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【摘要】 目的 通过检测新生儿缺氧缺血性脑病（Hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE）血清IL-8、IL-6水平，探讨其在HIE时的变化特点及其临床意义。方法 采用双抗体夹心ELISA法检测60例HIE患儿及30例正常新生儿血清IL-6、IL-8。结果 （单位pg/ml）HIE组与对照组比较IL-6为34.78±25.96vs12.77±3.40，P<0.01，IL-8为23.27±12.49vs14.43±4.84，P<0.01;轻、中、重度HIE组IL-6水平各为15.77±5.71、26.90±5.03、66.78±25.43，P<0.01，IL-8水平各为17.41±6.17、22.10±5.53、31.72±18.46，P<0.01;HIE患儿中有感染合并症及无感染合并症者IL-6为42.61±28.67vs25.22±18.60，P<0.01，IL-8为27.06±14.99vs18.63±6.05，P<0.01;HIE患儿中治愈组、好转组、未愈及死亡组血清IL-6为23.26±16.88、41.05±28.92、60.56±23.60，P<0.01，IL-8为19.10±6.51、25.80±13.28、30.00±20.07，P<0.05。结论 新生儿HIE时血清IL-6、IL-8升高，病情越重升高越显著，有感染合并症者升高明显，转归差者较转归好者升高，提示检测血清IL-6、IL-8对诊断HIE、判断病情严重程度、预示感染合并症及转归有一定临床意义。
关键词 白细胞介素6 白细胞介素8 脑缺氧 脑缺血 婴儿 新生
The changes of serum interleukin-6and interleukin-8in neonates
with hypoxic ischemic encephalopathy
Fang Xiaoyi，Lin Niyang，Wu Beiyan，et al.
Neonatal Center of the First Affiliated Hospital of Shantou University Medical College，Shantou515041.
【Abstract】 Objective Through detecting the levels of the serum interleukin-6（IL-6）and interleukin-8（IL-8）in neonates with hypoxic ischemic encephalopathy（HIE），to explore the change characteristic and clinical sigˉnificance of IL-6and IL-8levels in neonates with HIE.Methods The serum IL-6and IL-8levels were meaˉsured in60neonates with HIE and30normal neonates using enzyme-linked immunoadsorbent assay（ELISA）.Reˉsults The serum IL-6and IL-8levels in neonates with HIE were higher than those in normal cases（34.78±25.96vs12.77±3.40pg/ml with P<0.01and23.27±12.49vs14.43±4.84pg/ml with P<0.01）.The differences of IL-6a
nd IL-8among mild，moderate and severe degree of HIE were significant with P<0.01and the levels were higher with more serious degree.In HIE group IL-6and IL-8levels in those who were complicated with infecˉtions were higher than those without，and in those who died or not recovered were higher than those who were cured and improved.Conclusion IL-6and IL-8taken part in the brain injuries of the neonate with HIE and measuring levels of serum IL-6and IL-8in this disease have clinical significances in diagnosis，judgments of the severity，prognosis of the infective complications and predict prognosis.
Key words interleukin-6 interleukin-8 cerebral hypoxia cerebral ischemia infant neonatal
