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【摘要】 目的 探讨脆性组氨酸三联体基因（FHIT）的缺失在食管癌发生、发展中的作用。方法 应用免疫组化S-P法检测64例食管鳞状细胞癌组织及癌旁正常组织的FHIT基因表达水平。结果 FHIT基因在食管癌组织中缺失率71.88%（46/64），明显高于食管癌旁正常组织（12.50%，8/64），两者比较差异有非常显著性（P<0.01）。FHIT基因缺失与食管癌患者的性别、病史长短、吸烟、饮酒，均无明显关系（P>0.05）。结论 FHIT基因在食管癌中存在较高的缺失率，提示FHIT基因作为一候选抑癌基因，在食管癌的发生、发展中起重要作用。
关键词 食管癌 FHIT基因
The expression of FHIT gene in esophageal cancer
Yang Guotao，Zhou Yuting，Wang Shanzheng
Qilu Hospital，Shangdong University，Jinan250012.
【Abstract】 Objective To explore the role of the deletion of FHIT gene on the carcinogenesis and developˉment of esophageal cancer.Methods 64esophogeal cancer specimens and adjacent normal squamous mucosa speciˉmens of esophageal cancer were examined for abnormalities of FHIT genes by S-P immunohistochemicol method.Reˉsults The FHIT gene deletion in esophageal cancer tissues was71.88%（46/64），but was12.50%（8/64）in adjaˉcent normal tissues.There was significant difference between the two groups（P<0.01）.No significant correlation was observed among the deletion of FHIT gene and Sex，illness time，smoking history，drinking history.Conclusion The high deletion rate of the FHIT gene alteration is involved in tumorigenesis and development of esophageal cancer.
Key words esophageal cancer FHIT gene
人们已在多种人类原发肿瘤组织和细胞系中发现脆性组氨酸三联体（FHIT）基因缺失，认为FHIT基因的改变可能与多种肿瘤的发生、发展相关。为此本研究应用免疫组化S-P法检测64例食管鳞状细胞癌组织的FHIT基因表达水平，分析FHIT基因与临床病理特征的关系，探讨FHIT基因表达在食管癌发生中的作用。
1 资料与方法
1.1 一般资料 我院2000～2002年手术切除并经病理证实的64例食管鳞癌。其中男51例，女13例，年龄42～76岁，平均61.5岁。有吸烟史39例，饮酒史者41例，主诉病史≥3个月28例，<3个月36例。所用的兔抗人FHIT多克隆抗体一抗工作液、SP9000通用型免疫组化染色试剂盒、浓缩型DABT试剂盒、PBS液（pH7.2～7.4）等均购自北京中山生物技术有限公司。
1.2 检测方法 取肿瘤标本，常规用福尔马林固定，石蜡包埋，切片、脱蜡至水，以蒸馏水冲洗5min，用3%过氧化氢室温下孵育10min，用PBS液冲洗。然后将切片浸入0.01mol/L枸橼酸盐缓冲液（pH=6）中，煮沸30min，自然冷却，用PBS冲洗，滴加封闭用蓝色正常血清工作液，室温下孵育10min，依次滴加FHIT一抗工作液、生物素化抗工作液、辣根酶标记链霉素卵白素工作液，最后DAB显色、苏木素染色及脱水封片。FHIT基因表达产物位于胞浆，故FHIT基因表达阳性者细胞浆显示棕黄色颗粒。每张切片在400倍显微镜下选定10个视野，计算阳性细胞百分数。阳性细胞<10%为染色阴性（-），10%～25%为（±），25%～50%（-），50%为强阳性（++）。（±）、（+）、（++）均记为阳性表达。采用卡方检验。
2 结果
2.1 FHIT基因在食管鳞状细胞癌及癌旁正常上皮组织中的表达 64例肿瘤组织中，FHIT基因阳性表达18例，阴性46例，缺失率为71.88%（46/64），而64例癌旁正常组织中，FHIT基因缺失率为12.5%（8/64），两组比较差异有非常显著性（P<0.01）。
2.2 FHIT基因缺失与食管癌患者性别、病史长短、吸烟、饮酒嗜好的关系 见表1。
3 讨论
FHIT基因为将脆性位点与肿瘤联系起来的抑癌基因，位于人类染色体3q14.2。研究发现，FHIT基因结构及表达异常见于多种类型的肿瘤细胞株和原发瘤组织，包括肺癌 ［1］ 、乳腺癌 ［2］ 、头颈部癌 ［3］ 及结直肠癌等 ［4］ 。近年来，有关FHIT基因异常与食管癌发生关系的研究取得一定进展。Tanaka等 ［5］ 检测了23个食管鳞癌细胞系及35例原发癌的FHIT基因异常改变，结果有7个细胞系异常表达。Menin等 ［6］ 研究了39例食管癌的FHIT基因改变，结果30例（77%）出现FHIT基因的异常转录。本组资料显示，64例食管鳞状细胞癌组织中，46例（71.88%）出现FHIT基因缺失，而64例食管癌旁正常组织中仅有8例（12.50%）出现FHIT基因表达异常，二者差异有显著性（P<0.05），表明FHIT基
表1 FHIT基因与食管癌患者性别、病期、吸烟及饮酒关系 （略）
因作为一种抑癌基因，在食管癌的发生、发展过程中具有重要的作用。关于食管癌组织FHIT基因的表达缺失与吸烟、饮酒的关系，Mori等 ［7］ 认为有烟酒嗜好的患者比无烟酒嗜好的患者FHIT基因有明显高频率的缺失。Morita等 ［8］ 认为烟酒在上消化道癌，尤其是食管鳞状细胞癌中是危险因素，它们对于食管癌的发生可以有协同作用;重度吸烟和重度饮酒嗜好在上消化道多发癌的发生中扮演了重要角色，FHIT基因可能是这些危险因素的靶基因。而Shimada等 ［9］ 研究结果表明，FHIT蛋白表达缺失与食管癌的发生、发展有关，但与患者的预后及吸烟无关。本组研究结果表明，吸烟组FHIT基因缺失率74.36%，与不吸烟组68.00%比较无统计学差异（P>0.05）;饮酒组FHIT基因缺失率70.73%，与不饮酒组73.91%比较无统计学差异（P>0.05），表明食管癌FHIT基因表达异常与吸烟、饮酒无关，这与Shimada等的研究结果一致。出现以上不一致结果的原因，有待进一步的研究。
Kitamura等 ［10］ 研究了FHIT基因在食管侵袭性癌、原位癌和异常增生组织中的表达与临床病理特征如癌分期、淋 巴结转移或总生存率之间无明显相关。关于FHIT基因与食管鳞状细胞癌临床病理特征的关系以及与食管癌预后的关系尚有待进一步研究。
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作者单位:250012山东大学齐鲁医院