购自英国Oxoid公司，培养基由本室自配。
1.1.3 菌株鉴定 法国生物梅里埃API鉴定系统鉴定。
1.2 方法
1.2.1 初筛试验 ［1］ 按NCCLS初筛标准，在纸片法药敏试验中，只要符合下列任何一项指标:头孢他啶≤22mm，头孢曲松≤25mm，头孢噻肟≤27mm，氨曲南≤27mm，即为产ESˉBLS可疑菌株。
1.2.2 确诊试验 ［1］ 按NCCLS纸片法确诊试验，将初筛可疑菌株用头孢他啶、头孢他啶/棒酸及头孢噻肟、头孢噻肟/棒酸做纸片法药敏试验，经摄氏35度温育16～18h，观察结果，含棒酸和不含棒酸的抗生素纸片间的抑菌直径相差≥5mm，可证实产ESBLS。
1.2.3 药敏试验 用纸片琼脂扩散法（K-B法）检测确证阳性菌株对9种抗生素的药敏情况。
2 结果
2.1 初筛试验 筛选出可疑菌株128株，其中大肠埃希菌72株，肺炎克雷伯菌43株，产酸克雷伯菌13株，质控结果为:肺炎克雷伯菌ATCC700603，头孢他啶15mm，头孢曲松21mm，头孢噻肟20mm，氨曲南16mm;大肠埃希菌ATCC25922，头孢他啶30mm，头孢曲松32mm，头孢噻肟32mm，氨曲南31mm，质控均在合格范围内。
2.2 确诊实验 检出产ESBLS菌株共82株，其中大肠埃希菌为42株，占待检菌33.5%，占初筛阳性菌58.0%;肺炎克雷伯菌32株，占待检菌的45.7%，占初筛阳性菌的74.4%;产酸克雷伯菌8株，占待检菌的38.1%，占初筛阳性菌的61.5%。
2.3 9种抗生素对82株产ESBLS菌的耐药性分析 见表1。
表1 9种抗生素对82株产ESBLS菌药敏结果 （略）
2.4 82株产ESBLS菌株的临床科室分布 儿科（主要是新生儿病房）13株，血液科15株，肾病科16株，外科（主要是ICU）23株，内科6株，妇产科2株，骨科3株，传染科4株。
3 讨论
我院产ESBLS革兰阴性杆菌主要见于大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌，ESBLS的总检出率为38.0%，上述三种菌的检出率分别为33.5%、45.7%、38.1%，这比有的报道要高 ［2］ ，又比有的报道低 ［3］ ，其原因可能与统计的范围大小、地区用药差异及病种不同有关，但本院ESBLS的检出率已经较高，应引起足够重视，注意做好ESBLS的检出工作，当怀疑产ESBLS时，不管体外是否敏感，应避免使用青霉素类、头孢类及氨曲南类抗生素 ［4］ 。
根据NCCLS初筛标准得出的128株可疑菌株，经确证阳性菌株为82株，后者占前者的64.1%，其中上述三种细菌的百分比分别为58%、74.4%、61.5%，可见ESBLS的检出光靠初筛试验还不够，还需试验证实，而且为提高检出率，应同时应用两对药物 ［5］ 。
从结果（四）分析，本院产ESBLS的重点科室为儿科（主要是新生儿病房）、血液科、肾病科、外科ICU，这与上述科室病人较多使用三代头孢菌素以及病人体质较差，易诱导产生ESBLS菌株有关 ［6］ 。
9种抗生素对82株产ESBLS的药敏结果显示:亚胺配能、头孢西丁、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低，尤其是亚胺配能，耐药率为1%是治疗ESBLS的首选药物，这与相关报道一致 ［7］ 。
哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸均为β-内酰胺/酶抑制剂类抗生素，前两者药物敏感率明显大于后者，是因为哌拉西林和头孢哌酮的抑菌能力大于阿莫西林，或者由于菌株大量产酶，药敏纸片中的酶抑制剂不够，所以适当提高酶抑制剂的含量，可增强其抑菌活性。
参考文献
1 National cornmittee for clinical Laboratory standards.Performance stanˉdards for antimicrobial testing ninth information supplement.NCCLS，1999，36.
2 马越，李景云，张新妹.2002年临床常见细菌耐药性监测.中华检验医学杂志，2004，27:38-45.
3 项明洁，彭奕冰，刘明.肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的耐药性问题及检测.中华医学检验杂志，1999，22:316-317.
4 倪语星.质粒介导的超广谱β-内酰胺酶检测.中华医学检验杂志，2004，22:23-25.
5 王辉，高屹，陈民均.简介美国NCCLS药敏试验法规（1999年1月版）的变动部分.中华医学检验杂志，1999，22:318-319.
6 陶云珍，诸丽娟，丁云芳.儿童患者感染产ESBLS细菌的临床分布.临床检验杂志，2003，21:85.
7 祁莹，李开伦，蒋火刚.产超广谱β-内酰胺酶细菌的耐药性研究.中华检验医学杂志，2003，26:712.
（收稿日期:2004-04-28）
（编辑曲 全）
作者单位:212200江苏省扬中市人民医院