IL-6、IL-8主要来源于单核细胞和血管内皮细胞，具广泛生物学活性，研究发现此两种物质是中枢神经系统重要的调节因子，影响神经系统的分化、生长和生存，但过多又加重脑损伤，为再灌注脑组织产物，可促进脑水肿形成。缺氧缺血性脑病（HIE）是新生儿期危害最大的常见病之一，国内外学者对其发病机制及其治疗措施进行多方面的研究，以期降低其发病率及致残率。大量研究发现缺血再灌注损伤参与缺氧缺血性脑损伤，故推测IL-6、IL-8可能参与HIE发病过程。本文通过检测新生儿HIE血清IL-8、IL-6，探讨其水平变化在新生儿HIE的临床意义。
1 对象与方法
1.1 研究对象 HIE组:60例HIE患儿于2000年10月～2003年10月在我院新生儿中心住院，诊断依据1996年杭州会议制定的《新生儿缺氧缺血性脑病诊断依据和临床分度标准》 ［1］ ，其中男38例，女22例;胎龄37～42周;入院日龄1～5天;体重2500～4000g;HIE分度:轻度22例，中度20例，重度18例;合并感染者33例（主要为肺炎、肠炎、败血症、化脓性脑膜炎、脐炎、皮肤感染等），无合并感染者27例;转归:治愈31例，好转20例，未愈及死亡9例。
正常对照组:为同期在本院产科出生、无宫内发育迟缓、无窒息及缺氧表现的足月正常新生儿30例，母孕期健康;男20例，女10例;胎龄38～41周;日龄1～4天;体重2600～3900g。
1.2 方法 检测血清IL-6、IL-8:HIE组于入院时;正常对照组于出生3天内，取外周静脉血2ml，分离血清，保存于-20℃冰箱，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测IL-6、IL-8，试剂盒购自加拿大YES生物技术有限公司，按照试剂盒操作流程由专人完成。
1.3 统计学方法 采用SPSS10.0统计软件进行分析处理，结果用均数±标准差（ˉx±s）表示;两样本间均数比较采用t检验，两组间比较采用方差分析。
2 结果
2.1 HIE新生儿与正常新生儿血清IL-6、IL-8水平比较（单位:pg/ml） HIE组新生儿血清IL-6、IL-8各为34.78±25.96、23.27±12.49，均高于正常新生儿12.77±3.40、14.43±4.84，差异均有显著统计学意义P<0.01。
2.2 HIE病情严重程度与血清IL-6、IL-8关系 轻、中、重度HIE血清IL-6、IL-8差异有统计学意义，程度越重血清IL-6、IL-8越高，见表1。
2.3 HIE有无感染合并症血清IL-6、IL-8变化 HIE患儿中有感染合并症者33例，其血清IL-6、IL-8各为42.61±28.67、27.06±14.99，与无感染合并者27例25.22±18.60、18.63±6.05比较，差异均有非常显著性P<0.01，有感染合并症者血清IL-6、IL-8高于无感染合并症者。
2.4 HIE不同转归组血清IL-6、IL-8比较 治愈组、好转组、未愈/死亡组血清IL-6、IL-8见表2，转归越差者其值越高。
表1 不同程度HIE血清IL-6、IL-8比较略
表2 不同转归HIE血清IL-6、IL-8比较略
3 讨论
IL-6及IL-8是具有广泛免疫调节作用的细胞因子，IL-6主要由T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核细胞和血管内皮细胞产生，在脑组织中由星形细胞和小胶质细胞产生，是中枢神经系统调节机体抗损伤和防御的重要因子，影响神经系统的分化、生长和生存，但过多又加重脑损伤。IL-8系由Yoshimura1987年首次从脂多糖（LPS）、植物血凝素（PHA）刺激人血单核细胞培养上清液中纯化，主要来源于单核细胞和血管内皮细胞，对中性粒细胞、T淋巴细胞和嗜碱性粒细胞均具有强烈趋化作用。
成年动物脑缺血模型发现 ［2，3］ 缺血后脑组织IL-6表 达升高，血清及脑脊液中IL-8升高，脑缺血再灌注模型 ［4］ 血清IL-6升高，IL-8先升高后下降，新生鼠HIE模型 ［5］ 脑组织IL-8表达升高。Chiesa等 ［6］ 发现窒息新生儿脐血IL-6升高，且窒息后发生HIE的新生儿IL-6升高尤其明显;Savman等 ［7］ 报道窒息后HIE新生儿脑脊液IL-6、IL-8升高，且与HIE程度相关。本研究发现HIE新生儿血清IL-8、IL-6明显高于正常新生儿，HIE程度越重其升高越明显，与同类研究结果相近 ［8］ ;有感染合并症者血清IL-6、IL-8升高，治疗效果越差的HIE新生儿其早期血清IL-6、IL-8越高。
在脑缺氧缺血损伤及再灌注时，可能激活了炎症细胞、内皮细胞等释放IL-6、IL-8。IL-6升高能刺激细胞间粘附分子-1合成，使炎性细胞聚集在病变部位，在化学趋化因子的刺激下释放氧自由基，与其他细胞因子协同发挥细胞毒性作用;IL-6升高常提示体内存在损伤，Mimasaka等发现 ［9］ 严重创伤患者血清IL-6明显升高;IL-6同时又具有神经保护作用，诱导星形细胞分化增生及神经肽合成，促进神经营养因子的产生，对中枢神经系统有营养和保护作用，IL-6对中枢神经系统的双向作用机制仍未明，有待进一步研究。IL-8可诱导中性粒细胞的穿内皮迁移，促进其对脑细胞的浸润及损伤，可促进脑水肿形成和中性粒细胞浸润 ［10］ ，应用抗IL-8抗体能减轻脑水肿。
由以上分析得知，新生儿HIE时IL-6、IL-8参与发病过程，检测血清IL-6、IL-8水平，有助于疾病诊断、病情判断、感染合并症及治疗效果预测，有一定临床意义;为进一步研究适当拮抗IL-6、IL-8作用为治疗新生儿HIE提供依据。
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作者单位:515041汕头大学医学院第一附属医院新生儿中心
（收稿日期:2004-04-05） （编辑秋 实）