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近年来，由于三代头孢菌素大量应用于临床，最终导致产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）细菌逐年增加，许多文献报道，此类菌株具有较高的交叉耐药性和多重耐药性，同时通过耐药质粒可传递给其它细菌，这样给临床用药及控制感染带来一定的难度，因此，及时准确地检测产生ESBLs的菌株其耐药特性，及时将结果报告给临床医生，以有效控制ESBLs菌的传播和流行是非常重要的。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 标本来源 368菌株均由我院2003年1月～2004年6月间的各科临床及门诊标本，包括痰、尿、便、分泌物、前列腺液、脓汁、血液等。
1.1.2 菌株鉴定 严格按照卫生部《检验操作规程》进行鉴定。
1.1.3 质控菌株 大肠埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603均购自卫生部临检中心。
1.1.4 药敏纸片 头孢他啶（CAZ）、头孢他啶/克拉维酸（CAZ/CLV）、头孢塞肟（CTX）、头孢噻肟/克拉维酸（CTX/CLV）、亚胺培南纸片均购自北京天坛药物生物技术开发公司。
1.1.5 培养基 M-H琼脂购自法国生物梅里埃公司。
1.2 方法
1.2.1 菌株分离与鉴定 检验的标本经接种、培养，选择可疑菌落分纯，菌株均经法国生物梅里埃VTTEK鉴定卡鉴定。
1.2.2 ESBLs的检测 对临床分离出的革兰阴性杆菌，主要是肠杆菌科的细菌在进行药敏试验的同时均进行ESBLs的检测。检测方法采用2000年NCCLS标准进行。
1.2.3 纸片扩散初筛法 方法同标准纸片扩散法，选用头孢他啶（CAZ）、头孢噻肟（CTX）、头孢曲松（CRO）均为30μg/片的药敏纸片进行试验，放35℃18～24h，按NCCLS（2000年）标准进行判断，凡头孢他啶（CAZ）的抑菌环直径≤22mm，头孢曲松（CRO）≤25mm，头孢噻肟≤27mm时，视为产ESBLs可疑株。
1.2.4 纸片扩散确证法 将可疑ESBLs株，再用CAZ、CAZ/CLV及CTX、CTX/CLV两组纸片同时测定。经35℃培养18～24h读取结果，如果任何一组含克拉维酸的纸片与相应不含克拉维酸的纸片抑菌环直径之差≥5mm，即判断为产ESBLs阳性株。
1.2.5 药敏试验 采用纸片扩散法（K-B法），判断标准按NCCLS2000年版执行。
2 结果
2.1 ESBLs的检出率 368株菌共检出109株产ESBLs菌，总检出率为29.6%，其中97株大肠埃希菌检出产ESBLs31株，检出率为32.0%，67株肺炎克雷伯菌检出产ESBLs26株，检出率为38.8%。
2.2 检出菌种 检出109株产ESBLs菌株中，除大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌外，还有阴沟肠杆菌、变形杆菌、沙雷菌、枸橼酸杆菌、产气肠杆菌等，由于统计菌株较少，未做分析。
2.3 产ESBLs菌株对9种常用抗生素的药敏结果 见表1。
表1 产ESBLs菌株对9种常用抗生素的耐药率 （略）
3 讨论
超广谱β-内酰胺酶主要由肠杆菌科细菌产生，特别是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌。通过1年半对ESBLs的检 测，ESBLs在我们这样的中小型医院总检出率已高达29.6%，由于产ESBLs菌株不断增多，耐药菌株有逐年上升的趋势，这就应引起临床医师的高度重视，我们微生物实验室也应及时准确地检测产ESBLs菌，为临床用药和控制医院内感染的暴发流行提供依据。
根据NCCLS建议:临床微生物实验室应报告所有产ESBLs菌株对青霉素类、头孢类及氨曲南均耐药。因此，在统计产ESLBs菌株对9种常用抗生素的耐药率时，对上述抗生素未在表中列出。从表1中可见，两种产ESBLs的细菌耐药严重，且有交叉耐药。临床治疗感染时，应根据具体菌种及微生物实验室药敏情况选择适当的抗生素，从测试的9种抗生素中可以看出，亚胺培南可作为治疗产ESBLs菌株感染的首选药。其次还可考虑使用的药物有阿米卡星、呋喃妥因和含酶抑制剂的复方制剂。
作者单位:017000内蒙古鄂尔多斯市中心医院检验科
（收稿日期:2004-08-04） （编辑新 竹）