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超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的产生是导致革兰阴性杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因之一，同时也表现出对其它抗生素的多重耐药性，使临床抗感染治疗的选药范围受到限制，因此，临床微生物实验室对产ESBLs菌株的检出对临床合理用药具有指导作用。目前，ESBLs筛选和确证的最好检测方法为美国临床实验室标准委员会（NCCLS）推荐的纸片扩散法和琼脂（肉汤）稀释法。近年来，国内越来越多的医院引进微生物自动鉴定与药敏分析仪，其中一些仪器的专家系统可以对产ESBLs的菌株进行筛选或直接检测，我们使用的MS-Auto4系统（Version22.26）就可根据耐药表型对产ESBLs的可疑菌株进行筛选提示，为了评价MS-Auto4系统对ESBLs筛选的可靠性，我们在MS-Auco4系统对临床标本分离的150株大肠埃希菌（Eco）和65株肺炎克雷伯菌（Kpn）进行ESBLs筛选的同时，用纸片扩散法做表型确证试验，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 菌株来源 2000年12月～2001年12月我院临床标本分离的150株Eco和65株Kpn。
1.2 细菌鉴定和仪器系统筛选ESBLs 使用MS-Auto4系统及其配套的鉴定与药敏复合板（NC21），均为美国Daˉteehring公司产品。根据MS-Auto4的专家系统（Versiong22.26），对于NC21板，凡头孢他啶（CAZ）≥16μg/ml、头孢噻肟（CTX）≥8μg/ml、头孢曲松（CAX）≥8μg/ml、氨曲南（AZT）≥16μg/ml、头孢泊肟（CPD）≥1μg/ml中任一项成立，系统提示怀疑产ESBLs。
1.3 ESBLs的确证试验 表型确证试验及结果判定按照NCCLS1999年推荐的纸片扩散法标准 ［1］ 进行。确证药敏纸片CAZ、CAZ/CA、CTX和CTX/CA为英国OXIOD公司产品。
1.4 质控菌株 大肠埃希菌ATCC25922和肺炎克雷伯菌ATCC700603。
2 结果
150株Eco和65株Kpn，经确证产ESBLs的有40株和21株，阳性率分别为26.7%和32.3%。MS-Auto4系统筛选产ESBLs的有60株和26株，筛选出全部产ESBLs菌株，灵敏度为100%（61/61），特异度为83.8%（129/154），假阳性率为16.2%（25/154），仪器系统筛选为阴性的菌株，经证亦为阴性，没有造成漏筛。用仪器系统筛选，不同底物的筛选结果比较见表1。
表1 仪器筛选中不同底物的筛选结果与确证结果的比较（略）
注:灵敏度=A/（A+C），特异度=D/（B+D），假阳性率=B/（B+D）
3 讨论
质粒介导的ESBLs主要由肠杆菌科细菌产生，代表菌为大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，产ESBLs菌不仅对所有三代头孢菌素和氨曲南耐药，而且还对氨基苷类、喹诺酮类和磺胺类呈交叉耐药性，给临床治疗带来极大的困难。此外由于ESBLs由质粒介导，容易在细菌中转移和传播，可导致严重的医院感染，因此，对ESBLs菌快速准确地筛选和检出，有助于临床合理使用抗菌药物，延缓细菌耐药性的产生，并控制耐药菌株的播散和流行。
我们的实验结果表明，使用MS-Auto4的专家系统对150株Eco和65株Kpn进行ESBLs筛选，可筛选出全部ESˉBLs阳性菌株，没有造成漏筛。因此，对于仪器筛选出的产ESBLs可疑菌株，我们可以进一步做确证试验，同时提醒临床医生注意使用β-内酰胺类抗生素，而仪器系统筛选为阴性的菌株，无须进行确证试验，从而减少工作量和成本。 从表1可见，用于仪器系统筛选的五种底物中，CTX、CAX和CPD的灵敏度最高，均为100.0%，其次为AZT，灵敏度为70.5%，CAZ的灵敏度最低，仅为26.2%，与国内相关报道一致 ［2，3］ 。虽然CPD的灵敏度为100.0%，但由于其特异度最低，使仪器系统整体的特异度降低，假阳性率升高。而CTX和CAX由于灵敏度和特异度均较高，成为仪器系统筛选ESBLs的最佳底物。
参考文献
1 NCCLS.Performance standards for antimicrobial susceptibility testing;ninth informational supplement.M100-S9，1999，32-36.
2 王志军，倪语星.肠杆菌科细菌超广谱β-内酰胺酶的检测.上海医学检验杂志，2000，15:101-103.
3 李家斌，王中新，俞云松，等.超广谱β-内酰胺酶最佳检测底物探讨.中华检验医学杂志，2001，24:236-237.
作者单位:516001广东省惠州市中心人民医院检验科